Effetti antibatterici a breve e lungo termine di un singolo risciacquo con diversi collutori: uno studio clinico randomizzato

Campione e procedura Nel primo studio abbiamo raccolto 1 ml di saliva intera non stimolata sputando i partecipanti in una provetta Eppendorf sterile al basale e 5 minuti dopo il risciacquo con 5 ml di 4 diversi tipi di collutori disponibili in commercio da flaconi identici con codice opaco. Dalla nostra ambulanza clinica selezionati in modo casuale 145 pazienti valutati per l'idoneità. I criteri di inclusione erano: DMF≥10, minimo 5 carie attive e PSR≥2. I criteri di esclusione erano: fumo, una storia di uso di antibiotici o probiotici 3 mesi prima del campionamento o allergia nota a uno qualsiasi degli ingredienti dei collutori testati. Sono stati esclusi 25 pazienti (19 di questi in base ai criteri di cui sopra e 6 si sono rifiutati di partecipare). Centoventi pazienti volontari (42±8 anni) con scarsa igiene orale sono stati selezionati per partecipare allo studio. A tutti i soggetti idonei sono state fornite informazioni orali e scritte sui prodotti e sullo scopo dello studio e gli è stato chiesto di firmare un modulo di consenso informato. I volontari sono stati assegnati in modo casuale ai test e ai gruppi di controllo positivo (Corsodyl®). La randomizzazione è stata eseguita utilizzando numeri casuali generati dal computer. La randomizzazione e l'assegnazione dei brillantanti sono state effettuate da una persona non direttamente coinvolta nel progetto di ricerca. I volontari si sono sciacquati per 1 minuto, con una diluizione 20 volte di ClO2 iperpuro allo 0,03% (Solumium Oral®, concentrazione finale: 0,0015%), Corsodyl® (0,2% CHX), Listerine Total Care® (oli essenziali, fluoruro di sodio , cloruro di zinco) o BioGate Si*CLEAN® (microargento) (30 individui in ogni gruppo di collutorio).

Nel secondo studio, 26 volontari studenti di medicina scelti a caso (20±3 anni) sono stati lavati con 5 mL di ClO2 iperpuro diluito 10 volte (concentrazione finale: 0,003%) o Corsodyl® per 1 minuto e la loro saliva intera non stimolata è stata raccolta come sopra al basale e dopo 5 e 90 minuti (13 persone in ciascun gruppo di collutorio). Le restrizioni sull'igiene orale dei volontari erano: DMF≥5, minimo 1 carie attiva, PSR≥1 e le categorie di esclusione erano le stesse del primo studio. Anche la gestione dei soggetti idonei, la loro randomizzazione e l'allocazione dei brillantanti negli stessi flaconi con codice opaco erano esattamente identiche al primo studio. Undici volontari sono stati esclusi da questo studio (9 di questi in base ai criteri di cui sopra e 2 si sono rifiutati di partecipare).

I campioni di saliva sono stati conservati in tubi Eppendorf utilizzati per la raccolta a temperatura ambiente con aria condizionata e processati entro due ore. Una serie di diluizioni è stata preparata dai campioni in soluzione salina fisiologica. Per determinare il nostro esito primario pre-specificato, sono stati inoculati rispettivamente la conta batterica totale e il numero di S. mutans (CFU/ml) nel sangue e gli agar Mitis-Salivarius (Difco, Becton-Dickinson, Ungheria). La coltivazione è stata effettuata a 37 °C, 5% CO2 e ha richiesto 2 giorni. Il ricercatore per il conteggio delle CFU non sapeva quali piastre fossero state esposte a ciascun trattamento.