열절제술로 치료한 간세포암종의 사이토카인 변화

배경 간암은 세계에서 6번째로 흔한 악성 종양입니다. 이는 암 관련 사망의 네 번째 주요 원인이며 2018년에 840,000건 이상의 새로운 사례가 전 세계적으로 발생했습니다.1 간세포암종(HCC)은 원발성 간암의 75% - 85%를 차지합니다. 간 절제술, 고주파 절제술(RFA) 및 동소 간 이식은 초기 간세포암종 환자의 주요 치료 옵션입니다.2 간절제술은 초기 간세포암종이 있고 간 기능이 보존된 환자에게만 적용되는 반면, 간 이식의 적용은 다음과 같은 이유로 전 세계적으로 제한됩니다. 장기 부족. 따라서 RFA는 간경변증으로 인한 간세포암종 및 경계선 간 기능을 가진 환자, 특히 B형 간염 감염이 만연한 아시아태평양 지역에서 가장 효과적인 치료법이다.

열 절제는 종양 단백질의 직접적인 열 변성 및 응고를 통해 종양을 죽입니다.3 신체 내에서 활력이 없고 손상된 종양 세포가 유지되면 강력한 염증 반응이 자극됩니다. 또한 열 절제는 항종양 면역 생성을 위한 종양 항원 공급원을 생성하고 숙주 면역 반응을 향상시키는 것으로 보고되었습니다.4 활성화된 혈소판은 인터루킨(IL)-1, 종양괴사인자(TNF) 및 전환성장인자를 방출하여 혈관 투과성을 증가시키고 주화성을 촉진합니다. 호중구는 절제 부위로 유인되어 자극 물질을 파괴하는 것을 목표로 하는 산화 파열 메커니즘을 통해 자유 라디칼을 방출하여 잔해 청소를 수행합니다. 대식세포 이동이 뒤따르며 증식 단계로 전환되며, 이 기간 동안 대식세포는 TNF, 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 및 기본 섬유아세포 성장 인자를 비롯한 성장 인자를 분비합니다.5 대식세포와 림프구의 증식 활성 수준은 IL-6에 의해 양성으로, IL-10에 의해 음성으로 매개됩니다.6, 7 불완전 절제 또는 거의 완전한 절제의 경우, 치명적이지 않은 절제 영역에서 생존 가능한 종양 세포가 사이토카인 및 성장 인자의 증가된 수준을 포함하여 수반되는 염증 반응에 의해 긍정적 또는 부정적 영향을 받습니다. 절제 후 염증은 대식세포 및 림프구에 의한 성장 인자 및 사이토카인 생성을 통해 부정적인 영향을 미칠 수 있으며, 이는 준치사대 내에서 종양 세포 성장을 자극할 수 있습니다.8 조직의 면역조직화학적 염색, 조직 용해물의 효소 결합 면역흡착 분석, 혈장의 효소 결합 면역흡착 분석을 이용한 인간 및 동물 연구에서 RFA 이후 특정 염증 및 면역조절 매개체가 유의하게 증가한 것으로 나타났습니다.9, 10 주요 연구자는 이전에 다음과 같이 보고한 바 있습니다. 돼지 간 모델을 이용하여 RFA의 염증 반응을 분석한 결과, RFA 후 간절제술에 비해 전신 염증 표지자(TNF 및 IL-1)의 수준이 유의하게 상승한 것으로 나타났습니다.11 간 종양에 대한 열 절제술의 염증 반응에 대한 전임상 연구가 상당하지만, 이러한 미세 환경 반응의 임상적 상관관계는 문헌에서 제한적입니다. Erinjeri 등12은 절제 유형과 일차 진단이 종양의 열적 절제 후 IL-6의 변화를 예측하고 환자 연령이 IL-10의 변화를 예측한다고 보고했습니다. IL-6는 면역원성 세포 사멸의 대리 역할을 할 수 있으며, 면역원성 사멸 유도 절차와 면역 체크포인트 억제제의 조합은 RFA 후 환자 생존 기간을 연장하는 데 도움이 될 수 있습니다.13 세포 수준에서 RFA는 종양 관련 항원 특이적 T 세포 반응을 향상시키는 것으로 입증되었으며 이는 환자의 간세포암종 재발 없는 생존에 기여합니다.14 그럼에도 불구하고 RFA 유발 사이토카인 변화와 종양 재발 및 장기 환자 생존에 대한 예후 가치 사이의 가능한 관계에 대해서는 아직 명확하지 않습니다.

연구책임자는 HCC에 대한 유일한 치료법으로 RFA를 받은 209명의 환자의 결과를 보고했습니다.15 전체 종양 재발률은 최대 80%였으며 평균 추적 기간은 26개월이었습니다. 따라서 대리 바이오마커(예: 사이토카인)은 보조 치료(예: 면역관문억제제).

따라서 연구자들은 RFA 또는 MWA로 치료받은 간세포암종 환자의 혈청 사이토카인 수준의 변화를 분석하기 위해 단일기관 전향적 연구를 제안한다. 결과는 환자의 임상 결과, 특히 종양 재발과 장기 생존 결과를 연관시키는 데 사용될 것입니다. 이 제안된 임상 시험은 장기적인 환자 결과를 예측하기 위한 대리 바이오마커로서 면역 반응의 잠재적인 역할을 확립하는 데 임상적으로 중요합니다. 이는 RFA 또는 기타 열 절제 요법으로 치료된 간세포암종 환자에 대해 면역관문억제제를 사용한 보조 치료에 대한 향후 연구를 위한 플랫폼을 구축합니다. 연구자 센터는 복잡한 간담도 및 췌장 질환 환자를 관리하는 홍콩의 3차 의뢰 센터입니다. 조사센터에서 관리되는 간세포암종 신규 환자 수는 매년 200명 내외이며, 간절제술을 받는 간세포암종 환자 수는 매년 80명 내외이다. 모든 연구자들은 간세포암종 환자에 대한 임상 및 기초 연구에 대한 폭넓은 경험을 보유한 전문가입니다. 연구자들은 HCC 관리 및 간담도 수술의 기타 측면에 대한 여러 무작위 시험을 수행하고 국제 저널에 발표했습니다.16-19

가설 HCC에 대한 RFA 또는 MWA는 사이토카인 수준의 변화로 인해 염증성 면역 반응을 유도할 수 있습니다. 이러한 미세 환경 반응은 잔류 종양 세포를 긍정적으로 또는 부정적으로 조절하여 종양 재발 및 장기 환자 생존에 중요한 변화를 가져올 수 있습니다.

연구 목적 본 전향적 연구는 간세포암종에 대한 RFA 또는 MWA 후 사이토카인 수준의 변화와 종양 재발 및 환자의 장기 생존 데이터와의 임상적 상관성을 조사하는 것을 목표로 합니다. 일차 결과 측정은 RFA 후 1년 이내에 조기 종양 재발입니다. 이차 결과 측정은 다른 종양 재발 패턴(후기 간내 재발 및 간외 전이), 전체 생존 및 무재발 생존입니다.

일차 결과 측정은 RFA 및 MWA 후 1년 이내에 조기 간내 종양 재발입니다. 이차 결과 측정은 다른 종양 재발 패턴(후기 간내 재발 및 간외 전이), 전체 생존 및 무재발 생존입니다.

연구된 환자 혈청 샘플을 사용한 사이토카인 수준 분석

사용 가능한 분석물질:

IL-1β, IL-6, IL-10, IL-12(p40), IL-12(p70), TNF-α, CXCL8, CXCL9, CXCL10, CCL2, CCL5

시판되는 키트:

MILLIPLEX MAP 인간 사이토카인/케모카인 자기 비드 패널 - 면역학 다중 분석

키트 적용:

MILLIPLEX MAP 인간 사이토카인/케모카인 자기 비드 패널 - 면역학 다중 분석을 사용하여 인간 혈청, 혈장 및 세포 배양 샘플에서 다중 사이토카인 및 케모카인 바이오마커를 동시에 분석하십시오. 이것은 밤새 인큐베이션 분석입니다.

예상 연구 시간 조사 기관은 홍콩의 간세포암종에 대한 주요 3차 의뢰 센터입니다. 기관심사위원회(Institution Review Board)의 승인을 얻은 후 환자 모집이 시작됩니다. 채용기간은 약 12개월~18개월 정도입니다. 평균 추적 기간은 약 18개월로 총 연구 기간은 3년으로 예상된다.

표본크기 추정 모집할 예상 환자수는 과거 해당 진료과에서 진료받았던 환자수를 기준으로 60명으로 추정된다.

통계 분석 모든 데이터는 연구 보조원에 의해 전향적으로 수집되어 데이터베이스에 전산화됩니다. 통계적 분석은 적절한 경우 이산형 변수를 비교하기 위해 카이제곱 검정 또는 Fisher의 정확 검정으로 수행되고, 연속형 변수를 비교하기 위해 Mann-Whitney U 검정으로 수행됩니다. 누적 생존율은 Kaplan-Meier 방법으로 계산하고 로그 순위 테스트로 비교합니다. 조기 종양 재발에 영향을 미치는 독립적인 예후 인자를 확인하기 위해 로지스틱 회귀 모델을 사용한 다변량 분석을 수행합니다.

윤리적 고려 본 연구는 세계의사협회 헬싱키 선언과 조화에 관한 국제회의 - 우수임상관리기준(Good Clinical Practice)에 따라 수행됩니다.

동의 수술 및 무작위 배정 전 환자에게 임상시험에 대해 충분히 설명한 후 자발적인 서면 동의를 얻습니다.

임상 적용과의 관련성

이 연구는 HCC 환자의 수술 관리에 중요한 임상적 영향을 미칩니다. B형 간염 감염은 홍콩 등 아시아 태평양 지역에서 여전히 풍토병이기 때문에 B형 간염과 관련된 간세포암종은 여전히 ​​전체 암 환자들에게 부담이 되고 있습니다. 이 연구는 장기적인 환자 결과를 예측하기 위한 대리 바이오마커로서 면역 반응의 잠재적인 역할을 확립하는 것을 목표로 합니다. 이는 열 절제 요법으로 치료받은 간세포암종 환자를 위한 면역관문 억제제를 사용한 보조 치료에 대한 향후 연구를 위한 플랫폼 개발을 강화합니다.