A termikus ablációval kezelt hepatocelluláris karcinóma citokinváltozása

Háttér A májrák a hatodik leggyakoribb rosszindulatú daganat a világon. Ez a rákkal összefüggő halálozások negyedik leggyakoribb oka, és 2018-ban világszerte több mint 840 000 új esetet regisztráltak.1 A hepatocelluláris karcinóma (HCC) az elsődleges májrák 75–85%-áért felelős. A hepatektómia, a rádiófrekvenciás abláció (RFA) és az ortotopikus májátültetés a fő kezelési lehetőség a korai stádiumú HCC-ben szenvedő betegek számára.2 A hepatektómia csak korai stádiumú HCC-ben szenvedő és megőrzött májfunkciójú betegeknél javasolt, míg a májátültetés alkalmazása világszerte korlátozott a szervhiány. Az RFA ezért a leghatékonyabb kezelés a HCC-ben szenvedő és cirrhoticus májműködés miatti határesetben szenvedő betegeknél, különösen az ázsiai-csendes-óceáni térségben, ahol a hepatitis B fertőzés elterjedt.

A termikus abláció elpusztítja a daganatokat a tumorfehérjék közvetlen termikus denaturálásával és koagulációjával. A devitalizált és sérült daganatsejtek visszatartása a szervezetben erőteljes gyulladásos választ serkent. Arról is beszámoltak, hogy a termikus abláció tumorantigénforrást hoz létre a daganatellenes immunitás létrehozásához, és fokozza a gazdaszervezet immunválaszát. Az aktivált vérlemezkék felszabadítják az interleukin (IL) -1-et, a tumor nekrózis faktort (TNF) és a transzformáló növekedési faktort, amelyek növelik az erek permeabilitását és elősegítik a kemotaxist. A neutrofilek az ablációs helyhez vonzódnak, és a szabad gyököket szabad gyökök felszabadításával végzik, amelyek célja az ingerlő ágensek elpusztítása. Megtörténik a makrofágok migrációja, átlépve a proliferatív stádiumba, amely során a makrofágok növekedési faktorokat választanak ki, beleértve a TNF-et, a vaszkuláris endoteliális növekedési faktort (VEGF) és az alapvető fibroblaszt növekedési faktort. A makrofágok és limfociták proliferációs aktivitását az IL-6 pozitívan, az IL-10 pedig negatívan közvetíti.6, 7 Hiányos vagy csaknem teljes abláció esetén a szubletális ablációs zónában élő tumorsejtek) előfordulhatnak. pozitívan vagy negatívan befolyásolja az egyidejű gyulladásos válasz, beleértve a citokinek és növekedési faktorok emelkedett szintjét. Az ablációt követő gyulladásnak negatív hatásai lehetnek a makrofágok és limfociták növekedési faktorok és citokinek termelődése révén, ami serkentheti a tumorsejtek növekedését a szubletális zónában. A szövetek immunhisztokémiai festésével, a szöveti lizátumok enzimhez kötött immunoszorbens vizsgálatával és a plazma enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatával végzett humán és állatkísérletek kimutatták, hogy az RFA után jelentős növekedést mutattak a specifikus gyulladásos és immunmoduláló mediátorok.9, 10 Az RFA gyulladásos válaszai a sertésmáj modellt használva, hogy a szisztémás gyulladásos markerek (TNF és IL-1) szintje szignifikánsan megemelkedett RFA után, összehasonlítva a hepatektómiával.11 Bár a májdaganat termikus ablációjának gyulladásos válaszaival kapcsolatos preklinikai vizsgálatok jelentősek, ezeknek a mikrokörnyezeti reakcióknak a klinikai korrelációja korlátozott az irodalomban. Erinjeri és munkatársai12 arról számoltak be, hogy az abláció típusa és az elsődleges diagnózis előrevetítette az IL-6 változását, a páciens életkora pedig az IL-10 változását a tumorok termikus ablációja után. Az IL-6 helyettesítheti az immunogén sejthalált, és az immunogén halált indukáló eljárások és az immunellenőrzési pont inhibitorok kombinációja előnyös lehet a betegek túlélése meghosszabbításában RFA után.13 Sejtszinten az RFA-ról bebizonyosodott, hogy fokozza a tumor-asszociált antigén-specifikus T-sejt-választ, és ez hozzájárul a betegek HCC kiújulásmentes túléléséhez.14 Mindazonáltal még mindig nem világos az RFA által kiváltott citokinek változása és annak prognosztikai értéke közötti lehetséges kapcsolat a daganat kiújulásával és a betegek hosszú távú túlélésével kapcsolatban.

A fő vizsgáló 209 olyan beteg eredményeiről számolt be, akik RFA-t kaptak a HCC egyetlen kezelésében.15 A teljes daganat kiújulási aránya 80% volt, átlagosan 26 hónapos követési idővel. Ezért a helyettesítő biomarkerek (pl. citokinek) fontos klinikai vonatkozásai vannak az adjuváns kezelések (pl. immunellenőrző pont gátló).

Ezért a kutatók ezt az egyközpontú prospektív vizsgálatot javasolják az RFA-val vagy MWA-val kezelt HCC-s betegek szérum citokinszintjének változásának elemzésére. Az eredményt a betegek klinikai kimenetelének, különösen a daganat kiújulásának és a hosszú távú túlélési kimenetelnek a korrelálására fogják használni. Ez a javasolt klinikai vizsgálat klinikai jelentőséggel bír az immunválasz potenciális szerepének megállapításában, mint helyettesítő biomarker a betegek hosszú távú kimenetelének előrejelzésében. Megalapozza a platformot az RFA-val vagy más termikus ablatív terápiával kezelt HCC-ben szenvedő betegek immunkontroll-gátlót alkalmazó adjuváns kezelésének jövőbeni tanulmányozására. A vizsgálók központja egy hongkongi felsőfokú beutaló központ, ahol bonyolult máj-epe- és hasnyálmirigy-betegségben szenvedő betegeket kezelnek. A vizsgálóközpontban kezelt HCC-s betegek új eseteinek száma évente 200 körüli, a hepatektómián átesett HCC-s betegek száma pedig évente 80 körül van. Valamennyi kutató szakértő, aki nagy tapasztalattal rendelkezik a HCC-s betegek klinikai és alapkutatásában. A kutatók számos randomizált vizsgálatot végeztek és publikáltak nemzetközi folyóiratokban a HCC kezeléséről és a hepatobiliaris műtét egyéb vonatkozásairól.16-19.

A HCC-re vonatkozó RFA vagy MWA hipotézis gyulladásos immunválaszt indukálhat, ami a citokinszint változását eredményezi. Ez a mikrokörnyezeti reakció pozitívan vagy negatívan szabályozhatja a reziduális tumorsejteket, ami jelentős változásokhoz vezet a tumor kiújulásában és a betegek hosszú távú túlélésében.

A tanulmány célja Jelen prospektív vizsgálat célja a citokinek szintjének RFA vagy MWA hatására bekövetkező változásának vizsgálata HCC esetén, valamint ennek klinikai összefüggésének vizsgálata a daganat kiújulásával és a betegek hosszú távú túlélési adataival. Az elsődleges kimenetel a daganat korai kiújulása az RFA után egy éven belül. A másodlagos kimenetel mérőszámai az egyéb daganatkiújulási minták (késői intrahepatikus recidíva és extrahepatikus áttétek), a teljes túlélés és a kiújulásmentes túlélés.

Az elsődleges kimenetel a korai intrahepatikus daganat kiújulása az RFA és MWA után egy éven belül. A másodlagos kimenetel mérőszámai az egyéb daganatkiújulási minták (késői intrahepatikus recidíva és extrahepatikus áttétek), a teljes túlélés és a kiújulásmentes túlélés.

A citokinek szintjének elemzése vizsgált páciens szérummintáival

Elérhető analitok:

IL-1β, IL-6, IL-10, IL-12 (p40), IL-12 (p70), TNF-α, CXCL8, CXCL9, CXCL10, CCL2, CCL5

Kereskedelmi forgalomban kapható készlet:

MILLIPLEX MAP Humán citokin/kemokin mágneses gyöngy panel – Immunológiai multiplex vizsgálat

A készlet alkalmazása:

Több citokin és kemokin biomarker egyidejű elemzése a MILLIPLEX MAP humán citokin/kemokin mágneses gyöngy panellel – Immunology Multiplex Assay, humán szérum-, plazma- és sejttenyészetmintákban. Ez egy éjszakai inkubációs vizsgálat.

A vizsgálat várható ideje A vizsgálók intézménye a HCC fő felsőfokú beutalási központja Hongkongban. A betegek toborzása az Intézményi Felülvizsgálati Testület jóváhagyását követően indul. A felvételi időszak körülbelül 12 hónaptól 18 hónapig terjed. A körülbelül 18 hónapos medián követési időszakkal a teljes vizsgálati idő várhatóan három év.

A mintanagyság becslése A felvett betegek várható számát 60 főre becsülik az osztályon kezelt korábbi betegek száma alapján.

Statisztikai elemzés Az összes adatot egy kutatási asszisztens gyűjti össze, és egy adatbázisba számítógépesíti. A statisztikai elemzést Chi-négyzet próbával vagy Fisher-féle egzakt teszttel kell elvégezni a diszkrét változók összehasonlítására, illetve Mann-Whitney U tesztet a folytonos változók összehasonlítására. A kumulatív túlélést Kaplan-Meier módszerrel számítjuk ki, és Log-rank teszttel hasonlítjuk össze. Logisztikus regressziós modellt alkalmazó többváltozós analízist végzünk a korai daganatkiújulást befolyásoló független prognosztikai tényezők azonosítására.

Etikai megfontolások Ezt a vizsgálatot az Orvosi Világszövetség Helsinki Nyilatkozatával és a Nemzetközi Harmonizációs Konferenciával – Helyes Klinikai Gyakorlattal összhangban végezzük.

Hozzájárulás Az írásos önkéntes beleegyezést a műtét és a randomizálás előtt a betegnek a vizsgálat teljes körű ismertetése után kell megszerezni.

Relevancia a klinikai alkalmazásokhoz

Ez a vizsgálat jelentős klinikai befolyást gyakorol a HCC-s betegek sebészi kezelésére. Mivel a hepatitis B fertőzés továbbra is endémiás az ázsiai-csendes-óceáni térségben, például Hongkongban, a hepatitis B-vel kapcsolatos HCC továbbra is terhet jelent a rákos betegek teljes csoportjában. Ennek a tanulmánynak az a célja, hogy megállapítsa az immunválasz potenciális szerepét helyettesítő biomarkerként a betegek hosszú távú kimenetelének előrejelzésében. Elősegíti a platform fejlesztését az immun-ellenőrzőpont-gátlót alkalmazó adjuváns kezelés jövőbeni tanulmányozására termikus ablatív terápiával kezelt HCC-s betegeknél.