신생혈관 연령 관련 황반변성에서 Aflibercept가 인간 각막내피세포에 미치는 영향

혈관 내피 성장 인자(VEGF) 억제제의 유리체강내 주사는 안과 실습에서 신생혈관 연령 관련 황반 변성(AMD)의 치료에 점점 더 많이 사용되고 있습니다.1-4 가장 일반적으로 사용되는 VEGF 억제제는 bevacizumab(Avastin®, Genentech, San Francisco, California, USA), ranibizumab(Lucentis®, Genentech, San Francisco, California, USA) 및 aflibercept(Eylea®, Regeneron Pharmaceuticals Inc., Tarrytown, New York)입니다. York, USA) 중 애플리버셉트와 라니비주맙이 이 적응증에 대해 식품의약국(FDA)의 승인을 받았습니다.

애플리버셉트는 인간 IgG의 Fc 도메인에 융합된 수용체 1 및 2(VEGFR1 및 VEGFR2)의 인간 VEGF 수용체 세포외 도메인으로 구성된 재조합 융합 단백질을 가진 가장 최근에 개발된 VEGF 억제제입니다. 이 단백질은 모든 인간 아미노산 서열을 포함하고 있어 환자의 면역원성 가능성을 최소화합니다. 라니비주맙에 비해 아플리베르셉트의 연장된 유리체내 반감기는 주사, 모니터링 및 의료 방문 측면에서 더 낮은 치료 부하로 해석될 수 있습니다. 여러 체외 연구에서 망막 장애 치료에 일반적으로 사용되는 농도의 애플리버셉트가 안구 세포에 독성을 나타내지 않는 것으로 나타났습니다. 그러나 ranibizumab과 bevacizumab 모두 각막 내피에 유해한 영향을 미치지 않는 것으로 나타났지만 유리체 강내 애플리버셉트가 인간 각막 내피에 미치는 영향은 지금까지 보고된 바 없다. 특히 고령 인구에서 각막 내피의 기능적 중요성을 고려하여 본 연구는 신생혈관 AMD 환자에서 인간 각막 내피 세포에 대한 애플리버셉트의 생체 내 독성을 평가하기 위해 설계되었습니다.

34명의 연속적인 신생혈관성 AMD 환자(남성 19명, 여성 15명; 평균 연령 66.4±3.4세; 연령 범위 57-76세)의 34안이 이 관찰 전향적 연구를 위해 모집되었습니다. 연구 프로토콜은 윤리위원회의 승인을 받았으며 헬싱키 선언의 신조를 준수했습니다. 모든 참가자는 연구 관련 절차 전에 정보에 입각한 동의서에 서명했습니다.

모든 참가자는 연속 3개월 동안 월 1회 유리체강내 애플리버셉트 주사를 맞았고 이후 필요에 따라 치료를 적용했습니다. 추적 기간은 6개월이었다.

유리체 강내 애플리버셉트 주입 절차는 표준 무균 기술을 사용하여 수행되었습니다. 프로파라카인 염산염 점안액(Alcaine, Alcon Laboratories Inc, Fort Worth, Texas, USA)으로 국소 마취한 후, 눈꺼풀과 하결막 원개를 5% 포비돈 요오드로 멸균했습니다. Aflibercept(2.0mg, 0.05ml)를 27게이지 바늘을 사용하여 평면부(윤부 뒤 4mm)를 통해 주사했습니다.

비접촉 경면현미경(Tomey EM-3000 Specular Microscope, Tomey Corp, Japan)은 최초 유리체강내 애플리버셉트 주입 전과 주입 후 1, 3, 6개월에 중앙 각막에 대해 시행하였다. 맹검 관찰자(S.D.)가 각막 내피 이미지를 획득했습니다. 경면현미경은 내피 세포 밀도(ECD), 다형성의 객관적 척도인 세포 크기의 변동 계수(CoV), 다형성 지표인 육각형 세포의 백분율(Hex%)을 자동으로 평가했습니다. Specular microscopy는 또한 optical pachymetry 측정을 제공했습니다. 애플리버셉트의 내피세포에 대한 급성 독성은 각막 부종과 전방 반응, 주사 후 1일째의 안압으로 평가하였다. 처리되지 않은 눈이 대조군으로 사용되었습니다.

애플리버셉트의 유리체강내 주입은 인간 각막 내피 세포에 부정적인 영향을 미치지 않았습니다. 각막 부종, 전방 반응 또는 높은 안압과 같은 내피에 대한 애플리버셉트의 급성 독성 효과의 징후는 모든 눈에서 기록되지 않았습니다. 주사 후 첫날.

애플리버셉트는 최근 승인된 항-VEGF 신생혈관성 AMD 치료를 위한 새로운 치료법을 제공합니다. VEGF 수용체 1과 2의 융합 ​​단백질로 라니비주맙이나 베바시주맙에 비해 VEGF에 대한 친화력이 높아 애플리버셉트의 작용시간이 더 길다. 실험 및 임상 시험에서 AMD 치료에 대한 aflibercept의 효능은 ranibizumab 및 bevacizumab의 효능과 비슷한 것으로 나타났습니다. 애플리버셉트를 베바시주맙 또는 라니비주맙과 비교한 연구에서, 애플리버셉트는 세포 형태의 변화, 세포 사멸 또는 세포 생존력, 세포 밀도 또는 증식의 영구적인 감소와 같은 망막 세포주에 대한 부정적인 영향이 더 적었습니다. Aflibercept는 ranibizumab 및 bevacizumab보다 VEGF에 대한 결합 친화력이 더 크고 ranibizumab 및 bevacizumab보다 덜 빈번한 유리체강내 주사를 필요로 합니다. 아플리베르셉트의 유리체 반감기는 베바시주맙보다는 짧지만 라니비주맙보다는 길다. 돼지 눈에서 채취한 망막 색소 상피와 망막 배양액에서 애플리버셉트는 최소 농도에서 6시간 동안 VEGF를 완전히 억제했으며, 베바시주맙과 라니비주맙에 비해 장기간의 VEGF 억제 효과를 보였다. 그러나 이러한 애플리버셉트의 장점은 장기간 사용 시 부작용에 대한 우려를 불러일으킨다.

각막 내피는 방수에서 기질로의 유체 흐름에 대한 장벽입니다. 간질 수화를 조절하여 각막 투명도를 유지하는 역할을 합니다. 내피 세포 밀도는 나이가 들면서 감소하고 질병, 외상 또는 약물에 의한 각막 내피의 추가 손상은 각막 부종, 각막 투명도 감소 및 시력 손실을 유발하는 기능 상실로 이어질 수 있습니다. 따라서 각막 내피를 건강하게 유지하는 것은 특히 노인 환자에게 매우 중요합니다. 유리체강내 주사는 상당한 농도의 VEGF 억제제가 인간 각막 내피 세포와 접촉하게 합니다. 이전 연구에서는 VEGF와 그 수용체가 각막 내피와 상피에서 발현되며, VEGF 억제제는 유리체강내 주사 후 방수에서 검출될 수 있으며, 두 가지 모두 VEGF 억제제가 인간 각막 내피 세포에 세포독성을 일으킬 가능성이 있음을 보여줍니다. 효과 각막 내피에 ranibizumab 또는 bevacizumab을 유리체강내 주사하는 방법은 이전에 연구된 바 있다. Perez-Ricoet al. ranibizumab의 유리체강내 주사는 주사 후 7일 또는 6개월에 내피 세포 밀도, CoV 및 Hex%에 유의한 영향을 미치지 않았다고 보고했습니다. 6개월에 걸친 ranibizumab의 반복적인 유리체내 주사 역시 각막 내피에 큰 변화를 일으키지 않았다. Chiang et al. 2.5mg 베바시주맙 유리체강내 주사 후 최대 6개월까지 인간 각막 두께 변화 및 각막 내피 세포 밀도를 평가한 결과 유리체강내 베바시주맙이 각막 내피에 유해한 영향을 미치지 않는다는 것을 발견했습니다. 시험관 내 연구에서도 베바시주맙이 인간 기원의 각막 세포에 독성이 없는 것으로 나타났습니다. 또한 ranibizumab의 전방내 주사는 토끼 각막에서 내피세포의 형태를 악화시켰지만 bevacizumab의 전방내 주사는 토끼 또는 사람의 각막에서 내피세포의 생존율이나 형태에 영향을 미치지 않았다. 베바시주맙은 시험관 내에서 인간 각막 내피 세포 및 섬유아세포 세포에서 세포사멸 또는 괴사를 유발하지 않았습니다. 최근 연구에서는 당뇨병성 황반부종 환자에서 매월 유리체내 베바시주맙 또는 라니비주맙 주사를 3개월 연속 투여해도 각막 형태에 영향을 주지 않고 내피에 유해한 영향을 미치지 않는 것으로 보고되었다. 본 연구의 결과 역시 ranibizumab이나 bevacizumab 모두 각막내피세포에 부정적인 영향을 미치지 않는다는 연구 결과와 일치한다. 연구자들은 양쪽 눈에 애플리버셉트를 유리체강내 주사한 후 6개월 동안 CCT, ECD, CoV 및 Hex%가 변하지 않았다는 것을 발견했습니다. 또한, CCT, ECD, CoV 및 Hex%는 유리체강내 애플리버셉트를 처리한 눈과 유리체강내 주사 후 6개월 추적 관찰 전과 동안 치료하지 않은 반대쪽 눈 사이에 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았습니다.

연구의 주요 한계는 제한된 표본 크기로 인간 각막 내피에 대한 유리체 강내 애플리버셉트의 효과에 대한 결정적인 결론에 도달하지 못했습니다. 그럼에도 불구하고, 이 파일럿 연구는 유리체 강내 애플리버셉트 주사가 인간 각막 내피에 부정적인 영향을 미치지 않는다는 첫 번째 증거를 제공합니다.

결론적으로, 6개월 동안 평균 4회 임상적 유효 용량의 애플리버셉트 유리체강내 주입은 경면현미경으로 평가된 인간 각막 내피에 유해한 영향을 유발하지 않았다. 신생혈관성 AMD를 치료하기 위해 유리체강내 애플리버셉트가 각막 독성 없이 안전하게 사용될 수 있음을 확인하기 위해서는 전향적, 대규모, 장기 연구가 필요합니다.