PCOS における CAPA-IVM システムの成功率に対する GM-CSF の影響
PCOS におけるヒト体外卵子成熟 (CAPA-IVM システム) の成功率に対する顆粒球マクロファージ コロニー刺激因子 (GM-CSF) の影響
最小限の刺激または無刺激の卵巣から得られたヒト卵母細胞の体外成熟(IVM)は、制御された卵巣過剰刺激(COH)を伴う従来の生殖補助医療(ART)治療よりも「患者に優しい」治療オプションを提供します。 しかし、体外成熟中の卵母細胞の成熟速度と総胚盤胞収量は依然として制限されています。
このパイロット研究は、顆粒球マクロファージ コロニー刺激因子 (GM-CSF) として知られる重要な成長因子の添加を評価することを目的としています。 研究者らは、GM-CSFをヒトIVM培養培地に添加すると妊娠率がIVFと同程度のレベルに上昇し、生殖補助医療を受けているカップルにとって実行可能な臨床選択肢となるのではないかと仮説を立てている。
調査の概要
状態
状態
条件
条件
介入・治療
介入・治療
詳細な説明
最小限の刺激または無刺激の卵巣から得られたヒト卵母細胞の体外成熟(IVM)は、制御された卵巣過剰刺激(COH)を伴う従来の生殖補助医療(ART)治療よりも「患者に優しい」治療オプションを提供します。
通常、IVMは多嚢胞性卵巣(PCO/PCOS)の女性、または優れた卵巣予備能(つまり胞状卵胞数が多い)を持つ患者に提供されます。 IVM治療は、FSHまたはHMGの投与が最小限であり、HCG排卵誘発物質が存在しないことを特徴としています。
IVM アプローチは、ホルモンや超音波モニタリングの必要性が減るため、患者の日常生活への影響が少なく、卵巣過剰刺激症候群などの軽度および重度の合併症を回避し、患者と不妊治療の総費用を削減することを目的としています。医療予算のために。
小さな胞状卵胞から回収されたヒト卵母細胞は、減数分裂能に達していれば、胚胞の破壊と第一極体の押し出しを経て減数分裂を再開することができます。 これらの卵母細胞は受精できますが、生存可能な胚に成長できるのはその一部 (50% 未満) だけです。 胚発生の失敗は、少なくとも部分的には卵母細胞の細胞質が未熟であることが原因である可能性があるという仮説が立てられています。
研究者らは、卵丘-卵母細胞複合体内のcGMPおよびcAMPレベルに影響を与えることが知られている1°)天然化合物および2°)を使用した、新しいヒト体外成熟(IVM)培養システム(CAPACITATION-IVM、以下「CAPA」と呼ぶ)を開発した。 ) 卵母細胞と卵丘のクロストークに重要な化合物。 GV卵母細胞での回収後にサイクリックAMPを高く保つと、核成熟の発生が防止され、卵母細胞と卵丘細胞間のコミュニケーションの増加が可能になります。 これにより、卵母細胞における核と細胞質の成熟プロセスの同期が改善され、胚の品質が向上します。
PCOS において、完全刺激 GnRH アンタゴニスト HP-HMG 刺激 IVF-ICSI 治療の代わりに CAPA-IVM を使用した臨床転帰は、2 つの治療群で人工子宮内膜調製物で行われた最初の胚移植サイクル後の生児出生率が同等であることを示しました。 それにもかかわらず、12 か月時点の CAPA-IVM 累積生児出生率は 44% でしたが、体外受精では 62.6 でした。 (Vuong et al.、2020)。 したがって、CAPA-IVM における胚の減少率は従来の ART よりも大きくなります。 良好な胚数のこの差を補正するには、培養条件を改良する必要があります。
このパイロット研究は、顆粒球マクロファージ コロニー刺激因子 (GM-CSF) として知られる重要な成長因子の添加を評価することを目的としています。 最近の画期的な進歩として、GM-CSFをIVM培地に添加すると、ブタ、ウシ、マウスの着床前胚の発育を改善できることが示されました(オーストラリア、アデレード大学のMark Nottle教授による未発表の結果)。 さらに、マウスでは、これらの改善により、標準的なIVMと比較して、ガラス化/加温胚盤胞の移植後の着床率の増加(+62%)、出生率(+25%)が増加する傾向がありました。 これらの発見に基づいて、このパイロット研究は、二相性 CAPA-IVM 中に GM-CSF を使用する有益な効果を判断することを目的としています。 研究者らは、GM-CSFをヒトIVM培養培地に添加すると妊娠率がIVFと同程度のレベルに上昇し、生殖補助医療を受けているカップルにとって実行可能な臨床選択肢となるのではないかと仮説を立てている。
GM-CSF (EmbryoGene 培地中のロイカイン、Medicult) は、曝露された胚の着床率を高めるために、胚培養における添加剤として以前に使用されてきました。 1,000 人を超える患者を対象としたこの研究では、GMCSF を定期的に追加する利点は示されませんでした。 しかし、一部の患者、つまり着床が不十分な患者では、この因子の追加により臨床結果が改善されました(Ziebe et al.、2013)。 この研究では、受精および初期胚形成中にヒト卵母細胞を曝露することによる安全性の問題については言及されていません。
意図された研究では、卵母細胞の成熟段階中に GM-CSF にさらされるだけであり、胚が治験化合物と直接接触することはありません。
研究の種類
研究の種類
入学 (予想される)
入学
段階
段階
- 適用できない
連絡先と場所
研究連絡先
研究連絡先
- 名前:Lan N Vuong, PhD
- 電話番号:+84903008889
- メール:drlan@yahoo.com.vn
研究連絡先のバックアップ
- 名前:Dang Q Vinh, MD
- 電話番号:+84908225481
- メール:BSVINH.DQ@MYDUCHOSPITAL.VN
研究場所
-
-
-
Ho Chi Minh City、ベトナム
- 募集
- My Duc Hospital
-
-
参加基準
適格基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
説明
包含基準:
- ロッテルダム基準を使用して PCOS と診断された (AFC=25 または卵巣容積 > 10ml)
- 研究への参加に同意する
除外基準:
- 子宮や卵巣に大きな異常がないこと
- 子宮内膜症グレード2以上
- 重度のOAT(濃度<100万/ml、運動性<10%)、手術精子
研究計画
研究はどのように設計されていますか?
デザインの詳細
- 主な目的:処理
- 割り当て:ランダム化
- 介入モデル:平行
- マスキング:なし
アーム数
武器と介入
参加者グループ / アーム参加者グループ / アーム |
介入・治療介入・治療 |
|---|---|
|
ACTIVE_COMPARATOR:GM-CSFグループ
患者は、CAPAおよび成熟培地にGM-CSFが添加された介入グループにランダムに割り当てられます。 24 時間の CAPA 期間に続き、30 時間の IVM ステップ後に成熟度 (MII、GVBD、GV) の評価が行われます。 成熟した卵子は細胞質内精子注入 (ICSI) を使用して受精します。 受精した卵母細胞はタイムラプスインキュベーター(ASTEC)に置かれ、5/6日目(胚盤胞形成)までの発育が追跡されます。 |
GM-CSFをCAPAおよび成熟培地に添加
|
|
ACTIVE_COMPARATOR:対照群
患者は、CAPAおよび成熟培地にGM-CSFを添加しない対照群にランダムに割り当てられる。 24 時間の CAPA 期間に続き、30 時間の IVM ステップ後に成熟度 (MII、GVBD、GV) の評価が行われます。 成熟した卵子は細胞質内精子注入 (ICSI) を使用して受精します。 受精した卵母細胞はタイムラプスインキュベーター(ASTEC)に置かれ、5/6日目(胚盤胞形成)までの発育が追跡されます。 |
GM-CSF は CAPA および成熟培地には添加されません
|
この研究は何を測定していますか?
主要な結果の測定
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
発芽率
時間枠:採卵後少なくとも7日後
|
GM-CSF ありまたはなしの 2 種類の IVM 培養による胚盤胞の割合
|
採卵後少なくとも7日後
|
二次結果の測定
二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
|---|---|---|
|
発生学データ(成熟率、受精率、グレード1およびグレード2の胚盤胞率)
時間枠:成熟率:OPU後2日、受精率:OPU後3日、グレード1および2胚盤胞:OPU後少なくとも7日
|
成熟率: 2 種類の IVM 培養により採取された卵母細胞に対する成熟卵母細胞の割合 受精率: 2 種類の IVM 培養により注入された卵母細胞に対する 2PN の割合 グレード 1 および 2 胚盤胞率: 総数に対するグレード 1 および 2 胚盤胞の割合2種類のIVM培養による胚盤胞の観察
|
成熟率:OPU後2日、受精率:OPU後3日、グレード1および2胚盤胞:OPU後少なくとも7日
|
|
開始された治療サイクルの最初の移行後の継続妊娠率。
時間枠:妊娠12週目で
|
妊娠継続とは、最初の移植完了後、妊娠 12 週以降に心拍数が検出可能な妊娠と定義されます。
|
妊娠12週目で
|
|
無作為化後6か月の累積継続妊娠率
時間枠:ランダム化後6か月の妊娠12週目。 6 か月後、IVM を行っているほとんどの患者は凍結胚をすべて使い終えています。したがって、累積継続妊娠率を分析するためにこの時点を考慮します。
|
継続的な妊娠とは、開始した治療サイクルからすべての胚を移植した後、妊娠 12 週以降に心拍数が検出可能な妊娠と定義されます。
|
ランダム化後6か月の妊娠12週目。 6 か月後、IVM を行っているほとんどの患者は凍結胚をすべて使い終えています。したがって、累積継続妊娠率を分析するためにこの時点を考慮します。
|
|
有害事象(OHSS率、流産率、異所性率)
時間枠:OHSS率:採卵後3日および胚移植後14日、流産率:在胎22週以前、異所性率:在胎5~7週
|
OHSS 率: OHSS の定期的な評価は、両方のグループで採卵後 3 日目に実行されました。 また、患者が症状を報告した場合には、OHSS が評価されることもありました。 OHSS は、臨床試験設定で使用するために Humaidan らによって開発されたフロー図を使用して分類されました。 流産は、胎芽または胎児が生存できない、在胎 22 週以前の臨床的妊娠の自然喪失として定義されます。自然に吸収されたり、子宮から排出されたりしません。 子宮外妊娠とは、子宮腔外で着床が起こる妊娠と定義されます。 |
OHSS率:採卵後3日および胚移植後14日、流産率:在胎22週以前、異所性率:在胎5~7週
|
|
ヒト卵丘細胞遺伝子の相対発現率( R )
時間枠:卵丘細胞は少なくとも 30 時間の成熟培養後に収集され、RNA 精製まで -80℃ で保存されます。
|
卵丘細胞(CCc)を収集し、mRNA精製後にcDNA合成を行い、GM-CSFグループのCCとコントロールグループのCC間の遺伝子発現を検出するための相対定量PCRを行います。
|
卵丘細胞は少なくとも 30 時間の成熟培養後に収集され、RNA 精製まで -80℃ で保存されます。
|
|
乳児のDNAメチル化発現レベル
時間枠:納品時
|
新生児の材料(臍帯血、頬側塗抹標本、胎盤組織)はエピジェネティクス分析のために収集されます。 ゲノム全体の重亜硫酸塩シーケンス データ解析のための計算パイプライン。 重亜硫酸塩シークエンシングからのリードは、まず参照ゲノムに合わせてアライメントされます。 アライメントデータは、比較のために異なるトラックで視覚化することができます (コントロールグループと GM-CSF グループ)。 メチル化コール後、バルクメチル化レベルとゲノム全体のメチル化レベルが計算およびプロットされ、DMR (示差的にメチル化された領域) が決定されます。 統合分析を実行するには、DNA メチル化データを遺伝子発現 (例: 差次的遺伝子 (DEG)) と組み合わせて、DNA メチル化の制御的役割を明らかにします。 |
納品時
|
協力者と研究者
捜査官
捜査官
- 主任研究者:Tuong M Ho, MD、Hope Research Center
出版物と役立つリンク
一般刊行物
- Guzman L, Ortega-Hrepich C, Albuz FK, Verheyen G, Devroey P, Smitz J, De Vos M. Developmental capacity of in vitro-matured human oocytes retrieved from polycystic ovary syndrome ovaries containing no follicles larger than 6 mm. Fertil Steril. 2012 Aug;98(2):503-7.e1-2. doi: 10.1016/j.fertnstert.2012.01.114. Epub 2012 Feb 23.
- Guzman L, Adriaenssens T, Ortega-Hrepich C, Albuz FK, Mateizel I, Devroey P, De Vos M, Smitz J. Human antral follicles <6 mm: a comparison between in vivo maturation and in vitro maturation in non-hCG primed cycles using cumulus cell gene expression. Mol Hum Reprod. 2013 Jan;19(1):7-16. doi: 10.1093/molehr/gas038. Epub 2012 Sep 6.
- Heijnen EM, Eijkemans MJ, Hughes EG, Laven JS, Macklon NS, Fauser BC. A meta-analysis of outcomes of conventional IVF in women with polycystic ovary syndrome. Hum Reprod Update. 2006 Jan-Feb;12(1):13-21. doi: 10.1093/humupd/dmi036. Epub 2005 Aug 25.
- Sanchez F, Lolicato F, Romero S, De Vos M, Van Ranst H, Verheyen G, Anckaert E, Smitz JEJ. An improved IVM method for cumulus-oocyte complexes from small follicles in polycystic ovary syndrome patients enhances oocyte competence and embryo yield. Hum Reprod. 2017 Oct 1;32(10):2056-2068. doi: 10.1093/humrep/dex262.
- Ho VNA, Braam SC, Pham TD, Mol BW, Vuong LN. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Hum Reprod. 2019 Jun 4;34(6):1055-1064. doi: 10.1093/humrep/dez060.
- Ziebe S, Loft A, Povlsen BB, Erb K, Agerholm I, Aasted M, Gabrielsen A, Hnida C, Zobel DP, Munding B, Bendz SH, Robertson SA. A randomized clinical trial to evaluate the effect of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) in embryo culture medium for in vitro fertilization. Fertil Steril. 2013 May;99(6):1600-9. doi: 10.1016/j.fertnstert.2012.12.043. Epub 2013 Feb 4.
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (実際)
研究開始
一次修了 (予期された)
一次修了
研究の完了 (予期された)
研究の完了
試験登録日
最初に提出
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
最初の投稿
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
投稿された最後の更新
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
最終確認日
詳しくは
この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。