統合失調症の分子遺伝学的研究: 親子トリオ

1. 具体的な目的 我々は、DSM-IV 統合失調症の基準を満たす発端者を含む合計 150 家系のゲノム DNA とリンパ芽球細胞株を 3 年間で収集することを提案します。 両親（親子トリオ）および罹患していない兄弟を含む発端者の一親等血縁者、合計約3〜6人の被験者も研究に募集される。 分子遺伝学研究の適切な統計力は大きな懸念事項です。 この懸念に対して、私たちは、診断評価のために遺伝研究のための診断面接（DIGS）を使用し、注意力の持続、実行機能、言語記憶、および一般知能を含む神経心理学的バッテリーを使用して、発端者と家族を臨床的に検査します。

   このプロジェクトの具体的な目的は次のとおりです。(1) NHRI が提案したこの重要な台湾ジェノタイピング コンソーシアムに協力すること。 (2) 神経心理学的エンド表現型に関連する主要な統合失調症感受性遺伝子を検出する。 (3) 以前に収集した共罹患同胞対家族サンプルを使用して、以前の連鎖研究の結果を再現するために、示唆的な連鎖染色体領域でさらに詳細なマッピングを行う。 (4) 台湾の基礎研究のための国家リソースとして機能するNHRI細胞バンクにリンパ芽球細胞株を寄託する。

2. バックグラウンド

   1. 統合失調症の遺伝的根拠 ほとんどの家族研究で、統合失調症および関連疾患は家族性疾患であり、統合失調症患者の一親等親族のリスクは対照患者の親族のリスクの約10倍であることが確認されています。 双子の研究では、MZ 双生児ペアでは 46% ～ 53%、DZ 双生児ペアでは 14% ～ 15% の一致率が見出されています (Kendler KS 1983; Gottesman II 1993; Prescott and Gottesman II, 1993)。したがって、統合失調症の遺伝的要素についての強力な証拠が提供されます。 しかし、MZ 双生児の一致率は 100% には程遠く、このことは統合失調症の病因における環境要因の重要性も強調しています。 統合失調症の病因に対する遺伝的寄与の証拠は、養子縁組研究によってさらに裏付けられています。 統合失調症の養子縁組研究では、統合失調症の母親の実子が養親によって育てられた場合、対照の養子に比べて成人として統合失調症になる割合が高かったことが示されている。

   分離分析は、統合失調症を引き起こすために相加的に結合する多数の不特定の数の遺伝子座を仮定する多因子多遺伝子モデルが、単一の主要遺伝子座モデルよりも家族研究で観察された統合失調症のパターンによりよく適合することを示している。 エピスタシスに小さな影響を与えるいくつかの遺伝子が、統合失調症の遺伝的病因に関与している可能性があることが示唆されました。

   統合失調症の感受性遺伝子の位置は、分子遺伝学的手法を用いて現在も活発に研究されている。 このアプローチ方法には、連鎖分析、候補遺伝子関連研究、および位置候補遺伝子アプローチが含まれますが、特定の染色体領域に焦点を当てることになるアプリオリな仮説はありません。 したがって、ゲノム全体を体系的にスクリーニングする必要があります。 統合失調症のゲノムワイドスキャンがこの10年間にいくつか発表されており、染色体1q21-q22、1q31-q42、2p22-q21、4q24-q32、6p24-p22、6q16-q23、 8p24-p21、10p14-p13、13q14-q32、15q13-q14、22q11-q13。 しかし、染色体 1q21-q22、6p24-p22、8p21、13q32 など、ゲノム全体にわたる重要な連鎖の証拠があると報告されている染色体領域はほんのわずかです。

   候補遺伝子の研究では、過去 10 年間に一貫性のない結果が明らかになりました。 ドーパミン（D1、D2、D3、D4、D5）、セロトニン、r-アミノ酪酸、グルタミン酸受容体遺伝子などの神経伝達物質関連遺伝子は、関連研究と連鎖研究の両方を使用して研究されてきましたが、一貫した結果は得られませんでした。 ニューロン成長関連遺伝子、ホスホリパーゼ遺伝子、およびカリウムチャネル遺伝子 (hKCa3/KCNN3) が統合失調症と関連していることが報告されています。 統合失調症の病態生理学的メカニズムに関する仮説は、分子遺伝学的研究において有力な候補遺伝子アプローチを提供します。 ケースコントロールデザインを使用した候補遺伝子アプローチには、解決すべき 2 つの問題が存在します。 まず、表現型測定との関連性の重要性を評価する際の重要な問題は、タイプ I エラーの可能性です。 統合失調症では多くの遺伝子と表現型を評価できるため、事前確率が低く、複数の検査を行うため、有意水準を調整する必要があります。 第二に、症例と対照の間の異なる集団混合の影響により、タイプ I エラーが増大する可能性があります。連鎖平衡戦略を使用した位置候補遺伝子アプローチは、以前の連鎖結果に基づく候補遺伝子関連研究のアプローチによって引き起こされた上記 2 つの問題を解決して、相関関係を増加させる可能性があります。事前確率と内部対照として親子トリオを使用します。 このアプローチは、統合失調症のような複雑な疾患の感受性遺伝子を特定するための連鎖研究よりも強力です。 精密なマッピング連鎖の証拠、全ゲノム配列と一塩基多型 (SNP) マップ、および進歩したマイクロアレイ技術が利用できるため、このアプローチは統合失調症の感受性遺伝子の位置を特定するのにより効率的です。 最近、上記の戦略を使用した研究により、マイクロサテライト多型および染色体 6p21 の遺伝子 NOTCH4 遺伝子の SNP に対する統合失調症の重大な連鎖平衡異常の証拠が報告されました。

   連鎖平衡異常戦略を用いた位置候補遺伝子アプローチの可能性を考慮して、統合失調症のさらなる分子遺伝学的研究のサンプルとして統合失調症の親子トリオを収集することを提案します。 統合失調症の共罹患同胞ペアを使用した統合失調症の連鎖研究におけるこれまでおよび継続中の取り組みにより（予備結果を参照）、このサンプルはさらなる位置候補遺伝子研究に使用できます。

   3. 統合失調症における神経心理学的欠陥 神経心理学の分野では、統合失調症には中枢実行機能の障害の独特のパターンがあり、持続的な注意力と作業記憶は統合失調症においてかなり独特であり、前頭線条体の機能不全を示唆していることが示されています。 統合失調症の神経心理学的障害は、単一の個別の検査ではなく、さまざまな神経心理学的プロセスを利用した包括的な一連の検査によって最もよく証明されるということで、ほとんどの研究者が同意しており、現時点では、この障害は前頭・側頭・辺縁系回路の機能不全を強く示唆している。

   統合失調症における神経心理学的欠陥のうち、継続パフォーマンステスト（CPT）によって測定される視覚的持続的注意とウィスコンシンカードソーティングテスト（WCST）によって測定される実行機能がより徹底的に研究されました。 CPT の共通の特徴は、参加者は、一定の速度で提示される刺激のうち、事前に指定されたターゲットに応答しなければならないことです。 CPT の識別警戒タスクは、単一の刺激 (CPT-X、ターゲットとしての単一の文字または数字) または 2 つの連続した刺激 (CPT-AX、ターゲットとしての文字または数字の前に別の文字または数字が続く) で構成されます。 CPT の難易度は、刺激をぼかす (劣化した CPT) か、相対的なターゲット (CPT-同一ペア バージョンまたは CPT-IP) を使用することによってさらに上げることができます。 さまざまな CPT バージョンは、持続的注意のさまざまな要素を利用している可能性があります。より困難なものは安定した脆弱性指標であり、より単純なものは統合失調症における脆弱性指標を媒介している可能性があります。 CPT パフォーマンス指数と臨床症状の側面との関係を特に調査した研究の中で、最も一貫した結果の 1 つは、CPT 欠損が陰性症状と関連しているということです。 多くの研究では、CPT のパフォーマンスの低下が思考障害や混乱した症状と関連していることも判明しました。

   WCSTによって測定された実行機能欠損は、前頭前皮質の異常な機能を指しました。 WCST パフォーマンスの欠陥は、永続的な統合失調症の中核的な特徴であり、他の認知欠陥とは無関係に、長期的な障害を予測します。 機能的神経画像研究では、WCSTが背外側前頭前野を活性化し、ドーパミメティック薬が統合失調症患者のこの課題のパフォーマンスを向上させ、前頭前野の生理学的反応のシグナル対ノイズを強化することが判明した。

   これまでの研究では、持続的な注意力と実行機能の欠如が統合失調症に特有であり、統合失調症の病態生理学的プロセスに関連していることが確認されています。 この欠損は統合失調症の遺伝的リスクとも関連しており、統合失調症の遺伝子分析における内部表現型として機能する可能性があります。

   4. 統合失調症の分子遺伝学的研究における内表現型アプローチ 統合失調症の遺伝的解析能力の不足と遺伝的不均一性の問題を解決するために、疾患の特定の神経生物学的特徴を、より多くを反映する可能性のある追加の表現型として使用するという代替戦略が提唱されました。単一の遺伝子変化の影響とほぼ同じです。

   CPTによって測定された視覚持続的注意欠陥は、統合失調症に対する遺伝的感受性の潜在的な内部表現型であった。 CPT欠損は統合失調症患者だけでなく、精神病でないその親族にも存在した。 148 人の非精神病親族と 345 人の地域成人からのデータを使用すると、再発リスク比 λ は、非劣化 CPT では 15 より大きく、劣化した CPT では 30 より大きいことがわかりました。

   WCST によって測定される実行機能欠損は、統合失調症の遺伝子研究におけるエンドフェノタイプとしても機能する可能性があります。 WCST 欠損は、統合失調症患者とその健康な兄弟の両方に見られました。

   したがって、CPT欠損およびWCST欠損を統合失調症の内部表現型として使用すると、遺伝的リスクの貴重な尺度が得られ、遺伝子解析の能力が向上し、統合失調症の感受性遺伝子の同定に役立つ可能性があります。

   このエンド表現型戦略は、最近、統合失調症の神経生理学的欠損、P50 阻害の減少を染色体 15q13-14 の遺伝子座にマッピングすることに成功しました。 9 つの多重統合失調症家系における P50 阻害欠損のゲノムワイド連鎖解析により、染色体 15q14 遺伝子座で有意な lod スコア (Z = 5.30、 = 0) が見つかりました。 統合失調症の臨床診断が影響を受けた表現型として使用された場合、同じマーカーでの最大 lod スコアは統計的に有意ではありませんでした。 統合失調症の他の神経生物学的欠損である視線追跡機能障害は、最大多点 lod スコア 4.02 で染色体 6p23-21 にマッピングされています。 ここでも、統合失調症の臨床診断が影響を受けた表現型として使用されましたが、関連性の結果は有意ではありませんでした。

   要約すると、統合失調症の共罹患同胞ペアと統合失調症における神経心理学的欠損を用いた連鎖分析の予備研究により、明確に定義された神経心理学的エンドフェノタイプを持つ親子トリオの統合失調症患者を収集するこのプロジェクトは、統合失調症にとって重要なプロジェクトの1つであると考えられる。統合失調症の感受性遺伝子を調べています。

3. 予備調査

   1. 統合失調症を併発している同胞家族のコレクション1990 年以来、統合失調症を併発している兄弟の家族を収集することに自ら取り組んでいます。 診断評価の重要性と決定的な必要性を認識し、これらの発端者、共罹患同胞、および罹患していない同胞、さらに両親を、DSM-III-R の診断基準を使用した半構造化された精神科医の診断面接で評価しました。および/または DSM-IV。 さらに、精神病理学の進化理論モデルに基づいて、発達データも収集されました。 これらすべての臨床データと家系図データは、P.I. の後援の下、国立台湾大学医学部精神科の分子遺伝研究所 (DBMGL) のデータバンクに確立されました。 DBMGL では、連鎖分析に利用できる統合失調症を併発する同胞ペアの家族が合計で約 120 家族あります。 原則として、DNAサンプルは、家族の利用可能なすべての被験者、特に共罹患同胞、少なくとも1人の非罹患同胞および両親の末梢白血球から得た。 合計で約 1,000 の DNA サンプルが DBMGL にありました。 EBV-958 で形質転換されたリンパ芽球細胞の細胞株も樹立されました。 これらの研究対象者は全員、この研究について十分な情報を得ており、インフォームドコンセントが得られました。 この研究に参加したすべての家族は、定期的な会合と議論のために「ニューホープ・ファミリー・クラブ」に参加するよう招待された。 DNAサンプルを採取するために、詳細な臨床評価と定期的な追跡調査およびCPT、WCST、WAIS-R、WMSを含む包括的な神経心理学的評価を受けた約150人の統合失調症患者が募集された。 DNAサンプルを採取するために、約200人の正常な対照被験者も募集された。

      遺伝子研究に使用される機器は確立されています。 遺伝研究のための診断面接スケジュール (DIGS) と統合失調症面接スケジュール (SIS) は、台湾の被験者に役立つように翻訳および修正されました。 知覚異常尺度 (PAS) と統合失調型パーソナリティ質問票 (SPQ) は、統合失調症関連パーソナリティ障害に関するコミュニティ研究でも使用されました。 異文化への配慮が採用されました。

      統合失調症を併発している兄弟姉妹を持つ家族を収集する、米国NIMHの支援による台湾での5年間にわたる全国共同研究（台湾統合失調症連鎖研究、TSLS）が3年目で実施されている。 合計600世帯が集まります。 DNA サンプル、細胞株、DIGS、FIG の臨床データ、および神経心理学的検査データが収集されました。 DNAサンプルは世界中の研究チームに公開されることになる。

   2. 統合失調症の分子遺伝学的研究 私たちの統合失調症の分子遺伝学的研究は、国家科学会議の後援による分子遺伝学プロジェクト (1989 ～ 1992 年)、MPGRP の分子遺伝学的プロジェクト (1993 ～ 1998 年)、および分子遺伝学的プロジェクトの 3 つの連続したプロジェクトによって支援されました。 NHRI の後援による MPSS (1998-2001)。 この分子遺伝学プロジェクトの初期段階 (1989 ～ 1992 年) は、実験施設の設立と、共罹患している統合失調症の兄弟ペアの家族の収集に焦点を当てました。 この分子遺伝学プロジェクトの第 2 段階 (1993 ～ 1998 年) では家族の収集が継続され、その収集は共罹患双極性障害の同胞ペア、統合失調症の症例、および正常な対照を収集するために拡大されました。 私たちは、(CAG)n のアンドロゲン受容体遺伝子の多型が統合失調症と関連している可能性があることを発見しました。 この発見は、DeLisi らの発見を裏付けました。 連鎖解析と候補遺伝子関連の分子遺伝学的手法が推進され、P.I. のこの研究室は、 (博士。 Hw) 氏はこの分野でも強調するようになりました。 この研究室の結果は次の通りである: (1) DRD4 受容体遺伝子の (48 bp) リピートの多型は統合失調症と有意な関連性はなかった。 (2) DRD2 の単一変異は統合失調症と関連しないことが判明した (3) このプロジェクトのデータバンクのサンプルは、比較的大量のサンプルを必要とするポジショナルクローニングアプローチを使用した 3 つの国際共同研究に参加していた。 1 つは「統合失調症連携連携グループ」と題して Gill らによって組織され、もう 1 つはドイツのキール大学のモイゼス博士が主導し、3 つ目はロンドンのパウエル博士と共同で組織されています。 これらすべての結果により、染色体 6p、11q、13q、19q、および 22q にマーカーの可能性があることが明らかになりました。 これは、台湾の患者は、染色体 13q を除くこれらの領域に感受性遺伝子を持っている可能性があり、オリゴジェネティックモデルに適合する可能性があることを示唆しています。 (4) 染色体 13q に位置する 5-HT2 受容体遺伝子に関する関連研究は陰性であることが判明しました。 (5) 共罹患同胞ペアを用いた臨床疫学分析により、現実の組織化、組織化の崩壊、ネガティブな状態の 3 つの独立した症状クラスターの傾向が実証されました。 (6) 染色体 6p24-22 の遺伝子座との弱い連鎖の証拠。

      分子遺伝学的研究の第 3 段階 (1998 ～ 2001 年) では、引き続き、共罹患統合失調症同胞対家族の収集と、染色体 1q21 ～ q22、1q31 ～ q42、8p24 ～ p21、 15q13-q14、22q11-q14。 関連性の結果は、(1) 染色体 6p24 および 22q12 上の陰性症状の有無にかかわらず、統合失調症との関連性を示唆する証拠があった (2) GABAA 受容体 α1 (GABRA1) 、β1 (GABRB1) およびβ3 (GABAB3) サブユニット遺伝子と統合失調症との関連性の証拠はなかった(3) グルタミン酸 GluR5 および GluR6 受容体遺伝子と統合失調症との関連証拠なし (4) SCA1 遺伝子と統合失調症との関連証拠なし (5) 染色体 8p のマーカーと統合失調症との関連を示唆する証拠 (Hwu et al., 2001a) (6)染色体 1q31-42 のマーカーと統合失調症との弱い関連証拠 (7) 15q13-14 のマーカーと統合失調症との関連を示唆する証拠 (8) 染色体 1q21-22 の遺伝子座と統合失調症との中程度の関連証拠。 候補遺伝子アプローチにより以下の結果が明らかになった：（１）ドーパミンＤ４受容体（ＤＲＤ４）遺伝子多型と統合失調症の迅速な治療反応との関連の可能性（Liu et al., 2001d）。 (2) 細胞質ホスホリパーゼ A2 (c-PLA2) 遺伝子多型と統合失調症との間に関連性はない。

   3. 統合失調症における神経心理学的欠陥に関する研究 我々は、統合失調症の特性マーカーとして持続的注意力テスト（CPT）により持続的注意力の障害があることを発見した。 家族研究は、CPTによって測定される持続的な注意欠陥が統合失調症の脆弱性マーカーであることを示しています。 結果は次の通りである。(1) 統合失調症発端者の非精神病血縁者のかなりの割合(19-34%)がCPT欠損を有しており、これは発端者のCPT成績から予測できる。 (2) 統合失調型の性格特徴を持つ被験者は、特に統合失調症のマイナス要因と関連する CPT 欠損も示します。 (3) CPT 欠損は統合失調症患者に存在し、特に陰性で組織化されていない症状と関連しており、より困難な CPT バージョンを持つ患者には神経弛緩薬の治療が適していません。

   CPTの特異性は、精神病症状のある双極性患者のグループ（n=46）および精神病症状のない双極性患者のグループ（n=22）と対照的に、統合失調症患者のグループ（n=41）で研究されました。非精神性大うつ病性障害患者の割合（n=22）。 CPT欠損は統合失調症の安定した脆弱性指標であり、双極性障害の媒介脆弱性指標であり、大うつ病の状態依存性指標であることが判明した。 これらの結果は、CPT 欠損が統合失調症の有効な形質マーカーであることを示しています。

   これらすべての予備データは、PI とその同僚が親子トリオ家族の収集、DNA 抽出と細胞培養の実験室技術、神経心理学的評価を含むこのプロジェクトを実行できることを裏付けています。

4. 研究デザインと方法

   1. 対象者 国立台湾大学病院医療センターおよび関連精神病院である桃園精神医療センターから親子トリオの家族を集める準備をしています。 募集される発端者は台湾北部の住民である。 研究への募集前にインフォームドコンセントが得られます。 採用される一親等の親族は、両親と、罹患していない兄弟の少なくとも 1 人です。 発端者の診断は、DSM-IV 基準によって定義される統合失調症です。

   1. 臨床評価尺度 I. 遺伝研究のための診断面接 (DIGS) すべての被験者は、NIMH 人類遺伝学イニシアチブの Tsuang と Faraone によって作成された DIGS で個人的に面接を受けます。 DIGS は病気の経過を詳細に評価し、薬物乱用と気分症状を注意深く評価します。 これにより、統合失調症と物質関連精神病、統合失調感情障害、精神病性気分障害との鑑別診断が容易になります。 この詳細な評価は、誤陽性診断を防ぐのに役立ちます。

      さらに、DIGS は、身体化、大うつ病、躁状態/軽躁状態、気分変調/抑うつ性人格/気分亢進性人格、アルコール乱用障害、病的ギャンブル、および反社会性人格障害など、精神病理学の多くの領域について豊富な説明を提供します。 また、自己申告による人口統計データや病歴データも収集します。 評価は、全体的な評価スケールと陽性症状と陰性症状の評価スケールでも行われます。 統合失調症およびその他の第 II 軸クラスター A の性格特徴は、統合失調症用の構造化面接の修正版を使用して評価されます。

      II. 遺伝研究のための家族面接（FIG） 血統情報の追加情報源として、家族全員を対象にFIGが実施されます。 このインタビューは、親族の精神疾患の存在について情報提供者に体系的に質問します。 我々は、FIG を 3 つのステップで管理します。 まず、家系図の構造を作成し、情報提供者と検討します。 次に、家系内のすべての親族について精神医学的スクリーニングの質問が行われます。 次に、スクリーニング質問への回答に基づいて、一親等の親族、配偶者、またはその他の親族ごとに、5 つの症状チェックリスト (うつ病、躁状態、薬物乱用、精神病、妄想性/統合失調症/統合失調型パーソナリティ障害) のうち 1 つ以上が記入されます。情報提供者には知られている。

      DIGSとFIGSは中国語に翻訳されました。 信頼性と妥当性は予備研究で確立されています。

      Ⅲ． 診断手順 すべての診断は DSM-IV を使用して行われます。 これらの診断は、精神病患者の診断における臨床経験と研究経験を持つ2人の認定精神科医によって行われます。 発端者と親族の最終診断は、面接の内容、症例の概要、親族から提供された情報、各診断医による医療記録の完全な検討に基づいて行われます。 患者の診断のいずれかについて 2 人の診断者が同意しない場合は、3 人目の診断者がタイブレーカーとして使用されます。

      IV.インタビュアーのトレーニング トレーニング プログラムは、インタビュアーに次のことを認定します。(1) DIGS および Figure で使用される診断システムの実用的な知識を確立する。 (2) 構造化された診断手段の管理とスコアリングに関する専門知識を開発する。 (3) インフォームド・コンセントのプロセスと同意手順を厳守する必要性を十分に理解する。

      トレーニング プログラムは 2 つの段階に分かれています: (1) 正式な教育トレーニングと (2) 構造化された診断面接を使用した監督された経験。

      教育訓練は、訓練生が DIGS で使用される診断システムを読んで慣れることから始まります。 この最初の説明は、インタビューの対象となるすべての精神疾患の診断基準を検討する講義によって補足されます。 これらの講義で取り上げられる中心的な問題は次のとおりです。(1) 客観的な行動の記述に基づいて診断を確立することの重要性。 (2) 精神病性現象と感情的現象の両方を伴う症候群の注意深い描写と区別。 (3) 診断システム間の症候群の定義における主な違いの明確化。

      トレーニングの 2 番目のコンポーネントは、構造化された診断手段に焦点を当てます。 研修生はまず面接の構造に慣れます。 これは、研修生が面接官と被験者の役割を交互に演じる面接練習を行うことで促進されます。 これらの最初の面接は、管理上の問題領域を特定し、面接を臨床的に慎重に使用することを保証するために、上級精神科医の立ち会いのもとで行われます。

      トレーニング プログラムには、統合失調症のための修正構造化面接 (SIS) に関するモジュールも含まれています。 SIS トレーニングには、統合失調型パーソナリティ障害に関する文献のレビュー、器具のオリエンテーションとレビュー、研修生がライブ面接を観察して臨床評価を行う機会、およびスコア基準を明確にするための臨床評価のレビューとディスカッションが含まれます。 すべてのトレーニング コースは、事前調査で十分に確立されています。

   2. 神経心理学的評価

      統合失調症において提案されている神経心理学的欠損の複雑さを考慮して、患者の神経心理学的欠損の全体的なパターンを調査するために、脳プロセスの複数の側面を利用するテストバッテリーが選択されます。 バッテリーは、以下を測定するためのテストで構成されています。

      1. 持続的な注意力 (継続的パフォーマンス テスト (CPT)、低下していないテスト状況と低下したテスト状況の両方)
      2. 中央執行機能（ウィスコンシンカードソーティングテスト（WCST）、トレイルメイキングB）。
      3. 記憶機能 (Weschler Memory Scale - 第 3 版、WMS-III)。
      4. 一般的な知的成果 (ブロックのデザイン、絵の完成、情報、類似性、算術、桁のスパン、桁の記号の置換) をテストします。

      本研究で使用された神経心理学的検査と一連の検査の妥当性は、予備研究で十分に確立されています。 私たちは、発端者と採用された家族全員に神経心理学的検査をできる限り実施する準備をしています。 一連の神経心理学的検査はかなり時間がかかり、完了までに 3 ～ 4 時間かかると推定されています。 したがって、神経心理学的検査は複数のセッションに分けて実施され、2 日間で完了します。 心理学を専攻した修士号研究助手2名がすべてのテストを実施する。

   2. 実験室作業: このプロジェクトには 2 つの実験室作業があります。

   1. 血液サンプルの収集と DNA の抽出 すべての被験者から 20 ～ 30 ml の静脈血を紫色の上部と緑色の上部のバキュテナー チューブに採取します。 紫色のトップチューブ内の血液サンプルは DNA 抽出に使用されます。 改良塩析法を使用して DNA を抽出する準備をします。
   2. 細胞株のセットアップ 新たに収集されたすべての血液サンプルは、提案の要求に従ってNHRIの細胞バンクに寄託される細胞株の保存のためにリンパ球をリンパ芽球細胞に変換します。 当分子遺伝学研究室で確立されている細胞培養の詳細な手順は、分子遺伝学的研究の添付ファイルに記載されています。

   3. データ管理 私たちは、以前の研究 (台湾統合失調症連鎖研究、TSLS) ではコンピューター化された DIGS データベース ソフトウェアを、別の以前の研究 (統合失調症に対する多次元精神病理学的研究、MPSS) では神経心理学的データバンクをすでにセットアップしました。 このプロジェクトのすべての臨床データと神経心理学的データは、これらのデータバンクに組み込まれます。

   家系図データ、DNA データ、および細胞培養データは、以前に確立されたデータバンクである分子遺伝学的研究データバンク (BMGLD) に組み込まれます。 この BMGLD には 4 セットのデータが含まれます: (1) 家系図とジェノタイピング データ バンク。 これらのデータはキリル文字プログラムを使用して設定されます。 (2) DNA サンプルバンク。 (3) 臨床データおよびエンドフェノタイプバンク、および (4) 細胞株バンク。 このよく組織された BMGLD は、継続的な研究作業にとって非常に価値があります。

   データ入力手順は、進行中のプロジェクトで使用しているガイドラインに従います。 これらの手順は、データの精度を最大化することを目的としています。 データは二重入力され、元のファイルと検証ファイルが矛盾していないか比較されます。 すべてのデータセットは定期的にディスクにバックアップされます。 バックアップ データ セットと元のデータ セットは、施錠された別のオフィスに保管されます。

   このプロジェクトのデータセットは、RFA のガイドラインに従って他の研究者が利用できるようになります。 RFA が必要とするすべてのデータと、NHRI が細胞バンクに組み込みたい追加データをすべて含むデータセットを作成します。 これらのデータは、その後ジェノタイピングコンソーシアムのメンバーに配布されるために、NHRI によって指定されたデータ管理センターに送信されます。

5. 期待される成果 私たちは、このプロジェクトを通じて以下の目標を達成することを期待しています: (1) NHRI によって提案されたこの重要な台湾ジェノタイピング コンソーシアムと協力する、(2) 神経心理学的エンド表現型に関連する主要な統合失調症感受性遺伝子を検出する、(3)以前に収集した共罹患同胞ペア家族サンプルを使用して以前の連鎖研究結果を再現するために、示唆的な連鎖染色体領域でさらに詳細なマッピングを行い、(4) 基本的な情報の国家リソースとして機能する NHRI 細胞バンクにリンパ芽球細胞株を寄託します。台湾での研究。

6. 人間の被験者 これは遺伝子研究であり、募集されたすべての被験者は、研究に登録される前に署名されたインフォームドコンセントを提示します。 臨床面接および神経心理学的評価の過程において、潜在的な危険を伴う侵襲的な処置は行われません。 30ccの血液サンプル描かれることになる。 これは針を使用して行われるため、臨床現場では通常無視できる程度の痛みを感じることがあります。 これらの参加被験者は、研究手順中に不快感が発生するため安心します。

   この研究手順に参加した研究者は全員、十分な訓練を受けています。 これらの予期しない感情的または身体的反応が研究手順中に発生した場合、P.I.プロジェクトの内容を通知し、必要な措置を直ちに講じる必要があります。 これは遺伝研究であるため、研究手順において遺伝カウンセリングの問題が提起される可能性があります。 参加する研究者は、この研究に参加する前に、この遺伝カウンセリングのテーマについて教育を受けます。 特定の遺伝カウンセリングが必要なこれらの被験者またはその家族は、国立台湾大学病院の外来にある P.I. の特別クリニックに紹介されます。特別なケアのためのこのプロジェクトの。

7. 動物調査は関与していません。
8. 潜在的な危険性 臨床面接、神経心理学的評価、および採取された血液サンプルは非常に安全です。 しかし、この遺伝子研究は、特に遺伝性に関して、家族の感情的な反応を引き起こす可能性があります。 この場合、十分な訓練を受けた参加研究者が即座に保証と評価を提供します。 何か必要があると考えられる場合、これらの被験者はPIの特別クリニックに紹介されます。特別な精神科ケアのためのこのプロジェクトの。

採血の際、軽度の痛みや恐怖感を感じる場合があります。 このようなケースでもすぐに安心してご利用いただけます。 一般的に言えば、この研究手順は安全であり、潜在的な危険は最小限であり、何かが起こっても対処可能です。