Cambio de citocinas en el carcinoma hepatocelular tratado mediante ablación térmica

Antecedentes El cáncer de hígado es la sexta neoplasia maligna más común en el mundo. Es la cuarta causa principal de muertes relacionadas con el cáncer y tiene una incidencia global de más de 840.000 casos nuevos en 2018.1 El carcinoma hepatocelular (CHC) representa entre el 75% y el 85% del cáncer primario de hígado. La hepatectomía, la ablación por radiofrecuencia (ARF) y el trasplante ortotópico de hígado son las principales opciones de tratamiento para pacientes con CHC en estadio temprano.2 La hepatectomía solo está indicada en pacientes con CHC en estadio temprano y función hepática preservada, mientras que la aplicación del trasplante de hígado está limitada globalmente debido a escasez de órganos. Por lo tanto, la RFA es el tratamiento más eficaz en pacientes con CHC y función hepática límite debido a hígado cirrótico, especialmente en la región de Asia y el Pacífico, donde la infección por hepatitis B es prevalente.

La ablación térmica mata los tumores mediante la desnaturalización térmica directa y la coagulación de las proteínas tumorales.3 La retención de células tumorales desvitalizadas y dañadas dentro del cuerpo estimula una fuerte respuesta inflamatoria. También se ha informado que la ablación térmica crea una fuente de antígeno tumoral para la generación de inmunidad antitumoral y mejora las respuestas inmunes del huésped.4 Las plaquetas activadas liberan interleucina (IL) -1, factor de necrosis tumoral (TNF) y factor de crecimiento transformante, que aumentan la permeabilidad vascular y promueven la quimiotaxis. Los neutrófilos son atraídos al sitio de ablación y eliminan los desechos liberando radicales libres a través de mecanismos de explosión oxidativa destinados a destruir los agentes incitadores. Se produce la migración de los macrófagos, pasando a la etapa proliferativa, durante la cual los macrófagos secretan factores de crecimiento, incluido el TNF, el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) y el factor de crecimiento de fibroblastos básico.5 El nivel de actividad proliferativa de macrófagos y linfocitos está mediado positivamente por IL-6 y negativamente por IL-106, 7. En caso de ablación incompleta o casi completa, se pueden eliminar células tumorales viables en la zona de ablación subletal. afectado positiva o negativamente por la respuesta inflamatoria concomitante, incluido el aumento de los niveles de citocinas y factores de crecimiento. La inflamación posterior a la ablación puede tener efectos negativos a través de la producción de factores de crecimiento y citoquinas por parte de macrófagos y linfocitos, que podrían estimular el crecimiento de células tumorales dentro de la zona subletal.8 Los estudios en humanos y animales que utilizan tinción inmunohistoquímica de tejidos, ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas de lisados ​​tisulares y ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas de plasma han mostrado un aumento significativo de mediadores inflamatorios e inmunomoduladores específicos después de la RFA.9, 10 El investigador principal ha informado previamente respuestas inflamatorias de la RFA utilizando el modelo de hígado porcino que el nivel de marcadores inflamatorios sistémicos (TNF e IL-1) se elevó significativamente después de la RFA, en comparación con la hepatectomía.11 Aunque los estudios preclínicos sobre las respuestas inflamatorias de la ablación térmica de tumores hepáticos son sustanciales, la correlación clínica de estas reacciones microambientales es limitada en la literatura. Erinjeri et al.12 informaron que el tipo de ablación y el diagnóstico primario predijeron el cambio de IL-6 y la edad del paciente predijo el cambio de IL-10 después de la ablación térmica de los tumores. La IL-6 puede actuar como sustituto de la muerte celular inmunogénica y la combinación de procedimientos inmunogénicos que inducen la muerte con un inhibidor del punto de control inmunológico puede ser beneficiosa para prolongar la supervivencia del paciente después de la ARF.13 A nivel celular, se ha demostrado que la RFA mejora la respuesta de las células T específicas del antígeno asociado al tumor y esto contribuye a la supervivencia libre de recurrencia del CHC de los pacientes.14 Sin embargo, todavía no está clara la posible relación entre el cambio de citocinas inducido por la RFA y su valor pronóstico sobre la recurrencia del tumor y la supervivencia del paciente a largo plazo.

El investigador principal ha informado los resultados de 209 pacientes que recibieron ARF como único tratamiento para el CHC.15 La tasa general de recurrencia del tumor fue de hasta el 80 % con una mediana de seguimiento de 26 meses. Por lo tanto, la identificación de pacientes de alto riesgo que podrían desarrollar una recurrencia temprana utilizando biomarcadores sustitutos (p. ej. citocinas) conlleva una implicación clínica importante sobre el uso del tratamiento adyuvante (p. ej. inhibidor del punto de control inmunológico).

Por tanto, los investigadores proponen este estudio prospectivo unicéntrico para analizar el cambio en el nivel de citocinas séricas en pacientes con CHC tratados con RFA o MWA. El resultado se utilizará para correlacionar el resultado clínico de los pacientes, especialmente la recurrencia del tumor y el resultado de supervivencia a largo plazo. Este ensayo clínico propuesto es de importancia clínica para establecer el papel potencial de la respuesta inmune como biomarcadores sustitutos para predecir el resultado del paciente a largo plazo. Establece la plataforma para estudios futuros del tratamiento adyuvante utilizando inhibidores de puntos de control inmunológico para pacientes con CHC tratados mediante RFA u otra terapia de ablación térmica. El centro de investigadores es un centro de referencia terciario en Hong Kong que atiende a pacientes con enfermedades hepatobiliares y pancreáticas complicadas. El número de casos nuevos de pacientes con CHC tratados en el centro de investigadores es de alrededor de 200 cada año y el número de pacientes con CHC sometidos a hepatectomía es de alrededor de 80 cada año. Todos los investigadores son expertos con amplia experiencia en investigaciones clínicas y básicas de pacientes con CHC. Los investigadores han realizado y publicado varios ensayos aleatorios sobre el tratamiento del CHC y otros aspectos de la cirugía hepatobiliar en revistas internacionales.16-19

La hipótesis RFA o MWA para el CHC podría inducir una respuesta inmune inflamatoria con el consiguiente cambio en el nivel de citoquinas. Esta reacción microambiental podría regular positiva o negativamente las células tumorales residuales, lo que provocaría cambios significativos en la recurrencia del tumor y la supervivencia del paciente a largo plazo.

Objetivo del estudio Este estudio prospectivo tiene como objetivo investigar el cambio en el nivel de citoquinas después de RFA o MWA para CHC y su correlación clínica con la recurrencia del tumor y los datos de supervivencia a largo plazo de los pacientes. La medida de resultado primaria es la recurrencia temprana del tumor dentro de un año después de la RFA. Las medidas de resultado secundarias son otro patrón de recurrencia tumoral (recurrencia intrahepática tardía y metástasis extrahepática), supervivencia general y supervivencia libre de recurrencia.

La medida de resultado primaria es la recurrencia temprana del tumor intrahepático dentro de un año después de la RFA y MWA. Las medidas de resultado secundarias son otro patrón de recurrencia tumoral (recurrencia intrahepática tardía y metástasis extrahepática), supervivencia general y supervivencia libre de recurrencia.

Análisis del nivel de citocinas utilizando muestras de suero de pacientes estudiados.

Analitos disponibles:

IL-1β, IL-6, IL-10, IL-12 (p40), IL-12 (p70), TNF-α, CXCL8, CXCL9, CXCL10, CCL2, CCL5

Kit disponible comercialmente:

MILLIPLEX MAP Panel de perlas magnéticas de citocinas/quimiocinas humanas - Ensayo multiplex de inmunología

Aplicación del kit:

Analice simultáneamente múltiples biomarcadores de citocinas y quimiocinas con el panel de perlas magnéticas de citocinas/quimiocinas humanas MILLIPLEX MAP: ensayo inmunológico múltiple, en muestras de suero, plasma y cultivos celulares humanos. Este es un ensayo de incubación durante la noche.

Tiempo previsto de estudio La institución de investigadores es un importante centro de referencia terciario para CHC en Hong Kong. El reclutamiento de pacientes se iniciará una vez que se obtenga la aprobación de la Junta de Revisión Institucional. El período de contratación es de alrededor de 12 meses a 18 meses. Con un período de seguimiento medio de alrededor de 18 meses, se espera que el período total de estudio sea de tres años.

Estimación del tamaño de la muestra El número esperado de pacientes que se reclutarán se estima en 60 según el número de pacientes anteriores en tratamiento en el departamento.

Análisis estadístico Todos los datos serán recopilados prospectivamente por un asistente de investigación y computarizados en una base de datos. El análisis estadístico se realizará mediante la prueba de Chi-cuadrado o la prueba exacta de Fisher, cuando corresponda, para comparar variables discretas y la prueba U de Mann-Whitney para comparar variables continuas. La supervivencia acumulada se calculará mediante el método de Kaplan-Meier y se comparará mediante la prueba de rango logarítmico. Se realizará un análisis multivariable utilizando un modelo de regresión logística para identificar los factores de pronóstico independientes que afectan la recurrencia temprana del tumor.

Consideración ética Este estudio se llevará a cabo de acuerdo con la Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial y la Conferencia Internacional sobre Armonización - Buenas Prácticas Clínicas.

Consentimiento Se obtendrá el consentimiento voluntario por escrito después de una explicación completa del ensayo al paciente antes de la operación y la aleatorización.

Relevancia para las aplicaciones clínicas.

Este estudio tiene una influencia clínica significativa en el tratamiento quirúrgico del paciente con CHC. Dado que la infección por hepatitis B sigue siendo endémica en la zona de Asia y el Pacífico, como Hong Kong, el CHC relacionado con la hepatitis B sigue siendo una carga para todos los pacientes con cáncer. Este estudio tiene como objetivo establecer el papel potencial de la respuesta inmune como biomarcadores sustitutos para predecir el resultado del paciente a largo plazo. Mejora el desarrollo de la plataforma para estudios futuros del tratamiento adyuvante utilizando inhibidores de puntos de control inmunológico para pacientes con CHC tratados con terapia ablativa térmica.