Az aflibercept hatása az emberi szaruhártya endothel sejtjére a neovaszkuláris korral összefüggő makuladegenerációban

A vaszkuláris endothel növekedési faktor (VEGF) inhibitorok intravitreális injekcióit egyre gyakrabban alkalmazzák a neovaszkuláris időskori makuladegeneráció (AMD) kezelésében a szemészeti gyakorlatban.1-4. A leggyakrabban használt VEGF-gátlók a bevacizumab (Avastin®, Genentech, San Francisco, California, USA), a ranibizumab (Lucentis®, Genentech, San Francisco, California, USA) és az aflibercept (Eylea®, Regeneron Pharmaceuticals Inc., Tarrytown, New York, USA), amelyek közül az afliberceptet és a ranibizumabot a Food and Drug Administration (FDA) jóváhagyta erre a javallatra.

Az Aflibercept a legújabban kifejlesztett VEGF-inhibitor egy rekombináns fúziós fehérjével, amely humán VEGF-receptor extracelluláris doménjei az 1-es és 2-es receptorokból (VEGFR1 és VEGFR2) vannak fuzionálva a humán IgG Fc-doménjéhez. Ez a fehérje tartalmazza az összes emberi aminosav szekvenciát, ami minimálisra csökkenti az immunogenitás lehetőségét a betegekben. Az aflibercept intravitrealis felezési ideje a ranibizumabhoz képest alacsonyabb kezelési terhelést jelenthet az injekciók, a monitorozás és az orvosi látogatások tekintetében. Számos in vitro vizsgálat kimutatta, hogy az aflibercept a retina rendellenességeinek kezelésére általában alkalmazott koncentrációban nem volt toxicitása a szemsejtekre. Bár a ranibizumabról és a bevacizumabról kimutatták, hogy nincs káros hatása a szaruhártya endotéliumára, az intravitrealis aflibercept humán szaruhártya endotéliumra gyakorolt ​​hatásáról eddig nem számoltak be. Figyelembe véve a szaruhártya endotélium funkcionális jelentőségét, különösen az idős populációban, a jelen vizsgálat célja az aflibercept humán szaruhártya endothelsejtekre gyakorolt ​​in vivo toxicitásának értékelése neovaszkuláris AMD-ben szenvedő betegeknél.

34 egymást követő neovaszkuláris AMD-ben szenvedő beteg 34 szemét (19 férfi, 15 nő; átlagéletkor 66,4±3,4 év; életkor 57-76 év) vették fel ebbe a megfigyeléses prospektív vizsgálatba. A vizsgálati protokollt az etikai bizottság jóváhagyta, és betartotta a Helsinki Nyilatkozat alapelveit. Minden résztvevő aláírta a tájékozott beleegyező nyilatkozatot a vizsgálattal kapcsolatos bármely eljárás előtt.

Minden résztvevő három egymást követő hónapon keresztül havonta egy intravitrealis aflibercept injekciót kapott, majd szükség szerint későbbi kezeléseket alkalmaztak. A követési időszak hat hónap volt.

Az intravitrealis aflibercept injekciót standard aszeptikus technikák alkalmazásával végeztük. Proparakain-hidroklorid szemcseppekkel (Alcaine, Alcon Laboratories Inc, Fort Worth, Texas, USA) végzett helyi érzéstelenítés után a szemhéjakat és a fornix inferior kötőhártyát 5%-os povidon-jóddal sterilizáltuk. Afliberceptet (2,0 mg, 0,05 ml) fecskendeztünk be a pars planán keresztül (4 mm-rel a limbus mögött) 27-es tűvel.

Noncontact tükörmikroszkópos vizsgálatot (Tomey EM-3000 Specular Microscope, Tomey Corp, Japán) végeztünk a szaruhártya központi részén az első intravitrealis aflibercept injekció előtt és 1, 3, 6 hónappal az injekció beadása után. Egy vak megfigyelő (S.D.) megkapta a szaruhártya endothel felvételeit. A tükörmikroszkóp automatikusan értékelte az endoteliális sejtsűrűséget (ECD), a sejtméret variációs koefficiensét (CoV), a polimegatizmus objektív mértékét, és a hexagonális sejtek százalékos arányát (Hex%), a pleomorfizmus indexét. A tükörmikroszkóppal optikai pachimetriás méréseket is végeztünk. Az aflibercept endotéliumra gyakorolt ​​akut toxicitását a szaruhártya ödéma és az elülső kamra reakciója, valamint az intraokuláris nyomás alapján értékelték az injekció beadását követő első napon. A nem kezelt szemek kontrollcsoportként szolgáltak.

Az aflibercept intravitrealis injekciója nem fejtett ki negatív hatást a humán szaruhártya endothel sejtjeiben. Az aflibercept endotéliumra gyakorolt ​​akut toxikus hatásának jeleit, mint a szaruhártya ödéma, az elülső kamra reakciója vagy a magas intraokuláris nyomás, nem rögzítették egyik szemen sem. az injekció beadását követő első napon.

Az Aflibercept egy nemrégiben jóváhagyott anti-VEGF, amely új terápiát kínál a neovaszkuláris AMD kezelésére. Ez az 1. és 2. VEGF-receptor fúziós fehérje. A ranibizumabhoz vagy a bevacizumabhoz képest nagyobb affinitással rendelkezik a VEGF-hez, ami az aflibercept hosszabb hatástartamát jelzi. Kísérleti és klinikai vizsgálatokban kimutatták, hogy az aflibercept hatékonysága az AMD kezelésében összehasonlítható a ranibizumab és a bevacizumab hatékonyságával. Az afliberceptet bevacizumabbal vagy ranibizumabbal összehasonlító vizsgálatokban az aflibercept kevesebb negatív hatást gyakorolt ​​a retina sejtvonalakra, mint például a sejtmorfológia megváltozása, apoptózis vagy a sejtek életképességének, sejtsűrűségének vagy proliferációjának tartós csökkenése. Az aflibercept nagyobb kötődési affinitást mutat a VEGF-hez, mint a ranibizumab és a bevacizumab, és ritkábban igényel intravitrealis injekciót, mint a ranibizumab és a bevacizumab. Az aflibercept üvegtesti felezési ideje rövidebb, mint a bevacizumab, de hosszabb, mint a ranibizumab. A sertésszemekből előállított retina pigment epitéliumban és retina tenyészetekben az aflibercept minimális koncentrációban hat órán keresztül teljesen gátolta a VEGF-et, és elhúzódó VEGF-gátlást mutatott a bevacizumabhoz és a ranibizumabhoz képest. Az aflibercept ezen előnye azonban aggodalomra ad okot a hosszú távú használat lehetséges mellékhatásai miatt.

A szaruhártya endotélium gátja a folyadék áramlásának a vizes humorból a stromába. Felelős a szaruhártya átlátszóságának megőrzéséért a stroma hidratációjának szabályozásával. Az endoteliális sejtsűrűség az életkorral csökken, és a szaruhártya endotéliumának betegség, trauma vagy gyógyszerek által okozott további károsodása funkcióvesztéshez vezethet, ami szaruhártya ödémát, csökkent szaruhártya tisztaságot és látásélességet okoz. Ezért a szaruhártya endotéliumának egészséges megőrzése létfontosságú, különösen az idős betegek számára. Az intravitreális injekció hatására a VEGF-inhibitorok jelentős koncentrációja érintkezik a humán szaruhártya endothel sejtjeivel. Korábbi vizsgálatok azt mutatták, hogy a VEGF és receptorai a szaruhártya endotéliumában és hámjában expresszálódnak, és a VEGF-inhibitorok kimutathatók az intravitrealis injekció utáni vizes folyadékban, mindkettő azt mutatja, hogy a VEGF-inhibitorok potenciálisan citotoxikusak lehetnek az emberi szaruhártya endothel sejtjeire. ranibizumab vagy bevacizumab intravitrealis injektálását a szaruhártya endotéliumán korábban tanulmányozták. Perez-Rico et al. beszámoltak arról, hogy a ranibizumab intravitrealis injekcióinak nincs szignifikáns hatása az endoteliális sejtsűrűségre, a CoV-ra és a Hex%-ra hét nappal vagy hat hónappal az injekció beadása után. A hat hónapon keresztül ismételt intravitrealis ranibizumab injekció szintén nem okozott jelentős változásokat a szaruhártya endotéliumában. Chiang et al. értékelte a humán szaruhártya vastagságának változását és a szaruhártya endothel sejtsűrűségét 2,5 mg bevacizumab intravitrealis injekciója után hat hónappal, és megállapította, hogy az intravitrealis bevacizumabnak nincs káros hatása a szaruhártya endotéliumára. In vitro vizsgálatok azt is kimutatták, hogy a bevacizumab nem toxikus az emberi eredetű szaruhártya sejtekre. Továbbá, bár a ranibizumab intrakamerális injekciója az endothelsejtek morfológiájának romlását okozta nyúl szaruhártya esetében, a bevacizumab intrakamerális injekciója nem befolyásolta az endothelsejtek életképességét vagy morfológiáját a nyúl vagy a humán szaruhártya esetében. A bevacizumab nem indukált apoptózist vagy nekrózist humán szaruhártya endothel és fibroblaszt sejtekben in vitro. Egy közelmúltbeli tanulmányban beszámoltak arról, hogy három egymást követő hónapon keresztül havonta adott intravitrealis bevacizumab vagy ranibizumab injekció nem befolyásolja a szaruhártya morfológiáját, és nincs káros hatása az endotéliumra diabéteszes makulaödémában szenvedő betegeknél. Jelen tanulmány eredményei is megegyeznek ezekkel a tanulmányokkal, amelyek azt mutatják, hogy sem a ranibizumab, sem a bevacizumab nincs negatív hatással a szaruhártya endothel sejtjeire. A kutatók azt találták, hogy a CCT, az ECD, a CoV és a Hex% nem változott hat hónappal az aflibercept intravitrealis injekciója után egyik szemébe sem. Ezenkívül a CCT, ECD, CoV és Hex% nem mutatott statisztikailag szignifikáns különbséget az intravitrealis aflibercepttel kezelt szem és az ellenoldali kezeletlen szem között az intravitrealis injekciót követő 6 hónapos követés előtt és alatt.

A vizsgálat fő korlátja a korlátozott mintaszám volt, ami kizárja, hogy végleges következtetésre jussunk az intravitrealis aflibercept humán szaruhártya endotéliumra gyakorolt ​​hatásáról. Mindazonáltal ez a kísérleti tanulmány első bizonyíték arra, hogy az intravitrealis aflibercept injekcióknak nincs negatív hatása az emberi szaruhártya endotéliumára.

Összefoglalva, az aflibercept klinikailag hatásos dózisának intravitrealis injekciója átlagosan négyszer a 6 hónapos periódus során nem vált ki semmilyen káros hatást a humán szaruhártya endotéliumára, spekkuláris mikroszkóppal értékelve. További prospektív, nagy léptékű, elhúzódó vizsgálatokra van szükség annak megerősítésére, hogy az intravitrealis aflibercept biztonságosan alkalmazható szaruhártya-toxicitás nélkül a neovaszkuláris AMD kezelésére.