Évaluation d'un test sanguin pour mesurer la fonction immunitaire chez les personnes séropositives par rapport aux personnes séronégatives (QFM)

Les tests virologiques et immunologiques de routine pour surveiller le VIH-1 chez les personnes infectées sous traitement antirétroviral hautement actif (HAART) comprennent la numération des lymphocytes T CD4, la charge virale plasmatique du VIH-1 et les tests de résistance génotypique du VIH-1 au départ pour les patients naïfs de traitement et suite à un échec virologique au cours d'un HAART.

Le nombre de lymphocytes T CD4 est une mesure du nombre de lymphocytes T auxiliaires et, en conjonction avec le rapport CD4/cluster de différenciation 8 (CD8), sont des marqueurs de substitution pour évaluer l'état du système immunitaire et utilisés pour surveiller la progression et définir les stades de la maladie à VIH chez les sujets infectés sous ou hors traitement. Un nombre de CD4 croissant ou élevé et un rapport CD4/CD8 entre 1 et 4 suggèrent un contrôle de la réplication du virus à la suite d'un HAART (ou d'une activité immunitaire inhérente chez les sujets non traités) tandis qu'un nombre de CD4 décroissant ou bas et un rapport CD4/CD8 <1 suggère un échec du HAART et/ou une détérioration du système immunitaire.

La charge virale plasmatique du VIH-1 mesure le nombre de copies d'ARN du VIH-1 dérivées de particules virales dans le plasma. Une charge virale plasmatique détectable indique une réplication du VIH-1 tandis qu'une charge virale plasmatique indétectable suggère un contrôle de la réplication du VIH-1. Néanmoins, avec la limite inférieure de détection de 50 copies d'ARN du VIH-1/mL pour les tests commerciaux, des niveaux inférieurs de virus plasmatique peuvent rester non détectés par ces tests, mais détectables chez environ 70 % des patients sous HAART en utilisant des tests de recherche avec un seuil de <50 copie l'ARN du VIH-1/ml. Ces tests de charge virale plasmatique basés sur la recherche ne sont jamais utilisés pour la surveillance de routine dans les soins cliniques des sujets infectés.

Bien que le nombre de CD4 et la charge virale plasmatique du VIH-1 soient inextricablement liés dans le contexte de la maladie du VIH-1 et que les tests actuellement approuvés pour déterminer la réponse du VIH-1 au HAART, ces tests présentent des lacunes importantes pour le traitement efficace du VIH, comme défini ci-dessous :

• Numération des CD4 et dysfonctionnement immunitaire. L'augmentation ou l'élévation du nombre de CD4 ou des rapports CD4/CD8 normaux à la suite d'un HAART ne représente pas nécessairement un système immunitaire non compromis, mais peut représenter un état de dysfonctionnement immunitaire résultant de l'activation immunitaire due à la réplication continue du VIH.
• Réservoirs cellulaires du VIH : faibles niveaux de réplication du VIH associés aux cellules non détectés dans le plasma par un test de charge virale plasmatique standard. La réplication du VIH associée aux cellules est déterminée par réaction en chaîne de la polymérase du VIH (PCR) à partir de l'ARN total associé aux cellules extrait et purifié ou par hybridation in situ à l'ARN du VIH-1 associé aux cellules dans les cellules intactes, et détectée chez environ 62 % à 80 % des patients sous HAART avec une charge virale plasmatique de <50 copies d'ARN du VIH-1/mL. Le traitement ciblé, l'efficacité des médicaments contre le VIH associés aux cellules, la résistance du VIH associée aux cellules et l'identification de la source cellulaire du VIH peuvent être déterminés par des tests de réservoirs de cellules VIH et non par la charge virale plasmatique.
• Différences de réponse immunitaire fonctionnelle basées sur l'activité transcriptionnelle du VIH-1 associée aux cellules et non sur une charge virale plasmatique indétectable. Les réponses immunitaires chez les patients sous HAART présentant une faible réplication chronique du VIH dans les lymphocytes T circulants et une charge virale plasmatique indétectable comprennent une prolifération in vitro significative de l'antigène p24 du VIH-1, aucune réponse significative à l'antigène de rappel de l'anatoxine tétanique et des réponses plus élevées aux antigènes pathogènes par rapport aux patients sous HAART avec une réplication du VIH indétectable dans les lymphocytes T mémoire et une charge virale plasmatique indétectable.
• Adhérence des virions du VIH-1 dérivés du plasma aux érythrocytes. Les érythrocytes séquestrent les virions du VIH-1 associés au plasma dans le sang total de certains patients sous HAART. Alors que ces patients ont une charge virale plasmatique indétectable, le sang total correspondant a des valeurs de charge virale allant de 234 à 82 878 copies d'ARN du VIH-1/mL de sang total. Ces patients avec une charge virale détectable dans le sang total mais avec une charge virale plasmatique indétectable présentent une infection à VIH cliniquement avancée.
• Numération des CD4 et réponse inexplicable au HAART. Une diminution du nombre de CD4 avec une charge virale plasmatique indétectable peut s'expliquer par la séquestration du virus plasmatique du VIH dans les érythrocytes ou par de faibles niveaux de réplication du VIH associée aux cellules.
• Virions défectueux/non infectieux : les tests de charge virale plasmatique du VIH-1 ne peuvent pas être utilisés pour différencier les particules virales infectieuses et non infectieuses ou défectueuses, car < 0,2 % des virions du VIH-1 circulants (ou de 1 : 477 à 1 : 117 803) sont infectieux. Par conséquent, ces tests génotypiques et phénotypiques de résistance aux médicaments et les tests de tropisme du VIH-1 qui utilisent l'ARN du VIH-1 dérivé de l'ARN du virus plasmatique du VIH-1 généreront des résultats à partir de virus principalement non infectieux ou défectueux. La différence dans les séquences d'acides nucléiques entre les virus infectieux et non infectieux ou défectueux n'a pas été étudiée de manière appropriée en ce qui concerne les tests de diagnostic et de surveillance. Les implications de l'utilisation de séquences virales provenant de particules virales principalement non infectieuses ou défectueuses opposées à des particules virales infectieuses pour les tests de résistance aux médicaments et de tropisme dans les soins cliniques des patients infectés par le VIH sont inconnues.

Par conséquent, de plus en plus de preuves démontrent que le nombre de CD4 et la charge virale plasmatique ne peuvent pas être utilisés pour interpréter pleinement la réponse du VIH au HAART. De plus, des données de plus en plus nombreuses prouvent que la réplication continue du VIH-1 en l'absence de charge virale plasmatique détectable génère le VIH et l'antigène viral, ce qui entraîne une activation immunitaire, permettant ainsi la pathogenèse du VIH, comme en témoignent les niveaux accrus de renouvellement et de prolifération des cellules T, l'apoptose des cellules T non infectées comme ainsi que l'activation des cellules B polyclonales, des cellules tueuses naturelles (NK) et des monocytes. Divers marqueurs cellulaires ont été associés à la pathogenèse du VIH, notamment des marqueurs d'activation immunitaire Human Leukocyte Antigen (HLA)-Cell Surface Receptor (DR) (HLA-DR), cluster of differentiation 38 (CD38), cluster of differentiation 69 (CD69), cluster de différenciation 71 (CD71), groupe de marqueurs de sénescence de différenciation 57 (CD57), marqueur de prolifération Ki67 et groupe de marqueurs d'apoptose de différenciation 95 (CD95) (FasR). Ensemble, ces marqueurs de la pathogenèse du VIH permettent des réponses inflammatoires, le réensemencement des réservoirs, l'évolution du VIH-1 et la résistance aux médicaments, et des maladies non opportunistes avec une détérioration progressive du système immunitaire.

Les tests de la fonction immunitaire évaluent la fonctionnalité d'un composant du système immunitaire. Ce sont généralement des tests in vitro et sont conçus pour mesurer un résultat après exposition des lymphocytes à des antigènes ou des mitogènes spécifiques. Le résultat peut être la mesure d'un marqueur de stimulation immunitaire tel que la sécrétion d'interféron gamma, l'incorporation de thymidine tritiée dans l'ADN génomique cellulaire à la suite d'une réponse cellulaire lymphoproliférative pour rappeler l'antigène et/ou le mitogène ou, dans le cas de l'in- test cutané à la tuberculine basé sur vivo, la taille de l'induration cutanée au site d'administration du dérivé de protéine purifiée à la tuberculine.

Cellestis Limited - Une société Qiagen, a récemment développé le test QuantiFERON® Monitor (QFM ou CST007) basé sur la technologie brevetée QuantiFERON® pour fournir une mesure de la fonction immunitaire à médiation cellulaire. Il s'agit d'un test de diagnostic in vitro qui utilise une combinaison de stimulants pour stimuler spécifiquement différentes cellules immunitaires dans le sang total et mesure l'interféron-gamma libéré dans le plasma par ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Par conséquent, les objectifs de cette étude porteront sur l'utilité de la QFM dans le contexte immunodéprimé du VIH et, comme les marqueurs associés aux cellules, la pathogenèse du VIH influencent la fonction immunitaire, le test sanguin du test du réservoir viral du VIH sera inclus pour mieux comprendre le niveau de la fonction immunitaire au sein et entre les cohortes. .

Combien de temps ça va prendre? Une visite d'environ 1 heure avec le Dr Gatpolintan et son coordinateur d'études cliniques pour répondre aux questions, puis environ 10 minutes pour une prise de sang (à neuf rues du bureau du Dr Gatpolintan).

Les mesures des résultats de l'étude (corrélation entre le QFM et le nombre de CD4 et les ratios CD4/CD8) seront évaluées, y compris la présentation des données, dans un délai moyen d'un an après l'inscription du sujet à l'étude.