ヒトにおけるオゾン誘発性気道炎症に対する遺伝的感受性 (GARBOZ)

喀痰評価日: 医学的スクリーニング後に必要な健康状態を満たす被験者には、すべての実験手順と参加に伴う可能性のあるリスクの口頭および書面による説明が提供されます。 すべての被験者は、研究に参加するために書面によるインフォームドコンセントを提供する必要があります。 適切な誘発喀痰サンプルを生成する被験者の能力も決定されます。 したがって、被験者は、高張食塩水（3、4、および5％）の吸入後に喀痰を生成するように求められます。 被験者は、サンプルあたり少なくとも 50 mg の喀痰 (選択されたプラグ) を生成できる必要があります。 各喀痰サンプルには、少なくとも 100,000 細胞の総細胞数、40% 未満の扁平上皮細胞を含む微分細胞数、および少なくとも 50% の細胞生存率が含まれている必要があります。 有効な喀痰生産者である被験者は、トレーニング セッションのスケジュールが設定されます。 十分な肺機能検査を行うことができない場合、被験者は研究から除外されることがあります。

トレーニング セッション: トレーニング セッションは、露出の 2 日前までに行われます。

• スパイロメトリーやプレチスモグラフィー (ボディ ボックス測定) などの肺機能検査。
• オゾン暴露室の紹介。
• 研究に必要な運動レベルに到達するための分換気量測定を含む、トレッドミルの使用方法に関する説明。
• 一酸化窒素測定 - 呼気に含まれる一酸化窒素 (NO) の量を測定します。 呼気中の NO 濃度の増加は、上気道感染症の際の急性炎症のある健常者や、アレルギー性鼻炎患者の症状に関連して見られることがあります。 したがって、呼気中の NO 濃度の測定は、気道炎症の間接的な評価として有用である可能性があります。 NOの肺産生は、呼気ガスのサンプルの収集によって測定されます。 NO の鼻の生成は、NO アナライザーのサンプリング ラインを一方の鼻孔に接続し、もう一方の鼻孔を周囲空気に開放することによって直接測定されます。 鼻の測定中、被験者は、口蓋を閉じて鼻サンプルの汚染を防ぐために、抵抗のある厚紙の使い捨てチューブを通して息を吐きます。 手順全体は 15 分以内に完了する必要があります。

暴露および試験プロトコル: 実験室に到着すると、ベースライン心拍数、血圧、呼吸器症状 (呼吸音) の評価、および一般的な健康状態など、被験者の臨床的健康状態が医療関係者によって確認されます。 すべての女性被験者は、月経周期の履歴を提供する必要があり、妊娠検査には尿サンプルが必要です。 各妊娠検査は 7 日間有効と見なされます。 被験者が以前に確立された制限を超えた場合、テストは延期されます。

0.4 ppm のオゾン暴露は、オゾン暴露チャンバーで実施されます。 各被験者は 2 時間オゾンにさらされます。 暴露中、被験者はトレッドミルで 15 分間の中程度の運動 (分換気量または VE = 30 ～ 40 L/分) を 4 回行い、それぞれ 15 分間の座位休憩を挟みます。 曝露の前後に、気管支収縮の徴候がないか、肺機能と呼吸音が評価されます。 静脈穿刺 (上記のとおり) は、暴露前に行われます。 心肺機能の測定値は、各運動期間中に得られます。

オゾン曝露から約 4 ～ 6 時間後に、静脈穿刺が行われます。 被験者は、噴霧吸入高張生理食塩水（3、4、および5％）を使用して、上記の喀痰誘発手順を実行します。 実験室を出る前に、肺機能 (スパイロメトリー) が曝露前のベースライン値の 5% 以内に戻るまで、被験者は医学的監督下に置かれます。 オゾン暴露の約 24 時間後、被験者は静脈血サンプルに加えて、肺機能検査と喀痰誘発のために検査室に戻ります。

各時点（曝露前および曝露後、および曝露後24時間）で、血液を前腕の静脈から臨床試験管に抜き取る。 これらの採血の 1 つの間に、ジェノタイピングのために追加の 5ml が採血されます。 血漿は 4 ml から分離され、70 ℃ で凍結され、サイトカインなどの目的のメディエーターやオゾンの他の全身効果を今後分析するために使用されます。 残りの血液は、炎症性および免疫活性化のマーカー (CD11b、CD14、CD64、CD16、HLA-DR、CD45、CD3、CD80、CD86) および機能 (食作用および酸化バースト) の全血アッセイによって評価されます。サイトメトリー。 RNAは、マイクロアレイ分析のために喀痰炎症細胞から抽出されます。

参加の過程で、すべての被験者は棄権する必要があります。ビタミンCおよびE、アスピリンまたはその他の抗炎症薬の摂取、タバコの煙またはその他の刺激物への曝露。 さらに、被験者は、喀痰誘発の2時間前から何も口にしないように求められます。 彼らは、研修日と曝露後の日に 2 時間、研究ラボ NPO に到着するように求められ、2 時間の NPO の要件を考慮して、曝露日に昼食をとります。