Screening per la proteina X del virus dell'epatite X (HBX) nel carcinoma associato alla colite (CAC)

Il microbiota umano è una ricca comunità di batteri, virus, funghi, protisti e archaea, ed è parte integrante del corpo che influenza la sua omeostasi generale. Colonizza tutte le superfici della mucosa, con il tratto gastrointestinale (GI) che è il più densamente popolato. Sebbene i colonizzatori intestinali più studiati siano batteri, l'evidenza emergente evidenzia la disbiosi del viroma intestinale, realizzata sia ai batteriofagi che al bersaglio eucariotico, come responsabile dell'influenza della composizione complessiva del microbiota intestinale e dei batteri o con l'ospite, come per i virus bersaglio eucariotico.

I virus eucariotici che colonizzano le superfici della mucosa possono infettare le cellule dell'ospite senza sintomi e, anche se asintomatico, un ospite che porta virus può contenere una risposta immunitaria persistente con un "continuum" di mediatori infiammatori che potrebbero aumentare la suscettibilità all'ospite alla malattia. Parallelamente, i virus eucariotici sono stati ben descritti come induttori di eventi mutazionali multipli, tra cui la mutagenesi inserzionale, quindi le infezioni virali sono responsabili per circa il 20% dell'onere del cancro globale. Ad esempio, uno dei tumori più frequenti correlati alle infezioni è l'epatocarcinoma, causato principalmente dal virus dell'epatite B (HBV).

I virus del bersaglio eucariotico hanno recentemente suscitato un notevole interesse per le malattie gastrointestinali come la colite ulcerosa (UC), una condizione infiammatoria cronica del tratto del colon e il carcinoma del colon-retto (CRC), la terza neoplasia più diagnosticata e la quarta causa principale della morte del cancro in il mondo. UC e cancro condividono diversi fattori che influenzano la loro etiogenesi, inclusa la disbiosi intestinale. Da notare che UC è un fattore di rischio nello sviluppo del carcinoma del colon-retto associato alla colite (CAC). In effetti, i pazienti con UC hanno il rischio di sviluppare il cancro di circa 2-3 volte in più rispetto alla popolazione generale con prognosi sfavorevole. La displasia nel CAC si sviluppa con diversi meccanismi rispetto al cancro del colon -retto sporadico. I pazienti affetti da UC e CAC condividono un microambiente pro-infiammatorio all'interno dei loro tessuti della mucosa. Tuttavia, manca ancora il legame meccanicistico tra queste due malattie.

Recentemente abbiamo riferito che un fattore derivato dal genere ortoepadnavirus, vale a dire la proteina X del virus dell'epatite B (HBV) (HBX), era la componente più arricchita del viroma nei pazienti con UC diagnosticata precoce, rispetto ai soggetti sani e ai pazienti con malattia di Crohn . Questo fattore è stato ospitato da una specifica coorte di pazienti con UC (circa il 45% del totale analizzato), probabilmente a causa di un evento di spillover zoonotico.

In vivo, HBX è stato mostrato come in grado di indurre la colite di per sé indipendentemente dalle altre commensali, interferendo con l'apparato trascrittomico epiteliale che provoca la perdita di funzioni di barriera appropriate, portando a sua volta alle sequele proinfiammatorie e immuni Tutti questi si verificano indipendentemente dal microbiota. In effetti, i topi trattati con HBX hanno mostrato una riduzione di neutrofili, cellule T dendritiche e CD8+, indicando il fallimento della fase di risoluzione (neutrofili ridotti) e hanno ostacolato la difesa contro i patogeni (cellule T dendritiche e CD8+) patogenesi. Inoltre, abbiamo dimostrato che HBX modella lo stato trascrittomico dell'epitelio intestinale legando le regioni regolatori del DNA e attivando la trascrizione dei geni coinvolti nella proliferazione e staminalità delle cellule epiteliali aumentate. In particolare, la sovraespressione di HBX nelle biopsie della mucosa del colon umano ha indotto l'attivazione di processi biologici correlati al percorso Wnt, che è coinvolto nella carcinogenesi del colon -retto. Questo risultato è coerente con la descrizione HBX nel contesto dell'infezione da HBV. In effetti, è noto che questa proteina virale impedisce agli epatociti infetti da HBV di riparare in modo efficiente il DNA danneggiato, portando così ad un accumulo di mutazioni del DNA e, infine, a epatocarcinogenesi.

Sulla base di queste prove e dei risultati preliminari riteniamo che le alterazioni epiteliali mediate da HBX influenzino l'omeostasi della mucosa, interrompendo e guidando l'infiammazione cronica intestinale, che può progredire verso lesioni displastiche o adenocarcinoma.

Per questo motivo, abbiamo deciso di condurre uno studio retrospettivo multicentrico per studiare la presenza di HBX nei campioni derivati ​​dal paziente da persone con diagnosi di CAC. In dettaglio, lo studio impiegherà le tecniche di sequenziamento della catena di polimerasi di trascrizione inversa (RT-PCR) e Sanger Sequencing per analizzare campioni di tessuto a paraffina (FFPE) fissati con formalina per rilevare HBX. Verrà incluso un gruppo di controllo, comprendente campioni CRC di pazienti senza colite e campioni di pazienti con diverticolite, colite indeterminata (IC) e malattia di Crohn (CD) senza cancro.

La valutazione di HBX nei campioni di CAC potrebbe rivoluzionare gli approcci clinici consentendo la diagnosi precedente e la valutazione del rischio di perfezionamento per i pazienti con UC. Questa scoperta può anche portare allo sviluppo di strategie terapeutiche personalizzate che colpiscono specificamente i percorsi correlati all'HBX, facendo così avanzare la nostra comprensione dei meccanismi delle malattie sottostanti.