多発性硬化症患者の血液中の制御性 B 細胞の分布の分析 (B-MS)

多発性硬化症 (MS) は、中枢神経系 (CNS) の進行性免疫炎症性および変性疾患であり、若者の身体障害の 2 番目に多い原因です。 関連する病態生理学的メカニズムは複雑であり、効果的な治療戦略はまだ定義されていません。 さらに、今日では、個人に合わせた視点で治療アプローチを実行する必要があることが明らかになっています。 これに関連して、疾患の経過を評価するだけでなく、治療の有効性を予測するバイオマーカーは、MS で特に必要とされています。

最近のデータは、MS における B 細胞の直接的な役割を強調しています。 このような包括的なデータは、末梢 B 細胞の機能を枯渇または調節するために生物療法を使用する新しい治療戦略につながっています。 このようなアプローチは、有効性の矛盾した結果につながっています。 今日、B細胞が調節効果を弱めているのか、代わりにT細胞の病原性反応を増強しているのかは不明のままです。 そのような二重の特性は、抑制性の放出に依存する可能性があります（例： インターロイキン-10) または炎症誘発性サイトカイン (例: インターロイキン-6) および/または他の細胞、特に T 細胞との直接的な相互作用。

研究者らは、MS の開始段階、すなわち、放射線学的分離症候群 (RIS) および臨床分離症候群 (CIS) (2) MS の進行中、および ( 3) ナイーブ治療患者における MS の 2 つの臨床形態: 再発-寛解型 MS (RRMS) と一次進行型 MS (PPMS)。 B 細胞サブセットは、膜マーカーの組み合わせによって定義され、全血フローサイトメトリー (FCM) 分析でさまざまな時点 (包含 (治療前) および治療開始の 3、6、12、24 か月) で列挙されます。 放射線学的に孤立した症候群 (RIS、n = 20)、臨床的に孤立した症候群 (CIS、n = 20)、寛解型の再発を伴う MS 患者 (RRMS、n = 20)、および疾患の一次進行性進化を伴う MS 患者 (PPMS、n = 20)。 対照サンプルは、神経学的症状を伴う他の炎症性疾患に罹患している患者 (Devic 症候群、Neurobehcet、神経サルコイドーシス n = 20) または神経学的症状を伴わない患者 (全身性硬化症、SSc、n = 20)、および献血者 (n = 40) から収集されています。 B 細胞の機能特性を評価するために、患者の各グループからの末梢血単核細胞 (PBMC) を CD40 リガンドと CpG オリゴデオキシヌクレオチド (CpG ODN) で活性化し、IL-10 産生 B 細胞を FCM で数える。ホルボールミリステートアセテート、イオノマイシン、およびタンパク質輸送阻害剤としてのブレフェルジン A との短時間のインキュベーション。 疾患の発症または進行に関連する B 細胞亜集団の変化が代表的な選択された CIS および MS 患者では、B 細胞亜集団は精製され、CD40 リガンドおよび CpG ODN で活性化され、抗 CD3 活性化と共培養されます。炎症性サイトカインの T 細胞産生に対する阻害または増強効果を評価するための自己 T 細胞 IFN-ガンマ、IL-17)。

すべての表現型分析と細胞培養は、以前に検証されたプロトコルを使用して実行されます。 私たちの最終的な目標は、全身性 B 細胞集団を構成するサブセットの量的および機能的変化を、MS のグレーディングおよび進化と相関させることです。 このような戦略は、どの MS 患者が B 細胞を標的とする治療を受けるべきか、またその時期を特定することにつながる可能性があります。 さらに、枯渇戦略の後に、例えば自家精製Bレギュレーター細胞を導入することができる代替形態の細胞療法の理論的根拠を提供する可能性があります。