地中海地域の被験者のコホートを思い出してください。肝臓病の監視（Nutrihep 3）。 (Nutrihep3)

肝臓疾患は、世界中で高い有病率と発生率が高く、世界的な罹患率と死亡率に大きな影響を与える重大な公衆衛生問題を表しており、年間約200万人の死亡を引き起こしています。 死亡は、主に肝硬変および肝細胞癌の合併症に起因しています。 世界中の肝硬変の最も一般的な原因は、ウイルス性肝炎、アルコール、および貧弱な食習慣によって引き起こされる非アルコール性脂肪肝疾患に関連しています。 肝炎性ウイルスは、急性肝炎のほとんどの場合の病因因子ですが、薬物誘発性肝障害はますますかなりの割合の症例を表しています。

イタリアでは、肝疾患の発生率が近年研究の対象となっています。 これらのデータに基づいて、イタリアは、ウイルス性と代謝の病因の両方が、慢性肝疾患の高い有病率と発生率の原因である「ハイパーレンデミック」地域として特定されています。 さらに、北からイタリアへのウイルス性肝炎の発生率の進行性の増加が観察されています。 ここ数十年で、これらの疾患の病因は大きな変化を遂げてきました。

B型肝炎ウイルス（HBV）に関して、ワクチン接種プログラムは、社会経済的状態の改善と人口認識の向上とともに、このウイルス性疾患の発生率と有病率を徐々に減らしました。 1980年代と1990年代の増加後、C型肝炎ウイルス（HCV）に関連する慢性肝炎は、特に若い年齢層の間で、現在、減少傾向を示しています。 他の研究では、世界中の肝疾患の最も一般的な原因の1つとして示されている代謝起源（ASLD、MetalD、ALDなど）の肝疾患に焦点を当てていますが、1990年代後半にイタリアの人口に関する最新の疫学データは収集されました。 10年が経過しているように、特に南イタリア、特に海岸と後背地の両方から地理的に等距離にある肝臓病の有病率パターンに関する新しいデータを収集することは興味深いと考えられていました。

したがって、この観察研究は、地中海地域ですでに特定された患者のコホートを思い起こさせることにより、肝疾患の進化を分析することを目的としています。 コホートは、肝機能、併存疾患、食事の習慣の評価をすでに受けているプトイニャーノ（BA）の自治体に居住する個人で構成されています。さらに、ゲノムワイド関連（GWAS）分析を介して遺伝的情報を追加することに加えて、遺伝的変異体と同様の表現型を理解することで遺伝的特性を発見することで遺伝的特性を発見するための関連性を特定するのに役立ちます。代表的な集団サンプルを使用して、関連する併存疾患。

収集されたデータの分析は、予防と管理戦略を最適化することを目的として、肝疾患の進行のリスク要因と予測バイオマーカーを特定することを目的としています。 結果は、臨床監視を改善し、肝疾患のある個人の個別の介入を促進するための有用な情報を提供します。 分析は、高度なバイオインフォマティクスと統計的方法論を使用して実施され、結果の堅牢性を確保します。

このリコールは、最初のリコールからほぼ20年後に実行されます。 被験者のリコールは、疾患の進行因子または疾患の発症の縦断的評価を可能にします。

このコホート研究の目的は、Nutrihep 1およびNutrihep2研究に以前に関与していた被験者を思い出すだけでなく、すべてのコホート研究と同様に、個人のグループの暴露と結果との関連を評価することです。 さらに、以前に検討されたパラメーター（血液検査、食事アンケート、および身体活動）を再評価することに加えて、その変動を研究するために全ゲノムの遺伝子型を研究することで、SNP-Array技術など、ハイスループットのジェノム技術を使用して単一ヌクレオチド多型（SNP）の全ゲノム遺伝子型を実行します。 この技術により、以前は異なる先祖集団で特徴付けられ、1000ゲノムプロジェクトフェーズ3データベースに存在する、ゲノム全体に均等に分布した数千/数百万の遺伝的変異の分析が可能になります。

これらの遺伝的変異体（SNP）の特性評価により、研究コホートの各被験者について、複数の遺伝的変異体の組み合わせの影響によって決定される遺伝的およびポリジェニックリスクスコアを計算することができます。

具体的には、遺伝的およびポリジェニックリスクスコアの決定は、ゲノムワイド関連研究（GWAS）から得られたデータを使用して実行され、患者コホートの祖先起源に基づいたMAFLD病理学に関連するvariantに対立遺伝子カウントを重視するために、洗練された生物統計的および数学的アルゴリズムを使用して実行されます。 その後の段階では、遺伝的およびポリジェニックリスクスコアを使用して、臨床的特徴を持つ患者のサブグループを特定し、病理学の発症と進化のリスクを予測するために、病気の被験者の臨床的特性との関連を研究します。

Nutrihep Cohort（Putignano）は2006年から2007年に初めて設立され、2300人の被験者のコホートで構成され、1：3ステップでPutignano（BA）の一般開業医のリストから思い出しました。

2015年から2018年には、同じ被験者がリコールされ、フォローアップの遵守は65.60％でした。 さらに、2007年から2014年にかけて102人の死亡が記録されました。

リコールでは、第1波からの2300を考慮します。そこからは、地域のエドットシステムと他の地域に移動した人々を介した死亡登録簿の協議を通じて死者が評価されます。

さらに、一般開業医の登録に基づいて1：3ステップで抽出された研究集団の代表性を維持するために、組み込みコホートが作成されます。 このアプローチは、最初のコホートが老化しているため、研究の開始時に存在していたが時間とともに老化している若い年齢層に属する個人がもはや含まれていないため、有用です。 これにより、最初の分布と同様の年齢分布を維持することができ、コホートが高齢者グループに徐々に歪めるのを防ぎ、コホート自体の老化と結果の一般化可能性を改善するためにバイアスを減らすことができます。 また、特にいくつかの高齢の年齢層が結果に対する曝露の影響を分析するために重要であるため、研究の統計力を維持することもできます。

以前のモダリティと同様のモダリティがあるため、この観察研究では、主に次の段階に焦点を当てます。

初期段階

• Nutrihep 1研究の参加者の名前と、若い年齢層を補うために一般開業医のリストを通じてPutignanoの住民の両方から引き出して、呼び出される被験者のリストの作成。
• 自宅に送られて電話をかけて、まだ生きている被験者を再接続します。
• 予定のスケジュール。

V1：

• インフォームドコンセントに署名。
• フィブロスカンによる非侵襲的検査による肝臓の健康の評価。
• 疫学的パラメーター（年齢、性別、収入、病理学的、肝関連疾患の家族歴史）に基づくANMNESIS;
• 重量、高さ、ウエスト周囲、股関節周囲、首の円周、手首の円周、子牛周囲などの人体測定パラメーターの収集。 さらに、血圧パラメーター（収縮期および拡張期）と物理的フィットネスの状態は、次のフィールドテストを通じて記録されます：ハンドグリップ、シットアンドリーチテスト、シングルレッグスタンド、30 '' Sit To Stand、Ruffier Test、VO2 Max。

登録された被験者には、身体活動（加速、動きなど）と睡眠の質に関する客観的で信頼できる情報を提供する加速度計が与えられます。 それは募集日に与えられ、7日後に返されます。

プロジェクトの開始前に、提案された介入の成功を妨げる可能性のある側面をよりよく理解するために、被験者は追加のアンケートに記入します。

さらに、睡眠の品質とキネソフォビア、ピッツバーグ睡眠品質指数（PSQI）、キネオフォビア（TSK）のタンパスケールを評価するためのテストが完了します。 サルコペニアの分類では、短い物理パフォーマンスバッテリー（SPPB）テストが実施されます。 - ルーチン分析のための血液サンプリング。 以下は、サンプルで測定されます：完全な血球数、CRP、総タンパク質、セルロプラスミン、アルファ1抗トリプシン、グルコース、ヘモグロビンA1C（HBA1C）、尿素、クレアチニン、推定糸球体濾過率（EGFR）（EGFR）、合計および直接ビリルビン、ASTARTATE AMINOTRERINERINERSEREASE（アミノトランスフェラーゼ（ALT/GPT）、ガンマ - グルタミルトランスフェラーゼ（GGT）、ナトリウム、カリウム、カルシウム、リン、鉄、コレステロール、高密度リポタンパク質（HDL）、低密度リポタンパク質（LDL）、トリグリセリド、コルチゾール、C-ペプチド、ビタミン、ヴィタミンD、ヴィタミンD、ヴィタミンD、ヴィタミンD、ヴィタマインB12、副甲状腺ホルモン、甲状腺刺激ホルモン（TSH）、遊離トリオヨーロニン（FT3）、遊離サイロキシン（FT4）、インスリン様成長因子1（IGF-1）、高感度C反応性タンパク質（HSCRP）、B-Type Natriuretic Peptide（Hbnpide、Probediurety（HSCRP）） HCV;おそらく日常の血液化学分析の後に残っている血清アリコートは、その後の分析のためにバイオバンクに保存され、おそらく被験者の同意を得て、IRCCの「サヴェリオ・デ・ベリス」が活性化する他の研究に使用されます。

ジェノタイピング分析は、全血アリコートで実行され、日常の分析の後にも残っています。 匿名性は、登録時に患者に一意のコードを割り当てることにより保証されます。

- 自己完了アンケートの提供：食品アンケート（EPIC）、身体活動（IPAQ、長い形式）、および心理的健康を評価するためのアンケート：PSS-10（知覚されたストレススケール）、H.A.D.S。 （病院の不安とうつ病スケール）、TMI-I（記憶をテスト）。

V2（7日後）：

• 血液化学検査の収集;
• 便および尿サンプルの送達。 糞便カルプロテクチンとオカルト血液は便サンプルで測定されます。その後、スツールと尿のサンプルはバイオバンクに保存されます。 便サンプルは、腸内微生物叢と糞便メタボロームの評価に使用されます。 尿サンプルはメタボロミクス測定に使用されます。腸内微生物叢の評価のために、QIAAMP高DNAスツールミニキット（Qiagen、ヒルデン、ドイツ）を使用して、総細菌メタゲノムDNAを便サンプルから抽出します。 Microbiomeの特性評価は、DNAメタバルコードおよびショットガンMetatranscriptomicsアプローチを使用して実行されます。 DNAメタバルコード分析は、細菌用の16S rRNAのV5-V6過可視領域（Miseq-Illuminaプラットフォーム）を使用して実施されます。 DNAメタバルコード分析で重要なサンプルは、MetatranScriptomics分析（NextSeq 500-イルミナプラットフォーム）にかけられます。 MetagenomicsおよびMetatranscriptomicsデータは、バイオインフォマティクスパイプラインを使用して分析されます。

メタボロミクステストを実行するために、サンプルは揮発性有機化合物（VOC）について分析されます。これは、すぐに繊維をクラロス680（Perkin Elmer、BeaConsfield UK）の加熱噴射ポート（Perkin Elmer、BeaConsfield UK）の加熱注入ポート（220°C）に移し、RTX-WAXカラム（30 M×0.25 MM I.D.それぞれ250°Cと210°Cに維持されたソースとトランスファーラインの温度を備えたクラロスSQ8ms（Perkin Elmer）に結合されました。

• 加速度計のコレクション。
• 誤解やデータの欠落を避けるためのアンケートの配信とそれらの議論。