市販のDHAサプリ

研究者は、研究者の治験審査委員会の規則 (HRPO #10-417) によって承認されたプロトコルに従って、低リスクの助産クリニックから第 3 期後半に 73 人の妊婦を募集しました。 クリニックのすべての女性に参加を提案し、同意した女性については妊娠 34 ～ 36 週で登録を行いました。 除外基準には、子癇前症、妊娠糖尿病または妊娠前糖尿病、薬物の慢性使用、および妊娠の他の医学的合併症が含まれていました。 健康保険の携行性と説明責任に関する法律のガイドラインに従って、年齢、妊娠率、妊娠歴、妊娠期間、民族性、分娩時の BMI、および分娩方法を含む母体のデータが収集されました。 分娩記録を確認した後、性別、出生時体重、身長、頭囲、および母体の分娩特性を含む新生児データを収集しました。

被験者は、魚油ベースの 275mg Promise DHA (Biotegrity; テキサス州グランベリー) を毎日経口摂取するグループ、または藻類ベースの 200mg エクスペクタ DHA (Mead Johnson; Evansville, IN) を毎日経口摂取するグループ、または食事を無作為に受け取ることに同意しました。いつも通りの習慣。 無作為割り付けの課題は不透明な封筒に隠され、登録時に公開されました。 カレンダーはサプリメントの使用を記録するために保管され、未使用のサプリメントは陣痛と分娩への入院時に提出されました. カレンダーの精度を検証するために、ピルカウントが実行されました。

サンプルサイズの考慮事項: 調査員の主要評価項目は、母体血清および新生児臍帯血中の DHA レベルでした。 DHA 比率の 15% の増加を検出するには、各グループで 19 のサンプル サイズが必要です。 この研究はパイロット調査であり、研究者集団でより大規模なサプリメント研究が実行可能かどうかを判断するために設計されています.

血液サンプルの収集 静脈血サンプルは、登録時および無作為化時に各参加者から収集されました。 母体の血液を前肘窩から EDTA を含むチューブに採取し、-4 ℃ で保存した。 新生児サンプルは、分娩時、臍帯クランプ直後に同様に収集されました。 採取から 72 時間以内に、溶血していない母体と新生児のサンプルを特定し、臨床用遠心分離機で 5 分間遠心分離し、血漿部分を抽出して、脂肪酸分析が行われるまで -78 ℃ で 2 mL バイアルに保存しました。

脂肪酸分析：

サンプルを室温で解凍し、Folch et al (1957) の方法に従って、クロロホルム/メタノール (2:1、v/v) を使用して脂質抽出を行いました。 抽出された脂質残留物は、窒素気流下、45℃で乾燥させた後、秤量した。 血清の総リン脂質成分は、血清の 1 mL アリコートをクロロホルム: メタノール (2:1、v/v) で抽出することによって得られた総脂質画分のケイ酸カラムクロマトグラフィー (26) によって分離されました。 脂肪酸は、メタノール中の 0.5 N NaOH とメタノール中の 14% (w/v) 三フッ化ホウ素を使用してエステル交換され、メチルエステルを生成しました (27)。 メチル化の前にウンデセン酸 (Nu-Check Prep、ミネソタ州エリシアン) を加え、内部標準として使用しました。

脂肪酸メチルエステルは、オートインジェクター、スプリット/スプリットレスキャピラリー注入システム、および他の場所で説明されているように水素炎イオン化検出器を備えたガスクロマトグラフ (6890N、Agilent Technologies、カリフォルニア州サニーベール) を使用して定量化されました (28)()。 Loor と Herbein (28) によって記述され、AA と DHA を含む純粋なメチルエステル標準で作成されたカスタム脂肪酸混合物 (Nu-Check Prep、エリシアン、ミネソタ州、米国; Sigma、セントルイス、ミズーリ州、米国) を使用しました。ピークを特定し、Chem DataStation (Agilent Technologies、Sunnyvale、CA) と統合するための応答係数を決定します。