肝硬変患者におけるCD133+幹細胞の肝臓内再注入 (Cirrhosis133)

タイトル: 末期肝疾患患者における高度に精製された CD133+ 幹細胞の肝内再注入に関する第 I 相研究。

主任研究者: ロベルト M. レモリ医学博士 共同研究者: ピエトロ アンドレオーネ医学博士、フランチェスカ ボニファジ医学博士。ルシア・カターニ、理学士。アントニア・デリコ、医学博士。ミケランジェロ・フィオレンティーノ医学博士。ヴァレリア・ジュディス医学博士。アナギウリア・グラメンジ医学博士。エリザベッタ・ロッギ、理学士。ステファニア・ロレンツィーニ医学博士。フランチェスコ・ロシーノ医学博士。マリア・ローザ・モッタ、理学士。シモネッタ・リッツィ、理学士。クリスティーナ・ロッシ医師。

研究センター: Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna、Policlinico S.Orsola-Malpighi、ボローニャ - イタリア、Unià Operativa di Ematologia 協力:

医学医学部門 解剖学手術部門と病理学部門 免疫腫瘍学および放射線医学部門 手術部門

臨床段階: フェーズ I

目的: 主な:

末期肝疾患患者に対する、増加する数の自家高度精製 CD133+ 幹細胞 (SC) の肝内再注入の安全性を評価する。 CD133+ SC は事前に収集され、顆粒球コロニー刺激因子 (G-CSF) および白血球除去療法による動員後に凍結保存されます。 安全性は、SCの再注入後の有害事象の発生率（WHOに従って等級付け）および臨床的に有意な異常な検査値として評価されます。

二次:

事前にG-CSFを用いて動員された、末期肝疾患患者の末梢血（PB）から白血球除去法で収集された自己CD133+細胞の免疫磁気選択の実現可能性を評価する。

高度に精製された CD133+ 細胞の肝内再注入が患者の残存肝機能に及ぼす影響を評価する。 特に、以下の値が監視されます: タンパク質の合成 (アルブミン)、凝固因子の合成 (プロトロンビン時間、INR、フィブリノーゲン、アンチトロンビン III、トロンボプラスチン時間)、ビリルビン血症、増殖活性、生合成能力 (コレステロール、シュードコリンエステラーゼ) 。

G-CSFの投与中および末期肝疾患患者への高度に精製されたCD133+ SCの肝臓内再注入後の、選択されたサイトカインの産生に対する治療の効果を評価する。

研究デザイン:

用量決定段階では 18 ～ 24 か月以内に 12 人の患者が登録されます。 この研究は次のように計画されました。まず、G-CSF (Aventis Pharma の Lenograstim または Amgen の Filgrastim) を 7.5μg/Kg/1 日 2 回投与します。 １日目から末梢血幹細胞（ＰＢＳＣ）収集が完了するまで皮下（ｓ．ｃ．）投与される。 骨髄 (BM) 由来 PBSC の採取は、CD133+ 細胞の濃度が > 8/μL の場合に限り + 4 日目に開始され、標的細胞用量の採取まで継続されます: 0.5 x 106 CD133+ 細胞/Kg最初の2つの患者コホート;コホート 3 では 1 x 106 CD133+ 細胞/Kg、コホート 4 では 2 x 106 CD133+ 細胞/Kg (定義については以下を参照)。 動員された標準容量の白血球除去療法から得られた PB 単核細胞は、Macs コロイド状超常磁性 CD133 マイクロビーズ (Miltenyi Biotec、ベルギッシュ グラードバッハ、ドイツ) とともにインキュベートされ、CliniMacs デバイスは適正製造基準 (GMP) 条件下で CD133+ 細胞のポジティブセレクションに使用されます (添付ファイルを参照してください)。 凍結保存および液体窒素中での保管は、標準手順に従って実行されます（添付ファイルを参照）。

ＳＣ動員および収集の少なくとも４週間後、急速解凍後に得られた高度に精製された自己ＣＤ１３３＋細胞の単一細胞懸濁液４０ｍＬまでを、経大腿動脈造影または経腕動脈造影によって肝動脈を通して注入する。 血栓の形成を避けるために、注入時間は 15ml/分未満になります。 手順全体は麻酔管理下で行われます。 肝臓内投与経路は、肝硬変患者における従来の静脈内再注入後の潜在的な大量の脾臓捕捉を回避するために必要であると考えられている。 処置から 24 時間以内に、腸間膜領域の血栓性イベントを除外するために、腹腔幹のドップラー超音波検査が実行されます。

修正されたフィボナッチの増分ルールに従って、高度に精製された G-CSF 動員 CD133+ 細胞は、5x104/Kg 患者の体重から開始して 3 人の患者ごとに増量されます。 最大注入細胞量は 1x106/kg になります (下記を参照)。 ５μｇ／Ｋｇ／日のレノグラスチムまたはフィルグラスチムを、ＳＣの再注入後３日間（０日目から＋２日目）皮下投与して、増殖させ、ｉｎ ｖｉｖｏで再注入した細胞の選択的増殖利点を誘導する。

患者数と期間: 12 人の患者が用量決定段階で 18 ～ 24 か月以内に登録されます。

診断と選択基準: 署名されたインフォームドコンセント。 年齢は18歳以上。 Karnofsky スコア > 70% または WHO <1。 適切な腎臓（血清クレアチニン < 2 mg/dl）および肺（Sat O2 > 96%）機能。 進行した末期肝疾患の診断は、メイヨー末期肝疾患モデル (MELD) スコア 17 ～ 25 によって定義されます。

次の肝疾患の病因を持つ患者が研究に登録されます：慢性ウイルス性肝炎、慢性ウイルス性肝炎 C、慢性ウイルス性肝炎、アルコール性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、ウィルソン病、遺伝性ヘモクロマトーシス、または鉄過剰症肝硬変、非アルコール性脂肪性肝炎による肝硬変。 アルコール性肝硬変患者は、研究に参加するには積極的なアルコール摂取を中止する必要があります。

同所性肝移植（OLT）の適格性は、臨床研究に参加するための禁忌ではありません。 OLT 移植の待機リストにある患者は取り下げられず、適切なドナーが利用可能になり次第移植されます。 実験手順後の改善の場合、それらの MELD スコアは以前の SC 注入を記録したままになります。

腹水、末梢浮腫、再発性胃腸管出血、再発性脳症などの肝硬変関連症状の存在は、研究に登録する主要な禁忌を表しません。 臨床的に安定している場合、患者は適格であるとみなされる場合があります。

除外基準: HIV 陽性。 妊娠中または授乳中の女性。 現在制御不能な感染症。 併発的な臓器損傷。 肝がんの診断。 完全な門脈血栓症。 動脈硬化造影が禁忌となる凝固機能の重度の障害（PT< 30%、INR> 2.5、血小板< 40x109/L）。 グレード IV の脾腫。

ソブラ肝静脈血栓症および原因不明の肝硬変を伴うバッド・キアリ症候群は研究には含まれない。