腎移植における免疫調節およびウイルス制御に対するリツキシマブ（RTx）誘導および生体提供の影響

目的。 血液型不適合 (ABOi) LD 腎移植は、ドイツで認められた治療法です。 この設定では、倫理的な考慮事項により、連続プロトコル生検を含む、Rtx導入療法の短期および長期の免疫学的およびウイルス学的効果の詳細な研究が可能になります。 提案されたプロジェクトでは、末梢血、腸骨リンパ節、プロトコル生検の分析を行います。 プロトコルの生検は、ギーセン大学とフライブルク大学で移植後 3 か月と 12 か月に定期的に取得されます。 この前向きのオープンパイロット研究では、移植の結果とポリオーマウイルスの制御、EBVおよびCMV複製の免疫学的パラメーターが、RTx治療されたABOi LD腎移植レシピエント（n = 25-30、グループ1）と血液型適合LD腎との間で比較されますRtx誘導なしの移植レシピエント（n = 25-30、グループ2）が、それ以外は同等の免疫抑制治療（MPSおよびTacr、移植後2週間以内にTacr-MR（改変放出）に切り替える; 5年間のフォローアップ）。 Tacr (Tacr-ME への切り替え) および MPS (n=25-30、グループ 3) で治療された DD 腎移植レシピエントで同じ分析が行われます。 この研究デザインにより、免疫調節とウイルス制御に対する生体寄付の影響を分析できます (グループ 2 対 3)。

バックグラウンド。 ヒト白血球抗原 (HLA) に対するドナー特異的抗体の de-novo 形成と有意に関連することが示された、慢性同種移植片機能障害において体液性メカニズムが主要な役割を果たすという証拠が増えています。 しかし、B細胞は移植片に対する体液性応答だけでなく、効果的な抗原提示細胞としての役割により、T細胞を介した抗ドナー応答において重要な役割を果たしている可能性があります。 これは、Rtx が関節リウマチや多発性硬化症などの主に T 細胞媒介性疾患に有効であるという事実によってさらに示唆されています。

仮説/特定の目的。 Rtx の誘導は、腎移植後の短期的および長期的な免疫調節を変化させ、長期的な転帰を改善する可能性があるという仮説を立てています。 Rtx 誘導の移植片保護効果は、B 細胞の枯渇と、その結果生じる体液性応答および T 細胞応答への影響、および B 細胞再増殖後の応答の変化によってもたらされる可能性があります。 ポリオーマウイルスおよびCMV制御に対するRtxの考えられる負の影響、ならびにEBV複製に対する保護効果、デノボモノクローナル免疫グロブリン血症およびリンパ腫増殖因子（インターロイキン6および10（IL-6、IL-10））の調節が分析されます。 さらに、末梢血の B 細胞サブセット分析と、移植片流入腸骨リンパ節の B 細胞枯渇に対する Rtx のおそらく関連する影響により、最適化された Rtx 投与量を確立し、それによって現在観察されている 15% のドロップアウトなしで成功した ABOi 腎移植を可能にする可能性があります。 .

暫定結果。 私たちは、規制抗 Fab 自己抗体、sCD30、CD4 (分化クラスター 4) ヘルパー活性、CD4 細胞 IL-4 (インターロイキン 4) および IL-10 (インターロイキン 10) などの免疫パラメーターの予測力を示す臨床研究を実施しました。移植結果に対する反応。 これらのパラメーターに対する Rtx 導入療法と生体寄付の長期的な影響を分析します。

以前に、ポリオーマ ウイルス腎症のリスクがある患者は、尿中のポリオーマ ウイルス複製の連続逆転写酵素ポリメラーゼ チェーン (rt-PCR) 評価により、移植後早期に認識される可能性があることを発見しました。 尿および血漿中のポリオーマウイルス複製の逐次rt-PCR試験を使用して、ポリオーマウイルス制御に対するRtx誘導の影響を分析します。

提案された方法。 免疫パラメーターは、主に移植前、移植後 3 か月、1、2、および 5 年で分析されます。 フローサイトメトリー (制御性 T 細胞、B 細胞サブセット、サイトカイン受容体の発現、共刺激および接着分子を含む)、マイトジェン刺激同種共培養、プロテイン A プラークアッセイ (B 細胞応答、CD4 ヘルパー活性)、CD4+ の細胞内サイトカイン分析およびCD8 + (分化クラスター 8) T 細胞、B 細胞および単球、ウイルス学的研究 (BKV、JCV、CMV、EBV) のための rt-PCR、および腸骨リンパ節の免疫蛍光染色 (移植時に取得) およびプロトコル生検が使用されます。 . ドナー特異的抗体は、リンパ球毒性、HLA クラス I および II ELISA、および Luminex アッセイを使用して検出されます。 ドナー特異性は、ドナー細胞とのT細胞およびB細胞のクロスマッチによって確認されます。 調節ＩｇＧ（免疫グロブリンＧ）およびＩｇＡ（免疫グロブリンＡ）抗Ｆａｂ自己抗体、ネオプテリンおよびｓＣＤ３０をＥＬＩＳＡによって評価する。

予想された結果。 Rtx 誘導は、de-novo 移植後の抗ドナー HLA 抗体形成など、移植結果の免疫学的パラメーターに影響を与えると予想されます。 このパイロット研究は、患者に合わせた免疫抑制療法のおかげで、免疫学的リスクパラメーターを持つレシピエントの長期的な腎臓移植の転帰を改善できる可能性があります。 ABOi 腎移植では、この研究は、意図した用量反応分析 (血液中の B 細胞サブセット分析およびグラフト ドレイン リンパ節) に基づいて最適化された Rtx 投与量を可能にすることにより、現在の 15% の脱落率を防ぐ可能性があります。 さらに、この研究は、CMV およびポリオーマ ウイルス複製に関する Rtx 投与のリスク推定を可能にし、EBV 複製および移植後リンパ増殖性疾患に対する保護に関する手がかりを提供する可能性があります。 後者の点は、EBV 陽性移植片の EBV 陰性レシピエントなど、PTLD (移植後リンパ増殖性疾患) リスクが高い患者では臨床的に非常に重要です。