Modification des cytokines dans le carcinome hépatocellulaire traité par ablation thermique

Contexte Le cancer du foie est la sixième tumeur maligne la plus répandue dans le monde. Il s'agit de la quatrième cause de décès liés au cancer et son incidence mondiale s'élève à plus de 840 000 nouveaux cas en 2018.1 Le carcinome hépatocellulaire (CHC) représente 75 à 85 % des cancers primitifs du foie. L'hépatectomie, l'ablation par radiofréquence (RFA) et la transplantation hépatique orthotopique sont les principales options de traitement pour les patients atteints d'un CHC à un stade précoce.2 L'hépatectomie n'est indiquée que chez les patients présentant un CHC à un stade précoce et une fonction hépatique préservée, alors que l'application de la transplantation hépatique est limitée à l'échelle mondiale en raison de pénurie d'organes. La RFA est donc le traitement le plus efficace chez les patients atteints de CHC et de fonction hépatique limite due à une cirrhotique hépatique, en particulier dans la région Asie-Pacifique où l'infection par l'hépatite B est répandue.

L'ablation thermique tue les tumeurs par dénaturation thermique directe et coagulation des protéines tumorales.3 La rétention de cellules tumorales dévitalisées et endommagées dans le corps stimule une réponse inflammatoire robuste. Il a également été rapporté que l’ablation thermique crée une source d’antigène tumoral pour la génération d’une immunité antitumorale et améliore les réponses immunitaires de l’hôte.4 Les plaquettes activées libèrent de l'interleukine (IL) -1, du facteur de nécrose tumorale (TNF) et du facteur de croissance transformant, qui augmentent la perméabilité vasculaire et favorisent la chimiotaxie. Les neutrophiles sont attirés vers le site d'ablation et éliminent les débris en libérant des radicaux libres via des mécanismes d'éclatement oxydatifs visant à détruire les agents incitateurs. La migration des macrophages s'ensuit, passant au stade prolifératif, au cours duquel les macrophages sécrètent des facteurs de croissance, notamment le TNF, le facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF) et le facteur de croissance basique des fibroblastes.5 Le niveau d'activité proliférative des macrophages et des lymphocytes est médié positivement par l'IL-6 et négativement par l'IL-10.6, 7 En cas d'ablation incomplète ou presque complète, des cellules tumorales viables dans la zone d'ablation sublétale) peuvent être affecté positivement ou négativement par la réponse inflammatoire concomitante, notamment une augmentation des taux de cytokines et de facteurs de croissance. L'inflammation consécutive à l'ablation peut avoir des effets négatifs via la production de facteurs de croissance et de cytokines par les macrophages et les lymphocytes, qui pourraient stimuler la croissance des cellules tumorales dans la zone sublétale.8 Des études humaines et animales utilisant la coloration immunohistochimique des tissus, le test immuno-enzymatique des lysats tissulaires et le test immuno-enzymatique du plasma ont montré une augmentation significative des médiateurs inflammatoires et immunomodulateurs spécifiques après RFA.9, 10 L'investigateur principal a déjà signalé le réponses inflammatoires de l'ARF en utilisant le modèle de foie porcin, le niveau de marqueurs inflammatoires systémiques (TNF et IL-1) était significativement élevé après l'ARF, par rapport à l'hépatectomie.11 Bien que les études précliniques sur les réponses inflammatoires de l'ablation thermique pour les tumeurs hépatiques soient substantielles, la corrélation clinique de ces réactions micro-environnementales est limitée dans la littérature. Erinjeri et al.12 ont rapporté que le type d'ablation et le diagnostic principal prédisaient le changement d'IL-6 et que l'âge du patient prédisait le changement d'IL-10 après l'ablation thermique des tumeurs. L'IL-6 peut agir comme substitut à la mort cellulaire immunogène et la combinaison de procédures induisant la mort immunogène avec un inhibiteur du point de contrôle immunitaire peut être bénéfique pour prolonger la survie du patient après une RFA.13 Au niveau cellulaire, il a été prouvé que la RFA améliore la réponse des lymphocytes T spécifiques à l'antigène associé à la tumeur, ce qui contribue à la survie des patients sans récidive de CHC.14 Néanmoins, la relation possible entre la modification des cytokines induite par la RFA et sa valeur pronostique sur la récidive tumorale et la survie à long terme des patients n'est toujours pas claire.

L’investigateur principal a rapporté les résultats de 209 patients recevant de l’ARF comme seul traitement du CHC.15 Le taux global de récidive tumorale atteignait 80 % avec un suivi médian de 26 mois. Par conséquent, l’identification des patients à haut risque susceptibles de développer une récidive précoce à l’aide de biomarqueurs de substitution (par ex. cytokines) a une implication clinique importante sur l'utilisation d'un traitement adjuvant (par ex. inhibiteur de point de contrôle immunitaire).

Par conséquent, les enquêteurs proposent cette étude prospective monocentrique pour analyser le changement du niveau de cytokines sériques chez les patients atteints de CHC traités par RFA ou MWA. Le résultat sera utilisé pour corréler les résultats cliniques des patients, en particulier la récidive tumorale et les résultats de survie à long terme. Cet essai clinique proposé revêt une importance clinique pour établir le rôle potentiel de la réponse immunitaire en tant que biomarqueurs de substitution pour prédire les résultats à long terme pour les patients. Il établit la plate-forme pour une étude future du traitement adjuvant utilisant un inhibiteur de point de contrôle immunitaire pour les patients atteints de CHC traités par RFA ou autre thérapie thermique ablative. Le centre des enquêteurs est un centre de référence tertiaire à Hong Kong prenant en charge des patients atteints de maladies hépatobiliaires et pancréatiques compliquées. Le nombre de nouveaux cas de patients atteints de CHC pris en charge dans le centre des enquêteurs est d'environ 200 chaque année et le nombre de patients atteints de CHC subissant une hépatectomie est d'environ 80 chaque année. Tous les enquêteurs sont des experts possédant une vaste expérience dans les recherches cliniques et fondamentales sur les patients atteints de CHC. Les enquêteurs ont mené et publié plusieurs essais randomisés sur la prise en charge du CHC et d'autres aspects de la chirurgie hépatobiliaire dans des revues internationales.16-19

Hypothèse RFA ou MWA pour le CHC pourrait induire une réponse immunitaire inflammatoire avec une modification résultante du niveau de cytokines. Cette réaction microenvironnementale pourrait réguler positivement ou négativement les cellules tumorales résiduelles, entraînant des changements significatifs dans la récidive tumorale et la survie à long terme des patients.

Objectif de l'étude Cette étude prospective vise à étudier le changement du niveau de cytokines après RFA ou MWA pour le CHC et sa corrélation clinique avec la récidive tumorale et les données de survie à long terme des patients. Le critère de jugement principal est la récidive précoce de la tumeur dans l'année suivant l'ARF. Les mesures des résultats secondaires sont d'autres types de récidive tumorale (récidive intrahépatique tardive et métastases extrahépatiques), survie globale et survie sans récidive.

Le critère de jugement principal est la récidive précoce d'une tumeur intrahépatique dans l'année suivant la RFA et la MWA. Les mesures des résultats secondaires sont d'autres types de récidive tumorale (récidive intrahépatique tardive et métastases extrahépatiques), survie globale et survie sans récidive.

Analyse du niveau de cytokines à l'aide d'échantillons de sérum de patients étudiés

Analytes disponibles :

IL-1β, IL-6, IL-10, IL-12 (p40), IL-12 (p70), TNF-α, CXCL8, CXCL9, CXCL10, CCL2, CCL5

Kit disponible dans le commerce :

Panneau de billes magnétiques de cytokines/chimiokines humaines MILLIPLEX MAP - Test multiplex en immunologie

Application du kit :

Analysez simultanément plusieurs biomarqueurs de cytokines et de chimiokines avec le panneau de billes magnétiques de cytokines/chimiokines humaines MILLIPLEX MAP - Test multiplex d'immunologie, dans des échantillons de sérum, de plasma et de culture cellulaire humains. Il s’agit d’un test d’incubation d’une nuit.

Durée prévue de l'étude L'institution des enquêteurs est un centre de référence tertiaire majeur pour le CHC à Hong Kong. Le recrutement des patients débutera une fois l'approbation du comité d'examen de l'établissement obtenue. La période de recrutement est d'environ 12 mois à 18 mois. Avec une période de suivi médiane d'environ 18 mois, on s'attend à ce que la durée totale des études soit de trois ans.

Estimation de la taille de l'échantillon Le nombre prévu de patients à recruter est estimé à 60 en fonction du nombre de patients passés sous traitement dans le département.

Analyse statistique Toutes les données seront collectées de manière prospective par un assistant de recherche et informatisées dans une base de données. L'analyse statistique sera effectuée par le test du chi carré ou le test exact de Fisher, le cas échéant, pour comparer les variables discrètes et le test U de Mann-Whitney pour comparer les variables continues. La survie cumulée sera calculée par la méthode Kaplan-Meier et comparée par le test Log-rank. Une analyse multivariée utilisant un modèle de régression logistique sera effectuée pour identifier les facteurs pronostiques indépendants affectant la récidive tumorale précoce.

Considération éthique Cette étude sera réalisée conformément à la Déclaration d'Helsinki de l'Association médicale mondiale et de la Conférence internationale sur l'harmonisation - Bonnes pratiques cliniques.

Consentement Un consentement volontaire écrit sera obtenu après explication complète de l'essai au patient avant l'opération et la randomisation.

Pertinence pour les applications cliniques

Cette étude a une influence clinique significative sur la prise en charge chirurgicale des patients atteints de CHC. Étant donné que l'infection par l'hépatite B est encore endémique dans la région Asie-Pacifique comme Hong Kong, le CHC lié à l'hépatite B reste un fardeau parmi l'ensemble des patients atteints de cancer. Cette étude vise à établir le rôle potentiel de la réponse immunitaire en tant que biomarqueurs de substitution pour prédire les résultats à long terme pour les patients. Il améliore le développement de la plateforme pour de futures études sur le traitement adjuvant utilisant un inhibiteur de point de contrôle immunitaire pour les patients atteints de CHC traités par thérapie thermique ablative.