Il ruolo del recettore del TSH, PPAR-r, IGF-1R, IGF e citochine nelle diverse fasi dell'oftalmopatia di Graves

L'esatto meccanismo della patogenesi dell'oftalmopatia di Graves (GO) è ancora sconosciuto. Dal punto di vista istopatologico, l'infiammazione dei muscoli extraoculari dovuta a infiltrazione linfoide, edema e fibrosi interstiziale e l'aumento della deposizione di glicosaminoglicani e l'infiammazione del grasso orbitale sono due cambiamenti importanti. Ci sono varie manifestazioni tra cui infiammazione dei tessuti annessi oculari, proptosi, retrazione palpebrale, limitazione del movimento extraoculare e neuropatia ottica compressiva. Nell'ultimo anno, abbiamo studiato le caratteristiche morfologiche del muscolo Müller in pazienti con retrazione della palpebra tiroidea utilizzando la colorazione speciale e l'immunoistochimica in sezioni fissate in formalina e incluse in paraffina (FFPE). Nelle nostre scoperte, le cellule muscolari lisce, nel gruppo malato, sono state sostituite da tessuti adiposi e fibrosi variabili. Due caratteristiche distinte nel gruppo della malattia sembrano essere degne di nota per ulteriori indagini.

Negli ultimi anni, è stato verificato che il TSHR, un presunto autoantigene, si esprime nel tessuto connettivo orbitale e nel muscolo extraoculare. Inoltre, è stato ulteriormente dimostrato che si esprimono sulla superficie di fibroblasti orbitali in coltura e tessuto adiposo orbitale, in pazienti con OB in diversi laboratori. Da studi funzionali e da un aumento dell'adipogenesi nei fibroblasti in coltura con espressione della proteina TSHR, è stato convalidato il ruolo non solo delle cellule bersaglio ma anche delle cellule effettrici nei fibroblasti orbitali7. Abbiamo utilizzato l'immunoistochimica per verificare l'esistenza di TSHR sui fibroblasti all'interno del muscolo Müller e la colorazione positiva si manifesta solo nel 18% dei pazienti. Potrebbe essere dovuto a una minore estensione dell'espressione nella fase finale. Siamo molto curiosi di sapere se ci sono differenze nell'espressione del TSHR tra campioni orbitali di pazienti con stadio acuto e quelli con stadio stabile. La RT-PCR quantitativa può aiutare a differenziare se deve essere rilevata una minore estensione dell'espressione allo stadio finale o una bassa quantità di proteine.

Negli ultimi anni, i diversi fenotipi dei fibroblasti orbitali, per quanto riguarda l'espressione della proteina Thy-1 o meno, erano stati riportati da diversi studi, i ricercatori ritenevano che l'eterogeneità nei fibroblasti orbitali potesse determinare la presentazione clinica dell'oftalmopatia di Graves. Siamo anche curiosi di sapere se l'eterogeneità fenotipica dei fibroblasti nei tessuti annessi oculari e orbitali è correlata a caratteristiche morfologiche distinte di adipogenesi e fibrosi. Inoltre, le citochine pro-infiammatorie sistemiche o locali possono contribuire ad attivare e disattivare l'espressione di diversi ruoli dei fibroblasti.

Inoltre, nei pazienti con sclerosi sistemica è stata osservata una maggiore espressione di CD40 nei fibroblasti cutanei. L'espressione di IGF-I e IGF-IR sembrava essere sovraregolata nei processi di diverse malattie fibrotiche. È stato verificato che un fattore di trascrizione nucleare, PPAR-γ, ha una stretta relazione con l'adipogenesi. Nel nostro studio precedente, le cellule muscolari lisce, nel muscolo di Mullers malato, sono state sostituite da tessuto adiposo e fibroso variabile. L'aumento del tessuto adiposo e della fibrosi ex vivo del muscolo di Müller può derivare da un'azione eccessiva di alcuni marcatori biochimici nei fibroblasti che si infiltrano intorno alle cellule muscolari. Ipotizziamo che alcuni processi immunologici coinvolgano i tessuti annessi oculari e orbitali, che si traducono in varie manifestazioni oftalmologiche.

Lo scopo di questo studio è indagare il diverso stadio (stadio acuto o stabile) dei tessuti annessi oculari e orbitali (inclusi grasso orbitale, muscoli extraoculari, muscoli orbicolari e grasso palpebrale) per identificare e convalidare la patogenesi dell'oftalmopatia di Graves da sezioni congelate degli annessi oculari e dei tessuti orbitari con immunoistochimica (IHA) (Thy-1 e PPARγ), espressione di mRNA del recettore del TSH, PPAR-γ, IGF-1R e IGF-1 e diverse citochine (IL-1β, IL-4, IL-6, IL-8) utilizzando RT-PCR quantitativa e citometria a flusso nella fase acuta e stabile nella GO.