ウクライナ感染症における医療関連の細菌および真菌病原体の種スペクトルと生物学的特性の評価、および新しい 4-チアゾリジノン誘導体の抗菌および抗真菌活性のインビトロ調査。 (HAIsUA)

英語での要約 Yulian Konechnyi 医療関連感染症の細菌および真菌の原因物質の種スペクトルと生物学的特性、および 4-チアゾリジノン誘導体を使用したそれらに対する抗菌活性の研究。 - 原稿の権利に関する適格な科学的研究。

博士号取得のための論文専門分野 222 医学 (知識分野 22 ヘルスケア)。 - Danylo Halytskyy リヴィウ国立医科大学、ウクライナ保健省、リヴィウ、2021 年。

論文の概要 この論文は、近年のウクライナにおける医療関連感染症（HAI）の構造と分布、病原体の種スペクトルの特徴、抗生物質耐性の蔓延、HAIの稀な病原体によって引き起こされるものを含むHAIの臨床的および微生物学的特徴、ならびに抗菌薬の新しいプロトタイプを導入するための抗菌および抗真菌活性を有する新しい化合物の検索、合成、スクリーニング。

研究計画に従って、2009年から2020年までのウクライナにおけるHAI症例の登録に関するウクライナCDCのデータ分析が実施された。 その結果、ウクライナで初めて、過去 12 年間の HAI の登録が分析されました。その結果によると、毎年平均 4,759 ± 710 件の HAI が登録されています。 分析された資料は、国内の HAI 発生率が大幅に過小評価されていると主張する根拠を与えている。

地元の4つの病院のICU部門の250人の患者を対象とした、微生物学的および疫学的基準に基づく包括的、動的、臨床および臨床機器検査の結果によると、205人の患者で該当する診断が確認された。 HAI 患者のうち、46.8% が男性、53.2% が女性でした。 HAIの全症例のうち、24.9％が小児（8.8％が新生児を含む）、64.9％が18～60歳、高齢者（60歳以上）が10.2％であった。 最も一般的な疾患分類は気道感染症 (36.6%) と尿路感染症 (34.1%) でした。 ほとんどの HAI (58.6%) は入院 5 日目から 14 日目に発生しました。

389 の生体材料が採取され、そこから 309 株の微生物が分離されました。その中でグラム陰性菌が優勢 (51.5%) であり、その種スペクトルには 27 の異なる種の代表が含まれていました。 シュードモナス属の代表株が最も多く分離されており、50株が分離され、病原体総数の16.2%を占めた。 グラム陽性微生物叢は 15 種類の病原体で代表され、そのうち最も多いのはブドウ球菌属のメンバーであり、病原体の総数の 16.8% に当たる 52 の分離株が含まれています。 真菌の中では、12 種類の病原体が分離され、そのほとんどがカンジダ非アルビカンスでした。20 株が分離され、これは病原体総数の 6.5% に相当します。

ウクライナで初めて、希少病原体であるラウルテラ（クレブシエラ）・テリゲナとビブリオ・メチコヴィイによって引き起こされる臨床例が特定され、報告された。 私たちが報告した症例を文献に記載されている臨床症例と比較しました。 R. terrigena の分離株には、標準株 Raoutella terrigena ATCC 33257 よりも顕著な膜形成特性があり、その膜形成速度はブドウ球菌による膜形成速度を超えることが示されました。

ビブリオ・メチコビイによって引き起こされた臨床例を分析すると、感染の最も可能性の高い原因は人工血管の術中の微生物汚染であることに留意する必要があります。

病原体の種同定は、生化学検査システム (MIKRO-LA-TEST ErbaLachema、チェコ共和国)、MALDI-TOF (ポーランド、ブィドゴシュチュの医学部微生物学科で実施) を使用し、個々の菌株 - 16sRNA- に対して実施されました。 ID。 培養物の生化学的同定の同定スコア (指数) は、87.4% の分離株 (n=270) で > = 95%、または > = 99% でした。 50.8% の株 (n=157) の非定型性指数 (Tin) は 0.25 ～ 0.49 でした。 つまり、これらの株は非定型であると特徴付けることができます。 MALDI ID スコア 95.5% の分離株 (n=295) が 2.0 以上で、つまり良好な種同定を示し、他の分離株の ID スコアは 1.7 ～ 1.9 でした。 これは一般的な識別を示します。 クレブシエラ属のグラム陰性桿菌の PCA 分析により、それらを 4 つの主要なクラスターに分割することができ、分離株の顕著な類似性が示され、RAPD 分析と併せて病原体の院内感染を確認することができました。 16S rRNA 分析の結果に従って、肺炎桿菌分離株の比較が行われ、感染の共通の起源が証明されました。 さまざまな同定方法により、76.1% の株 (n=235) で結果の完全な一致が記録されたことが確立されました。 最も高い識別精度は 16sRNA 分析で示されていますが、速度は MALDI-TOF です。

抗生物質感受性の結果は、分離株の 62.8% (n=194) が MDR、7.4% (n=23) が EDR、28.8% (n=89) が非 MDR であることを示しました。 1% (n=3) の株は PDR に起因すると考えられました: 2 - P.putida および 1 - P.aeraginosa。 研究された腸内細菌の 33.8% (n=25) は、別のグループの 47 分離株 (83.9%) が OXA-48 を生成し、そのうちすべての分離株は MDR でした。 真菌株の大多数 (82.9%) はフルコナゾールに耐性があり、この薬剤の最も一般的な選択は真菌感染症の経験的治療法であると説明できます。

アクロモバクター・キシロソキシダンス (№ LMU-147) およびセラチア・マルセッセンス (№ LMU-48) の培養物が分離され、HAI の原因におけるそれらの役割が証明されました。 分離された株は、UA 分類 (米国 CDC 分類 - バイオセーフティ レベル 1) に基づいてクラス IV の病原性として分類されますが、鋸歯状の場合はより顕著に、内臓を貫通する可能性があります。 Candida utilis (LMU-127) は低病原性株であり、侵襲性はありません。

55 種類の新しく合成されたチアゾール誘導体が、抗生物質活性を持つ新しい化合物の検索と研究に使用されました。 カンジダ属の真菌に対する最小阻止濃度 25 μg の 3-[5-(1H-インドール-3-イルメチレン)-4-オキソ-2-チオキソチアゾリジン-3-イル]-プロパン酸には顕著な抗真菌効果がありました。 /mL および同様の効果を持つ 2-[5-(1H-インドール-3-イルメチレン)-4-オキソ-2-チオキソチアゾリジン-3-イル]-エタンスルホン酸中の大腸菌に対する選択的抗菌効果 (MIC=25 μg) /mL）。 黄色ブドウ球菌グループに対して最も活性があったのは、C5 位に末端フラグメントを持つ 2-(5-イリデン-4-オキソ-2-チオキソ-チアゾリジン-3-イル)-スクシンイミドでした。

フェニレンアミンまたはベンジリデン部分を含まない 2-シアノ-2-[5-(エトキシメチレン)-4-オキソ-3-フェニル-チアゾリジン-2-イリデン]-N-(o-トリル)アセトアミド誘導体の場合位置 C5 の構造 チアゾリドン核の位置は、緑膿菌の多剤耐性臨床株に対して最も高い活性を示しました。

実験動物モデルは、抗菌活性を持つ「リーダー化合物」の免疫毒性/アレルギー誘発性/急性毒性効果を研究しました。 免疫毒性やアレルギー誘発性の効果は見つかりませんでしたが、中程度の抗炎症効果があります。 CD3 T リンパ球の絶対数が 21.46% 増加したことを背景に、CD22 B リンパ球の量的レベルのわずかな減少 (1.98%) が記録されました。 サプレッサーリンクの活性化により、免疫調節指数がいくらか低下しました (指標は信頼できません)。

実験動物の免疫グロブリンおよびインターロイキンのレベルに対する試験物質の効果は、IgA の 21.4% の有意な減少 (p <0.05)、および IgG の 21.2% の増加を示しました。 したがって、好中球の貪食数の増加と吸収特性という点で、貪食系の活性が増加しました。 このような生物学的活性の選択性は、いくつかの免疫病理学的状態の治療に役立つ可能性があります。

抗真菌活性に伴う効果が確認されたことは、多標的作用を持つ「薬物様分子」のさらなる研究の見通しを示している。

HAI の有病率、その登録、特定の診断法の状況、臨床材料から分離された微生物を同定する最新の方法の比較の分析は、微生物学的研究のレベルを上げる必要性、標準化された登録システムの導入、および院内感染の研究の必要性を示しています。健康に悪影響を及ぼす可能性のある感染症。

論文の結果と分離株の生物学的特性の研究によれば、対応する菌株はウクライナ国立科学アカデミーの微生物・ウイルス研究所の寄託所に寄託された。

この研究に基づいて、2件の実用新案特許が発行されました。 さらに、分子ドッキング研究により、「リーダー化合物」7-(3,4-ジメトキシフェニル)-5-メチル-3H-チアゾロ[4,5-b]ピリジン-2-オンが選択されたタンパク質に良好に結合することが示されています。参照 N21 阻害剤およびシプロフロキサシンと比較した標的。

キーワード 医療関連感染症 (HAI)、院内感染、抗菌剤耐性、抗生物質耐性、機器関連病原体、抗菌活性、抗真菌活性、4-チアゾリジノン、チアゾール、細胞性免疫、免疫向性作用、モルモット、MALDI、希少病原体。

出版物。 論文資料によると、Web of Science および/または Scopus 誌に索引付けされた 8 件の論文、ウクライナの専門誌 (カテゴリ「B」) の記事、一般雑誌の 1 件の論文を含む 10 件の論文が出版されました。

研究結果は、ウクライナ国外の 3 つの国際会議とウクライナでの 1 つの国際会議での口頭報告の形を含む、17 の会議で発表されました。

研究結果に基づいて、2件の実用新案特許と3件の微生物株の初期寄託証明書が公開されました。