牛肉のユニークな食物マトリックスが人間の健康に与える影響

健康で喫煙していない男性が適格性についてスクリーニングされ、主に血漿低密度リポタンパク質コレステロール（LDL-C）濃度だけでなく血漿TAG濃度にも基づいて、研究のために最低30人の男性が選択されます。 男性は、食事制限やコレステロール低下薬を摂取してはならず、総コレステロールが 300 mg/dL を超えたり 120 mg/dL を下回ったりしてはなりません。 参加者は、身体活動の習慣的なレベルを変えないように求められます。 血漿 TAG は 220 mg/dL を超えてはなりません。 私たちの研究室からの以前の研究に基づいて、2 期間のランダム化されたクロス オーバー デザインが使用されます。 各参加者は、テスト期間の間に4週間のウォッシュアウト期間を設けて、ランダムに割り当てられた順序で5週間の牛ひき肉介入を2回完了します. 男性は、牛ひき肉の種類ごとに週に 5 枚の牛ひき肉パテを 5 週間消費します (各種類につき 25 パテ)。 2 つの処理は、低脂肪 (脂肪 5%) と高脂肪 (脂肪 25%) の牛ひき肉です。 参加者は 2 つのグループのいずれかに割り当てられます (グループごとに n ≥ 15)。これは、最初のスクリーニングで LDL-C 濃度に関してバランスが取れています。 グループは、年齢と体重でブロックされます。

研究用に選択された被験者の訪問 1 (最初の食事介入の直前) (約 1 時間):

管理栄養士が食事指導、サンプルメニュー、調理指導を行います。 参加者は、NutriBase ソフトウェアを使用してダイエット記録を完成させるための指示を受け取ります。

参加者には、パテの最初のセットが提供されます。 被験者は、パティを食べ始める前に、NutriBase で 3 日間の食事の記録 (自宅で行う) を完了します。 パティの消費スケジュールに関する指示も被験者に提供されます。

被験者は、パティ消費の 5 週目に、NutriBase で 3 日間の食事記録を完了します。

登録栄養士または主任研究者は、週に 1 回、被験者に連絡し (電話または電子メール)、被験者が研究または NutriBase システムについて質問があるかどうかを尋ね、指示どおりにパティを調理および使用していることを確認します。

最初の 5 週間の介入の後、4 週間のウォッシュ アウト期間があり、被験者は研究に参加せず、通常の食事をとります。 被験者は、ウォッシュアウト期間の最後の週に NutriBase で 3 日間の食事記録を継続して記入するよう求められます。

登録栄養士または PI は、週に 1 回、被験者に (電話または電子メールで) 連絡を取り、被験者が研究または NutriBase システムについて質問があるかどうかを尋ね、被験者が指示どおりにパティを調理して使用していることを確認します。

牛ひき肉のソース。 5% および 25% 脂肪のパテの生産のための原材料のソースは、テキサス A&M 大学のローゼンタール食肉科学および技術センターを通じて処理された、肥育場で飼育された牛からのフランクおよびプレート プライマルです。 プライマルは、テキサス A&M 大学 O.D.バトラー動物科学教育研究センター。 牛ひき肉介入の各段階の開始前に、各参加者は、25 個の冷凍真空包装されたパテが入ったラベルのない箱を受け取ります。

参加者は、牛ひき肉のパテの準備と消費について広範囲に訓練されます。 登録栄養士は、被験者の調理方法や食事の記録管理に関する専門的な意見を提供する個別のコンサルタントです。 研究者は、エネルギー摂取量が一定のままである条件下では、参加者が消費する脂肪からのエネルギーの割合が増加し、炭水化物からのエネルギーの割合が減少すると予測しています.

食事ガイドラインと食事記録。 すべての参加者は、レシピを含む牛ひき肉の準備と消費について、登録栄養士から指示を受けます。登録栄養士は、上記の研究訪問で示されているように、参加者にも連絡します。 パティの消費以外に、被験者は通常の食事をとるように指示されます。 研究者らのこれまでの研究では、牛ひき肉のパティの消費に対する強い遵守が示されており、炭水化物からのカロリーの割合の減少以外に、参加者の習慣的な食事に変更がないことを示していました.

スクリーニングのための訪問では、参加者は動物科学部門を訪問して、目標と予想される結果を含む研究の詳細な概要を確認し、適格性を判断するためにバイタル測定と血液を収集する必要があります。

訪問 1 では、研究スタッフが Nutribase ソフトウェアについて説明し、食事の記録について詳細な指示を出します。 登録栄養士は、レシピの指示と提案を提供し、規定の間隔でテストグラウンドを消費することの重要性を強調します. 5 週間の 2 回のテスト期間中、登録栄養士または PI は毎週参加者に連絡し、食事記録の完成または牛肉の準備に関する質問に回答します。

参加者は、栄養摂取量を確立し、コンプライアンスを促進するために、食事介入の前の週と各介入の最後の週に3日間の食事記録を完了するように求められます. NutriBase ソフトウェアは比較的使いやすく、食事摂取量に関するより正確な情報を提供します。 タンパク質、炭水化物、および脂肪の毎日の摂取量は、市販の NutriBase ソフトウェアを使用して分析されます。 研究者の以前の研究で使用されたダイエットソフトウェアは、赤身、中脂肪、および高脂肪の肉の消費に関する情報を提供しましたが、研究者は、どの肉源がテスト用の牛ひき肉に置き換えられているかを判断できませんでした。テストパテによる慣習的な肉源（例えば、魚、豚肉、または家禽）の置き換えは、現在の研究で文書化されます. さらに、食事の交換 (肉、パン、果物、野菜など) を分析して、試験用パティの消費中に予測される炭水化物摂取量の減少を記録します。

一般的な採血と分析。 採血の日に、水のみに制限された一晩の絶食（少なくとも10時間）の後、被験者は検査室に報告するよう求められます。 血液（１０ｍＬ）は、標準的な無菌の瀉血手順を使用して、前肘窩領域から血清分離バキュテナーチューブへの静脈穿刺を介して、５分間の座位安静後に収集される。 血液サンプルは、スクリーニング訪問中、および訪問2、3、および4で採取されます。合計約40 mLの血液が、約15週間にわたって各参加者から採取されます。

採血後、血液を室温で 2 時間凝固させるか、または 4°C で冷やして血清と血漿を分離した後、冷却遠心機で 20 分間 (2,000 × g) 遠心分離します。 1 台の血清分離バキュテナーは、標準的な臨床化学分析を使用して、総コレステロール、HDL-C、LDL-C、および TAG を測定するために、同じ日に商用の臨床検査改善修正法 (CLIA) 認定検査室に輸送されます。 追加のバキュテナーからの血清および血漿のアリコートを、別の 2 mL 冷凍バイアルに移します。

リポタンパク質粒子数の測定。 曲線下のリポタンパク質粒子質量面積は、分析用超遠心分離によって生成された連続勾配で決定されます。 この手順により、超低密度リポタンパク質 (VLDL)、LDL、dense LDL-III、dense LDL-V、HDL、浮力 HDL-2b、およびレムナント リポタンパク質 (RLP ）。 LDL-I と LDL-II の濃度は差によって計算できます。

統計分析。 すべての被験者が両方の牛ひき肉の介入を通じてローテーションされるため、データは分割プロット設計によって分析されます。分割プロットとして食事全体と時間 (習慣的な食事とテスト ダイエット) を使用します。 HDL-C が習慣的な食事と比較して 24% 脂肪の牛ひき肉の消費によって 2.8 mg/dL 増加したという我々の以前の研究からのデータに基づいて、必要なサンプルサイズを推定するために検出力計算が行われました。 分析には次の仮定が使用されました。検出力は 0.8 に設定され、a は 0.05 に設定されました。 高脂肪の牛ひき肉が HDL-C 濃度を上昇させるという仮説を検証するには、サンプルサイズ 16 で十分であると推定されました。