Sebészeti metabolikus fenotipizálás longitudinális értékelési tanulmány (SaMPLE)

A rendszerszemlélet valós időben javíthatja a sebészeti döntéshozatalt a műtét előtt és után egyaránt. Konkrétan azt feltételezzük, hogy fontos diagnosztikai és prognosztikai információkat szolgáltathat, amelyek pontosabbak, mint a jelenlegi biokémiai megközelítések. Ennek az az oka, hogy fontos környezeti hatásokért felelős a műtéti kimenetelre, mint például a farmakoterápia és a bél mikrobiota.

A másodlagos hipotézis az, hogy ez a megközelítés valós idejű molekuláris visszacsatolást tud adni a kezelőnek a műtét során a szövet típusáról és patológiájáról.

Ennek a munkának ezért olyan betegeket kell tanulmányoznia, akik különböző körülmények között és állapotok között, valamint különböző típusú sebészeti beavatkozások mellett műtéten estek át. Ismeretes, hogy például a rákos betegeknek egészen más anyagcsere-igényük van, mint a nem szenvedőknek. Ez jelentős hatással van a műtéten átesett rákos betegek személyre szabott kezelési stratégiáinak kidolgozására. Lényeges, hogy ez a tanulmány határozottan bizonyítsa, hogy a technológia képes leírást készíteni a jelentősen eltérő betegségi állapotú betegek között, és meg tudja különböztetni ezt az elvégzendő műtéti beavatkozás típusától és nagyságától, valamint a műtét időpontjától. Ezért ez a munka heterogén betegcsoportot foglal magában.

Dizájnt tanulni:

Ez a tanulmány a Biosebészeti és Sebészeti Technológiai Tanszéken belül biztosított kutatásirányítási struktúrák hatálya alá tartozik majd, a Biomolekuláris medicina részlegével együtt a minták és a gépek biztonságos használatára. Rendelkezik egy klinikai irányítóbizottsággal is, amely felméri a munka előrehaladását, klinikai eredményeit, biztonságát és időben történő befejezését.

Két külön klinikai csoportot vesznek fel ehhez a vizsgálathoz. Az első az elektív beavatkozáson áteső betegek, a második pedig a sürgősségi beavatkozáson áteső betegek. Ezen csoportok mindegyike tartalmazni fogja a klinikai állapotok alkategóriáit, amelyekre a vizsgálat összpontosít.

Választható műtét (n=200):

A. Rákos betegek. Ide tartoznak azok a betegek, akiknél a gyomor-bélrendszer és a vastag- és végbélrendszer rosszindulatú daganata (beleértve a mikrosebészeti beavatkozással kimetszetteket is), emlőrák vagy szolid vese daganata van.

B. Műtétet igénylő jóindulatú bélbetegségben szenvedő betegek, pl. gyulladásos bélbetegség C. Jóindulatú műtéti állapotok, általában nappali sebészeti körülmények között operálják. Ezek kifejezetten az epefa (epekövesség) és az elülső hasfal (pl. Sérv műtét)

A „két hetes” várakozási szabály szerint rákgyanús betegeket toboroznak a St. Mary kórház általános sebészeti, felső GI-sebészeti, emlősebészeti és urológiai sebészeti csoportjaiba, járóbeteg-körülmények között.

A londoni St. Mary's Kórház általános, felső GI vagy emlősebészeti csoportja alatt elektív fekvőbeteg-műtétre járó betegeket a felvételi klinikán veszik fel.

Akut műtét (n=200)

Azok a betegek, akik az általános sebészeti ügyeleti csoport gondozásában jelentkeznek a baleseti és sürgősségi osztályon, ebbe a vizsgálati csoportba kerülnek. Ennek a vizsgálati csoportnak a következő alcsoportjai lesznek:

A. Akut hasi fájdalom, az előző etikai engedély szerint B. Sebészi eredetű akut szepszisben szenvedő betegek. C. Azok a betegek, akik súlyos traumát szenvednek el, sérülés súlyossági pontszáma >15, többszörös sérülések, műtétre szorulnak, vagy akiknek több mint 1 szervrendszere meghibásodott, vagy akiket az intenzív osztályra vesznek fel.

Kizárási kritériumok:

Minden 18 év alatti beteg Minden terhes beteg Kórházba érkezéskor kardiopulmonális újraélesztéssel Advanced Life Supportban részesülő betegek.

Előrehaladott daganatos betegek csak palliatív ellátásra alkalmasak a klinikai csoportnak történő bemutatáskor.

Azok a betegek, akik először jelentkeznek más ismert rosszindulatú daganatokkal, amelyek miatt kezelésben részesülnek, pl. Prosztatarák Más klinikai vizsgálatokba már bevont betegek.

Ez a tanulmány két külön szakaszra oszlik:

Preklinikai munka:

Az elektív és akut sebészeti felvételek biofluidelemzésére vonatkozó preklinikai munkát már végeztek állat- és emberkísérletekben a Magic Angle Spinning (MAS)-1H NMR (más néven szilárdtest-NMR, mivel a szövet nem igényel előkészítést), MS, és Mátrix Assisted Laser Desorption Ionization (MALDI)-MS. A korábbi vizsgálatokból származó, etikai ellenőrzés során nyert mintákat ezekkel a módszertani optimalizálási technikákkal elemezzük. Ez magában foglalja a vastag- és végbélrák minták (etikai hivatkozások: 07/H0712/112 és 06/Q0403/16), valamint az akut hasnyálmirigy-gyulladásban szenvedő betegektől és az akut hasüregből vett minták metabonómiai és metagenomikus profilozását (Etikai hivatkozás: 05/Q0403/203) .

Nem elengedhetetlen (pl. A rutinműtét során beleegyező betegektől kimetszett és elégetésre váró jóindulatú vagy patológiásan normális szöveteket a következő módszerrel gyűjtjük össze elemzés céljából: Számos elektrokauter készülékről gyűjtött füstcsóvák tömegspektrometriája. Ez lehetővé teszi az MS protokollok optimalizálását, és meghatározza a normál szövetek és a különböző szövettípusok kémiai paramétereit.

b. Az emlő-, vastagbél- és felső GI-rákból kimetszett rosszindulatú szöveteket az intelligens késsel ex vivo vizsgálják, hogy képesek-e kimutatni normális és rosszindulatú betegségeket. Ezt hisztopatológusok irányítása alatt végzik el, és nem zavarja a kóros stádiumbesorolást vagy a rákos megbetegedések kezelését.

A komplex biokémiai metaadatok nem tudományos munkatársak általi analitikus értelmezésére szolgáló transzlációs szoftver fejlesztése ezen adatok felhasználásával történik. Ez a munka a jelenlegi intenzív terápiás klinikai adatbázisokat fogja használni.

Klinikai munka:

A cél az, hogy a technológia könnyen alkalmazható legyen az NHS-en belül műtéten átesett betegeknél. Ezért a betegeket két sebészeti úton toborozzák:

Akut ellátás: Beteg toborzás

A betegek felvétele baleseti és sürgősségi állapotban történik. Csak ezen az úton felvett betegek vehetnek részt a vizsgálatban. A betegek tájékoztató lapot kapnak, és 30 percet hagynak a vizsgálat megfontolására. A beleegyezés privátban, megfelelően képzett és képzett személy által történik. Ha beleegyezik, a betegeket felkérik, hogy töltsenek ki egy kérdőívet az orvosi és műtéti anamnézis, valamint az eredményeket befolyásoló anyagcsere-információk megadása érdekében.

Egyes esetekben nem lehet beleegyezést kérni, mivel a betegek eszméletlenek lehetnek, vagy sérülés miatt nem tudnak beleegyezni. Ezekben az esetekben mintát vesznek, és amikor a beteg eszméletéhez és kapacitásához tér, hivatalos beleegyezését veszik. Ha ebben a szakaszban a beteg kijelenti, hogy nem kíván részt venni a vizsgálatban, a mintáit eltávolítják. A beteg halála esetén a mintákat bevonják a vizsgálatba. Ennek az az oka, hogy ezeknek a teszteknek a mortalitás előrejelzésére való képessége az elsődleges végpont.

Választható ellátás: Beteg toborzás

A betegeket lehetőség szerint járóbeteg-körülmények között toborozzák annak biztosítására, hogy elegendő idejük legyen a klinikai információk átvételére és beleegyezésükre. A műtétről szóló döntést követően mintát veszünk a betegektől a kórházi kezelésre történő felvételükkor.

Minta kollekció:

A mintákat mindkét esetben a beteg útja során meghatározott időpontokban veszik. A mintákat a szokásos klinikai vizsgálatokkal egy időben veszik, hogy a lehető legkisebbre csökkentsék a beteg kellemetlen érzését, és nem veszik túl a szokásos mintavételi időn túl, hogy elkerüljék a beteg szükségtelen vizsgálatát. A mintavételt a St. Mary's Kórház klinikai biokémiai csoportjával egyeztetjük, ahol csak lehetséges, hogy elkerüljük a szükségtelen és időigényes mintavételt.

Működés előtt:

Plazma- és vizeletgyűjtés:

1. Baleseti és vészhelyzetbe érkezésükkor. 24 óránként a befogadásuk időtartama alatt vagy a műtétig, elbocsátásig vagy sebészeti, radiológiai vagy invazív terápiás beavatkozásként meghatározott kezelésig.

Ha a beteg hosszan tartó rehabilitáció vagy nem sebészeti kezelés miatt marad kórházban, a hazabocsátásig hetente mintát vesznek.

Székletminta

Az első székletürítés az A+E-be érkezés után. Preoperatív és pre-bélelőkészítő minta műtét előtt. Ezt vagy a klinikán vagy az osztályon adják be.

Szövetminta gyűjtése

Preoperatív biopszia

Abban az esetben, ha a betegeket rutin endoszkópos vagy biopsziás vizsgálatra küldik, szövetmintákat vesznek a metabonómiai elemzéshez.

b. Intraoperatív.

A füstcsóvák MS általi elemzését minden esetben elvégzik. Ez nem zavarja a szokásos műveletet, és a műtő sebészt nem kérik fel, hogy a kísérlet adatai alapján döntsön. Rák reszekció esetén az onkológiai sebészet elveinek betartásával szövetmintát veszünk. Emlőműtét esetén az őrnyirokcsomókat is begyűjtik és NMR-vizsgálattal elemzik. A vastag- és végbélműtét során a mesorectumból származó szövetet a standard gyűjtőhelyekről veszik elemzésre, a felső GI rákreszekcióknál pedig hasonló elvek alapján történik a mintavétel. Akut vagy vészhelyzetekben a szövetek olyan területeiről is szöveteket vesznek, amelyekről úgy gondolják, hogy az ischaemia kockázata (pl. a bél anasztomózisos helyeket össze kell kötni).

A székletet és a vékonybél-folyadékot a műtétkor gyűjtik össze, így a műtétnek a bél mikrobiális ökoszisztémára gyakorolt ​​hatása is figyelembe vehető.

c. Postoperatív.

A vizelet- és plazmamintát a műtét után naponta veszik a jelenlegi klinikai gyakorlatnak megfelelően az első héten. Ahol lehetséges, a klinikai személyzet által vett mintákon kívül nem gyűjtenek további mintákat.

Székletmintákat is gyűjtenek. Az első bélmozgást a műtét után gyűjtjük, majd minden mozgást az első hét végéig, majd ezt követően hetente.

Az első mozgás sztómából/ileostomiából: Ha a sztómát felhelyezik, az első héten napi mintákat vesznek.

Ezt követően hetente mintákat gyűjtenek a kibocsátásig.

Abban az esetben, ha a beteg visszatér a színházba, a mintavételi folyamat újra kezdődik.

Minden klinikai adatot rögzítünk a beteg tartózkodási idejére. Ez vonatkozik a műtét előtti információkra és értékelésre, ahol lehetséges, fiziológiai adatokra, radiológiai leletekre, klinikai biokémiára, sebészeti és klinikai kimenetelre, valamint a tartózkodás időtartamára. Ez névtelen és kódolt lesz.

Az elbocsátást követően a betegeket 8 hét elteltével visszaviszik a klinikára a rutinelemzésnek megfelelően klinikai értékelésre. Ekkor vizelet-, vér- és székletmintákat vesznek. Az onkológiai betegeket öt évig követik nyomon a St. Mary's Hospital Paddington onkológiai protokollja szerint.