熱アブレーションで治療した肝細胞癌におけるサイトカインの変化

背景 肝臓がんは世界で 6 番目に多い悪性腫瘍です。 肝細胞癌 (HCC) は癌関連死亡の 4 番目の主要な原因であり、2018 年には世界の新規症例数が 84 万人を超えています。1 肝細胞癌 (HCC) は原発性肝臓癌の 75% ～ 85% を占めます。 肝切除術、高周波アブレーション (RFA)、同所性肝移植は、早期 HCC 患者に対する主な治療選択肢です 2。肝切除術は、肝機能が保存されている早期 HCC 患者にのみ適応されますが、肝移植の適用は世界的に限定されています。臓器不足。 したがって、RFAは、特にB型肝炎感染が蔓延しているアジア太平洋地域において、HCCおよび肝硬変による肝機能境界線を有する患者にとって最も効果的な治療法となります。

熱アブレーションは、腫瘍タンパク質の直接的な熱変性と凝固を介して腫瘍を死滅させます。3 活力を失い損傷した腫瘍細胞が体内に滞留すると、強力な炎症反応が刺激されます。 また、熱アブレーションにより、抗腫瘍免疫を生成するための腫瘍抗原源が作成され、宿主の免疫応答が強化されることも報告されています。 活性化された血小板は、インターロイキン (IL) -1、腫瘍壊死因子 (TNF)、およびトランスフォーミング成長因子を放出し、これらが血管透過性を高め、走化性を促進します。 好中球は切除部位に引き寄せられ、誘発物質の破壊を目的とした酸化的バースト機構を介してフリーラジカルを放出することによって破片の除去を実行します。 マクロファージの遊走が続き、増殖段階に移行します。その間、マクロファージは、TNF、血管内皮増殖因子 (VEGF)、塩基性線維芽細胞増殖因子などの増殖因子を分泌します。5 マクロファージとリンパ球の増殖活性のレベルは、IL-6 によってポジティブに、IL-10 によってネガティブに媒介されます。6、7 不完全なアブレーションまたはほぼ完全なアブレーションの場合、致死未満のアブレーション ゾーン内の生存可能な腫瘍細胞が損傷を受ける可能性があります。サイトカインや成長因子のレベルの上昇など、付随する炎症反応によってプラスまたはマイナスの影響を受けます。 アブレーション後の炎症は、マクロファージやリンパ球による成長因子やサイトカインの産生を介して悪影響を与える可能性があり、亜致死領域内での腫瘍細胞の成長を刺激する可能性があります。8 組織の免疫組織化学的染色、組織溶解物の酵素結合免疫吸着検定法、および血漿の酵素結合免疫吸着検定法を使用したヒトおよび動物の研究では、RFA 後に特定の炎症性メディエーターおよび免疫調節メディエーターが大幅に増加することが示されています。9、10。主任研究者は以前にブタ肝臓モデルを用いた RFA の炎症反応では、全身炎症マーカー (TNF および IL-1) のレベルが肝切除術と比較して RFA 後に有意に上昇したことが示されました。11 肝腫瘍に対する熱アブレーションの炎症反応に関する前臨床研究は充実していますが、これらの微小環境反応の臨床相関は文献的に限られています。 Erinjeri ら 12 は、腫瘍の熱切除後のアブレーションの種類と一次診断によって IL-6 の変化が予測され、患者の年齢によって IL-10 の変化が予測されたと報告しました。 IL-6 は免疫原性細胞死の代用として機能する可能性があり、免疫原性細胞死誘導手順と免疫チェックポイント阻害剤の組み合わせは、RFA 後の患者の生存期間を延長するのに有益である可能性があります。13 細胞レベルでは、RFA は腫瘍関連抗原特異的 T 細胞応答を強化することが証明されており、これは患者の HCC 再発のない生存に貢献します。14 それにもかかわらず、RFA 誘発性サイトカインの変化と、腫瘍再発および患者の長期生存に対するその予後値との関係の可能性についてはまだ明らかではありません。

主任研究者は、HCC の唯一の治療法として RFA を受けている 209 人の患者の結果を報告しました。15 全体的な腫瘍再発率は最大 80% で、追跡調査期間の中央値は 26 か月でした。 したがって、代替バイオマーカー（例： サイトカイン）は、補助療法（例、サイトカイン）の使用に重要な臨床的意味を持ちます。 免疫チェックポイント阻害剤）。

したがって、研究者らは、RFA または MWA で治療された HCC 患者の血清サイトカイン レベルの変化を分析するために、この単一施設の前向き研究を提案しています。 この結果は、患者の臨床転帰、特に腫瘍再発と長期生存転帰を相関させるために使用されます。 この提案された臨床試験は、長期的な患者の転帰を予測するための代替バイオマーカーとしての免疫応答の潜在的な役割を確立する上で臨床的に重要です。 これは、RFA またはその他の熱切除療法によって治療された HCC 患者に対する免疫チェックポイント阻害剤を使用した補助治療の将来の研究のためのプラットフォームを確立します。 この研究者センターは、複雑な肝胆道疾患および膵臓疾患の患者を管理する香港の三次紹介センターです。 研究者センターで管理される HCC 患者の新規症例数は毎年約 200 人で、肝切除術を受ける HCC 患者の数は毎年約 80 人です。 研究者は全員、HCC患者の臨床研究および基礎研究において豊富な経験を持つ専門家です。 研究者らは、HCCの管理および肝胆道手術のその他の側面に関するいくつかのランダム化試験を実施し、国際ジャーナルに発表した16-19。

仮説 HCC に対する RFA または MWA は炎症性免疫反応を誘発し、その結果サイトカインレベルが変化する可能性があります。 この微小環境の反応は、残存腫瘍細胞をプラスまたはマイナスに制御し、腫瘍の再発と患者の長期生存に大きな変化をもたらす可能性があります。

研究の目的 この前向き研究は、HCC に対する RFA または MWA 後のサイトカイン レベルの変化と、腫瘍再発および患者の長期生存データとの臨床相関を調査することを目的としています。 主要評価項目は、RFA 後 1 年以内の早期腫瘍再発です。 副次評価項目は、その他の腫瘍再発パターン（晩期肝内再発および肝外転移）、全生存期間、および無再発生存期間です。

主要評価項目は、RFA および MWA 後 1 年以内の早期肝内腫瘍再発です。 副次評価項目は、その他の腫瘍再発パターン（晩期肝内再発および肝外転移）、全生存期間、および無再発生存期間です。

研究対象の患者血清サンプルを使用したサイトカインレベルの分析

利用可能な分析物:

IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12 (p40)、IL-12 (p70)、TNF-α、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CCL2、CCL5

市販キット：

MILLIPLEX MAP ヒトサイトカイン/ケモカイン磁気ビーズパネル - 免疫学マルチプレックスアッセイ

キットの適用:

MILLIPLEX MAP ヒトサイトカイン/ケモカイン磁気ビーズパネル - 免疫学マルチプレックスアッセイを使用して、ヒト血清、血漿、および細胞培養サンプル中の複数のサイトカインおよびケモカインのバイオマーカーを同時に分析します。 これは一晩インキュベーションアッセイです。

予想される研究期間 研究者らの施設は、香港における肝細胞癌の主要な三次紹介センターである。 施設審査委員会の承認が得られ次第、患者の募集を開始します。 採用期間は12ヶ月～18ヶ月程度です。 追跡期間の中央値は約 18 か月で、総研究期間は 3 年になると予想されます。

サンプルサイズの推定 募集される患者の予想数は、当科で治療を受けている過去の患者数に基づいて 60 名と推定されます。

統計分析 すべてのデータは研究助手によって将来に向けて収集され、データベースにコンピュータ化されます。 統計分析は、必要に応じて、離散変数を比較するためにカイ二乗検定またはフィッシャーの直接確率検定によって実行され、連続変数を比較するにはマン・ホイットニー U 検定によって実行されます。 累積生存率はカプランマイヤー法によって計算され、ログランク検定によって比較されます。 ロジスティック回帰モデルを使用した多変量解析は、早期腫瘍再発に影響を与える独立した予後因子を特定するために行われます。

倫理的配慮 この研究は、世界医師会のヘルシンキ宣言および調和に関する国際会議 - 適正臨床慣行に従って実施されます。

同意 手術および無作為化の前に患者に治験について十分に説明した後、書面による自発的同意が得られます。

臨床応用との関連性

この研究は、HCC患者の外科的管理に臨床的に重大な影響を及ぼします。 B 型肝炎感染は香港などのアジア太平洋地域では依然として風土病であるため、B 型肝炎関連の HCC は依然としてがん患者全体の負担となっています。 この研究は、長期的な患者の転帰を予測するための代替バイオマーカーとしての免疫応答の潜在的な役割を確立することを目的としています。 これは、熱切除療法で治療された HCC 患者に対する免疫チェックポイント阻害剤を使用した補助療法の将来の研究のためのプラットフォームの開発を強化します。