発作患者におけるPM2.5曝露とフェロトーシスとの関連

背景: 中枢神経系に対する大気汚染 (PM2.5) の影響の正確なメカニズムにもかかわらず、まだ議論中です。 大気汚染 (PM2.5) がてんかんなどの神経変性疾患に影響を与えるという証拠が増えています。 大気汚染 (PM2.5) がミクログリアから放出される炎症誘発性サイトカインのレベルを上昇させることはよく知られており、高度な研究により、インターロイキン 6 のレベルがてんかんの症状に影響を与えることが示されました。 さらに、以前の研究では、Nrf2 が発作の症状と認知機能において重要な役割を果たしていることが示されました (NCT05269901)。 ただし、ミクログリアによって放出される PM2.5 誘導性炎症性サイトカインが Nrf2 依存性フェロトーシスを変化させて発作症状と認知機能を促進するかどうかは、まだ調査されていません。 したがって、このパイロット コホート研究は、PM2.5 曝露とインターロイキン 6 レベルおよび Nrf2 依存性フェロトーシス経路の変化との間の潜在的な関連性を発見することを目的としています。

方法:

1. 研究者はまず、2 つの都市 (揚州と徐州) から最近てんかんと診断された (2 か月未満) 低 PM2.5 曝露のてんかんの子供と同年齢の高 PM2.5 曝露の子供 30 人を、以下に基づく対照および大気汚染グループとして登録しました。以前の PM2.5 記録;
2. 2022.12 から 2023.3 までの 5 日ごとに 2 つの都市の PM2.5 レベルを記録し、差を比較しました。
3. Interleukin-6 ELISA（IL6） KIT を使用して、2 つのグループの炎症性サイトカインのレベルを比較しました
4. 4 Hydroxynonenal (4HNE) ELISA KIT を使用して、2 つのグループの脂質活性酸素種レベルを比較しました
5. リアルタイム定量PCR（RT-qPCR）を使用して、Nrf2依存性フェロトーシス経路（Nrf2、SLC7A11、GPX4）のメッセンジャーRNA（mRNA）発現を比較しました 詳細な方法プロトコル

1. PM2.5 レベルの出典: PM2.5 レベルは、中華人民共和国生態環境省のデータを介して記録されました (air.cnemc.cn:18007/)。 2.サンプル採取：この研究の最後に、登録された参加者は末梢血を採取するために病院に来ます（それぞれ江南大学付属病院と徐州小児病院）、血液サンプルはエチレンジアミン四酢酸（ 3. Interleukin-6 および 4HNE: 血漿中の IL-6 および 4HNE 濃度を競合 ELISA 法で検出 4. RTqPCR シーケンス: h-GPX4 forward: 5'-GAGGCAAGACCGAAGTAAACTAC -3' h-GPX4 リバース: 5'-CCGAACTGGTTACACGGGAA-3' h-SLC7A11 フォワード: 5'-TCTCCAAAGGAGGTTACCTGC-3' h-SLC7A11 リバース: 5'-AGACTCCCCTCAGTAAAGTGAC-3' h-Nrf2 フォワード5'-ATAGCTGAGCCCAGTATC-3' h -Nrf2 リバース 5'- CATGCACGTGAGTGCTCT-3' h-GAPDH フォワード: 5'-GGAGCGAGATCCCTCCAAAAT-3' h-GAPDH リバース: 5'-GGCTGTTGTCATACTTCTCATGG-3'