新生児の疼痛とストレスに対するスワドリングとネスティングの効果

本研究は、鼻CPAPを受ける新生児における包み込み（スワドリング）法とネスティング法の、痛みおよびストレスレベルへの影響を調査するために設計されました。 本研究は、ランダム化比較試験として計画されました。 研究対象集団は、都市病院の新生児集中治療室において鼻CPAP/非侵襲的機械換気を必要とする全ての新生児で構成されます。 本研究は、2つの介入群で構成されます。 一過性頻呼吸と診断され、在胎週数35週以上で生まれ、NICUにおいて鼻CPAP/非侵襲的機械換気器治療を受けており、かつ本研究の参加基準を満たす新生児の保護者から同意を得た後、合計100名の新生児患者（スワドリング群 = 50名、ネスティング群 = 50名）が研究に含まれます。 新生児にストレスを与える可能性のある環境条件（騒音、熱、照明など）は最適なレベルに保たれます。 nCPAP装着時には、乳児は仰臥位とされ、胸郭の動きと呼吸パターンをより良く観察できるようにします。 乳児の気道の開存性を確保するために、首枕を使用して軽度の頸部伸展位がとられます。 nCPAPを受ける新生児の呼吸苦痛、陽圧によるストレス、および鼻カニューレの鼻孔への圧迫による痛みは、2名の研究者によりALPS-Neo新生児痛み・ストレス評価尺度（ALPS-Neo）を用いて評価されます。 スワドリング群では、唾液サンプルはスワドリング法適用前（t1）、適用中（t2）、およびスワドリング法適用30分後（t3）に採取されます。 心拍数、呼吸数、酸素分圧値、痛みおよびストレスレベル（ALPS-Neo）は、2名の研究者により記録されます。 ネスティング群でも、唾液サンプルはネスティング法適用前（t1）、適用中（t2）、および包み込み法適用30分後（t3）に採取されます。 心拍数、呼吸数、酸素分圧値、痛みおよびストレスレベル（ALPS-Neo）は、2名の研究者により記録されます。 唾液サンプル採取プロセスは、内筒から綿ロールを取り出し、その一端を持って乳児の舌下または唾液を採取できる口角（2.5 cm）の下に約2分間保持し、綿が唾液で十分に飽和する（0.012-3.000 ug/dL）まで行います。 綿ロールは乾いた端を持ち、湿った部分を内筒に戻し、チューブキャップを閉め、採取された各サンプルには患者名が記載されたバーコードが貼り付けられます。 採取された唾液サンプルには番号が付けられ、新生児集中治療室の冷蔵庫で-20℃で保管されます。 同日中に、研究許可を得てコールドチェーン条件で研究実験室（KUYAM）に移送され、研究群のサンプルサイズが完了します。 ELISA研究時まで-80℃で保管されます。 唾液サンプル採取プロセスは、内筒から綿ロールを取り出し、その一端を持って乳児の舌下または唾液を採取できる口角（2.5 cm）の下に約2分間保持し、綿が唾液で十分に飽和する（0.012-3.000 ug/dL）まで行います。 ELISA研究全体は、キュタヒヤ健康科学大学研究実験室（KUYAM）で実施され、採取されたサンプルはELISA作業者に対して盲検化されます。 唾液サンプルは、抗体結合を妨げ結果に影響を与える可能性のあるムチンやその他の微粒子を除去するため、1000 gで2分間再度遠心分離されます。 全てのサンプルが室温に達したら、キットに含まれる96ウェルプレートの各ウェルに、標準液およびサンプルを25 µLずつピペットで分注します。 次に、マイクロピペットを用いて96ウェルプレートに200 µLのアッセイ希釈液を添加し、室温で500 rpm、1時間インキュベートします。 インキュベーション完了後、300 µLの洗浄バッファーで4回洗浄します。 洗浄完了後、サンプルおよび標準液を含む各ウェルに200 µLのTMB基質溶液を添加し、室温・暗所で500 rpm、25分間インキュベートします。 インキュベーションプロセス完了後、各ウェルに50 µLの反応停止溶液が添加されます。 この時点で、ウェル内の反応が緑色から黄色に変化することが観察され、全てのウェルが黄色に変化した後、波長450 nmで分光光度測定が行われます。 総濃度は、標準液およびサンプルの吸光度値から計算され、コルチゾールレベルはµg/dLで報告されます。