ブドウ糖、脳、微生物叢 (IRONMET+CGM)

対象と方法:

A. 横断研究:

以前に病院の内分泌・糖尿病・栄養サービス（UDEN）に予定されていた肥満患者「Dr. ジローナ（スペイン）のジョセップ・トルエタ」を募集し、研究する。 肥満のない方も公募で募集します。

血糖センサーが 10 日間埋め込まれ、この期間中の身体活動を記録する活動および睡眠トラッカー デバイスが埋め込まれます。 間質皮下グルコース濃度は、ＦＤＡによって検証されたグルコースセンサー（Ｄｅｘｃｏｍ Ｇ６（登録商標））を使用して、外来ベースで連続１０日間モニタリングされる。 センサーは 0 日目に移植され、10 日目の午前中にリタイアします。 グルコースの記録は、モニタリングシステムの十分な安定化を妨げるセンサーの挿入および取り外しによって引き起こされる偏りを避けるために、好ましくは2日目から9日目に評価される。 各患者の特徴的な血糖パターンは、2日目から9日目に得られたプロファイルから平均して計算されます。

週の終わりには、磁気共鳴イメージングが行われ、脳内の鉄含有量と、さまざまな脳領域での「拡散テンソル イメージング」のパラメータが評価されます。

認知テストが実施され、微生物叢の研究のために糞が収集されます。

このプロジェクトは、肥満のある被験者 (男性 20 人、閉経前の女性 20 人、閉経後の女性 20 人、BMI > = 30kg/m2) と、年齢、性別、閉経状態が類似している肥満のない被験者 (男性 20 人、閉経前の女性 20 人、閉経後の女性 20 人) で実施されます。 20 人の閉経後の女性、BMI <30kg/m2)。

B. 縦断的研究:

肥満の被験者が従来の治療（低カロリー食と身体活動のアドバイス）または減量のための肥満手術を受ける1年間のフォローアップの後、2回目の訪問が行われます。

比較のために、横断研究の同じプロトコルが再度行われます。 上記の情報を参照してください。

横断研究および縦断研究の被験者のデータ収集:

• 補助データ: 年齢、性別、生年月日。
• 臨床的変数：体重、身長、体格指数、ウエストとヒップの周囲、ウエストとヒップの比率、血圧（収縮期と拡張期）、脂肪量と脂肪自由量（生体電気インピーダンスとDEXA）、喫煙状況、アルコール摂取量、通常の医薬品の登録、および肥満、糖尿病、および併存症を有する先行する近親者の登録。
• 実験変数：絶食した被験者から15ccの血液を抽出し、臨床検査室の通常のルーチン技術を使用して次の変数を決定します（ヘモグラム、グルコース、ビリルビン、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST / GOT）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT / GPT）、ガンマ-グルタミルトランスペプチダーゼ (GGT)、尿素、クレアチニン、尿酸、総タンパク質、アルブミン、総コレステロール、HDL コレステロール、LDL コレステロール、トリグリセリド、糖化ヘモグロビン (HbA1c)、フェリチン、可溶性トランスフェリン受容体、超高感度 C 反応性タンパク質、赤血球沈降速度、リポ多糖結合タンパク質、遊離チロキシン（遊離T4）、甲状腺刺激ホルモン（TSH）、およびベースラインコルチゾール）。 さらに15ccの血液（血漿-EDTA）をさらに分析するために抽出します。
• 便サンプルの収集: 各患者から便サンプルが提供されます。 サンプルは自宅または病院で採取し、採取から 4 時間以内に検査室に送付し、断片化して -80ºC で保存する必要があります。
• 磁気共鳴画像法: すべての MRI 検査は、1.5-T スキャナー (Ingenia ®; Philips Medical Systems) で実行されます。 まず、流体減衰反転回復 (FLAIR) シーケンスを使用して、既存の脳病変を持つ被験者を除外します。 脳の鉄負荷は、R2 * 値によって評価されます。 T2* 弛緩データは、10 個の等間隔のエコーを含むマルチエコー グラディエント エコー シーケンスで取得されます (最初のエコー = 4.6ms; 最初のエコー = 4.6ms; インターエコー間隔=4.6ms; 繰り返し時間=1300ms)。 T2* は、単一指数項をそれぞれのマルチエコー データの信号減衰曲線に当てはめることによって計算されます。R2* 値は、R2*=1/T2* として計算され、Hz で表されます。 さらに、R2* 値は、以前にファントム テストで検証されたように、μmol Fe/g 単位に変換されます。 この目的のためのテンプレート画像 (EPI MNI テンプレート) を使用して、対照被験者からのブレイン アイアン画像を標準空間に正規化します。 その後、すべての正規化された画像は、通常の鉄含有量の決定のために平均化されます。 異なるアトラス マスクを使用して関心のある解剖学的領域の正常値 (平均値と SD) も計算され、性別と年齢の違いの可能性に対処します。 ボクセルベースの分析を使用して、コントロールと肥満の被験者間の脳の鉄の比較が実行されます。 肥満の被験者の画像は、標準空間に正規化されます。 正規化された画像は、年齢と性別を共変数とする t 検定分析を使用して正規母集団と比較されます。 その結果、パラメトリック マップは鉄沈着の個人差を示します。 いくつかの特定の領域での脳の鉄負荷の増加を示す以前の観察研究と、肥満およびインスリン抵抗性に関連する海馬および視床下部の変化を示唆する証拠に基づいて、統計分析および画像分析は、尾状核、水晶体、視床、視床下部での鉄の違いに焦点を当てます。 、海馬、扁桃体。
• 神経心理学的検査: 一般的な認知機能は、Wechsler Adult Intelligence Scale-III (WAIS-III) の語彙と類似性サブテストを使用して測定されます。 WAIS-II の Forward and Backward Digit Span サブテストによる注意力とワーキング メモリ。 California Verbal Learning Test IIを使用した記憶。 Trail Making Test、Color-Word Stroop Test、Verbal Fluency による実行機能。患者健康アンケート 9 を使用した気分と、ア​​イオワ ギャンブル タスクを使用した衝動的な行動。
• 微生物叢の組成: 微生物叢の組成は、前述のプロトコルに従って分析されます。 血液サンプル中の 16s rRNA qPCR および LPS 結合タンパク質は、細菌転座の検出に使用されます。

情報はノートに登録されたままになり、研究のデータベースに電子化されます。

統計的方法:

サンプルサイズ：グルコースの変動性、身体活動、腸内微生物叢の組成、および認知機能に関するサンプルサイズの推定に予想される違いを示す以前のデータはありません. 以前の研究では、20 人の肥満者と 20 人の非肥満者で脳の鉄含有量の違いが観察されました。 したがって、提案されたサンプル サイズは、グループごとに少なくとも 20 人で、バランスの取れた年齢と性別 (閉経前および閉経後の女性) の代表者です。

統計分析: まず、正規分布と分散の均一性がテストされます。 研究グループ間の違いを決定するために、カテゴリ変数には χ2 が使用され、通常の量的変数には対応のないスチューデントの t 検定が使用され、非正規量的変数にはマンホイットニーの U 検定が使用されます。 ノンパラメトリック スピアマン分析を使用して、量的変数間の相関を決定します。 同じテストを使用して、フォローアップの前後の違いを研究します。 有意な関連性は、正か負かにかかわらず、より詳細に調査されます (単純な多変量線形回帰分析)。

微生物叢の組成は、ヒートマップ、主成分分析 (PCA)、および PLSDA を使用して分析および比較されます。 多変量統計 (PLSDA および階層的クラスタリング) の場合、形態学的組織特性、腸内微生物叢、および機能テストを含む変数が対数変換され、四分位範囲推定を使用してフィルター処理され、自動スケーリング計算を使用してスケーリングされます (平均を中心とし、それぞれの標準偏差で除算します)。変数) Metaboanalyst ® プラットフォーム、R ® パッケージ ropls および MATLAB ® スクリプトを使用して。 アルファとベータの生物多様性は、肥満、インスリン抵抗性、および鉄の状態に従って比較されます。 また、SPSS ® 統計ソフトウェアと Minitab ® も使用されます。