Molecular Genetic Study of Schizofreni: Parent-Offspring Trios

1. Spesifikke mål Vi foreslår å samle genomisk DNA og lymfoblastcellelinjer fra totalt 150 familier med probander som oppfyller kriteriene for DSM-IV schizofreni i løpet av tre år. De første grads slektninger til probandene, inkludert foreldre (foreldre-avkom-trioer) og ikke-påvirkede søsken, totalt ca. 3 til 6 forsøkspersoner, vil også bli rekruttert i studien. Tilstrekkelig statistisk kraft til molekylærgenetiske studier er den store bekymringen. For denne bekymringen vil vi undersøke probands og familiemedlemmer klinisk ved å bruke Diagnostic Interview for Genetic Studies (DIGS) for diagnostisk vurdering, og bruke nevropsykologisk batteri inkludert opprettholde oppmerksomhet, eksekutiv funksjon, verbal hukommelse og generell intelligens.

   Disse spesifikke målene for dette prosjektet er: (1) å samarbeide med dette viktige Taiwan Genotyping Consortium foreslått av NHRI; (2) å påvise gener for følsomhet for store schizofreni som er relatert til den nevropsykologiske endofenotypen; (3) å gjøre ytterligere finkartlegging av suggestive koblingskromosomregioner for å gjenskape resultater fra tidligere koblingsstudier ved å bruke vår tidligere innsamlede co-affekterte søskenpar-familieprøve; og (4) å deponere lymfoblastcellelinjene i NHRI Cell Bank som tjener som en nasjonal ressurs for grunnforskning i Taiwan.

2. Bakgrunn

   1. Genetisk grunnlag for schizofreni De fleste familiestudier bekrefter at schizofreni og beslektede lidelser er en familiær lidelse, og at risikoen for førstegradsslektninger til schizofrene pasienter er omtrent ti ganger risikoen for slektninger til kontroller. Tvillingstudier har funnet konkordansrater fra 46%~53% for MZ tvillingpar, og fra 14%~15% for DZ tvillingpar (Kendler KS 1983; Gottesman II 1993; Prescott og Gottesman II, 1993); gir derfor sterke bevis for en arvelig komponent til schizofreni. Imidlertid er konkordansratene hos MZ-tvillinger langt fra 100%, noe som også understreker viktigheten av miljøfaktorer i etiologien til schizofreni. Bevisene for genetisk bidrag til etiologien til schizofreni støttes videre av adopsjonsstudier. Adopsjonsstudier av schizofreni har vist at når biologiske avkom av schizofrene mødre ble oppdratt av adoptivforeldre, viste de høyere forekomst av schizofreni som voksne sammenlignet med kontrolladopterte.

   Segregeringsanalyser indikerer at multifaktoriell polygen modell, som angir et stort, uspesifisert antall loci som skal kombineres additivt for å forårsake schizofreni, passer bedre til de observerte mønstrene for schizofreni i familiestudier enn en enkelt major locus-modell. Det ble antydet at flere gener med liten effekt i epistase kan være ansvarlige for genetisk etiologi av schizofreni.

   Plasseringen av følsomhetsgenet for schizofreni er fortsatt under aktivt søk ved hjelp av molekylærgenetiske metoder. Denne metoden for tilnærming inkluderte koblingsanalyse, studie av kandidatgenforeninger og posisjonskandidatgentilnærming, det er ingen a priori-hypotese som vil føre til at man fokuserer på en gitt kromosomregion. Dermed må hele genomet screenes systemisk. Noen få genomomfattende skanninger av schizofreni har blitt publisert i tiåret, og mange kromosomregioner viste suggestive bevis for kobling, inkludert kromosom 1q21-q22, 1q31-q42, 2p22-q21, 4q24-q32, 6p24-q, 6p24-q2, 8p24-p21, 10p14-p13, 13q14-q32, 15q13-q14, 22q11-q13. Imidlertid ble det noen gang rapportert om noen få kromosomregioner å ha signifikante koblingsbevis for hele genomet, inkludert kromosom 1q21-q22, 6p24-p22, 8p21 og 13q32.

   Studier av kandidatgener avslørte inkonsistente resultater det siste tiåret. Nevrotransmitterrelaterte gener, slik som dopamin (D1, D2, D3, D4, D5), serotonin-, r-aminosmørsyre- og glutamatreseptorgener hadde blitt studert ved bruk av både assosiasjons- og koblingsstudier og ingen konsistente resultater oppnådd. Nevronvekstrelaterte gener, fosfolipasegener og et kaliumkanalgen (hKCa3/KCNN3) er rapportert assosiasjon med schizofreni. Hypotesen om den patofysiologiske mekanismen til schizofreni gir den sannsynlige kandidatgentilnærmingen i den molekylærgenetiske studien. Det finnes to problemer som skal løses for kandidatgentilnærming ved bruk av case-control design. For det første er sannsynligheten for type I-feil et kritisk spørsmål ved vurdering av betydningen av assosiasjon til fenotypiske mål. Siden mange gener og fenotyper kan evalueres for schizofreni, må signifikansnivået justeres på grunn av lav forutsannsynlighet og flere tester. For det andre kan effektene av ulik populasjonsblanding mellom tilfeller og kontroller øke type I-feilene Posisjonell kandidatgentilnærming ved bruk av koblingsdysevektsstrategi kan løse de to ovennevnte problemene som er reist av tilnærmingen til kandidatgenassosiasjonsstudier basert på de tidligere koblingsresultatene for å øke forhåndssannsynlighet og bruk av foreldre-avkom-trioer som internkontroll. Denne tilnærmingen er kraftigere enn koblingsstudie for å lokalisere mottakelighetsgenene for kompleks lidelse som schizofreni. Med de fine kartleggingsbevisene, hele genomsekvensen og enkeltnukleotidpolymorfisme (SNP) kart, og den avanserte mikroarray-teknikken som er tilgjengelig, er denne tilnærmingen mer effektiv for å lokalisere mottakelighetsgenene til schizofreni. Nylig er det rapportert om en studie som bruker ovennevnte strategi, signifikant koblingsdysevektsbevis for schizofreni til en mikrosatellittpolymorfisme og en SNP av et gen, NOTCH4-gen, ved kromosom 6p21.

   Med tanke på potensialene til posisjonskandidat-gentilnærming ved bruk av koblingsdysevektsstrategier, foreslår vi å samle foreldre-avkom-trioer av schizofreni som prøven på ytterligere molekylærgenetisk studie av schizofreni. Med vår tidligere og pågående innsats i koblingsstudier av schizofreni ved bruk av ko-påvirkede søskenpar av schizofreni (se foreløpige resultater), kan denne prøven brukes til ytterligere posisjonelle kandidatgenstudier.

   3. Nevropsykologisk mangel ved schizofreni Innenfor nevropsykologi har schizofreni vist seg å ha et unikt mønster av svekkelser i sentral eksekutiv funksjon, vedvarende oppmerksomhet og arbeidsminne var ganske unikt ved schizofreni og tyder på frontostriatal dysfunksjon. De fleste forskere var enige om at nevropsykologiske svekkelser av schizofreni best ble demonstrert ved omfattende testbatterier som benyttet ulike nevropsykologiske prosesser, snarere enn enkeltstående, isolerte tester, og for tiden antydet svekkelsene sterkt dysfunksjon av frontal-temporal-limbisk kretsløp.

   Blant de nevropsykologiske mangler ved schizofreni, ble visuell vedvarende oppmerksomhet målt ved Continuous Performance Test (CPT) og eksekutiv funksjon målt ved Wisconsin Card Sorting Test (WCST) studert mer grundig. Fellestrekk ved CPT er at deltakerne må svare på forhåndsutpekte mål blant stimuli som presenteres med en rask fast hastighet. Diskrimineringsvåkenhetsoppgaven til CPT kan bestå av en enkelt stimulus (CPT-X, enkelt tegn eller tall som målet) eller to påfølgende stimuli (CPT-AX, et tegn eller tall foran et annet tegn eller tall som målet). Vanskelighetsgraden til CPT kan økes ytterligere ved å uskarpe stimuli (degradert CPT) eller ved å bruke et relativt mål (CPT-Identical Pairs Version eller CPT-IP). De forskjellige CPT-versjonene kan ta på ulike komponenter av vedvarende oppmerksomhet: de vanskeligere er stabile sårbarhetsindikatorer, mens de enklere kan formidle sårbarhetsindikatorer ved schizofreni. Blant studier som spesifikt undersøker sammenhengen mellom CPT-ytelsesindekser og kliniske symptomdimensjoner, er et av de mest konsistente funnene at CPT-underskudd er assosiert med negative symptomer. Mange studier fant også at dårligere ytelse på CPT var assosiert med tankeforstyrrelser eller uorganiserte symptomer.

   Eksekutiv funksjonsmangel målt ved WCST refererte til unormal funksjon av prefrontal cortex. Underskudd i WCST-ytelse er varige og kjernetrekk ved schizofreni, og forutsier langvarig funksjonshemming, uavhengig av andre kognitive mangler. Funksjonelle neuroimaging-studier har funnet at WCST aktiverer den dorsolaterale prefrontale cortex og at dopamimetika forbedrer ytelsen på denne oppgaven hos pasienter med schizofreni og forsterker signalet til støy fra den prefrontale fysiologiske responsen.

   Tidligere studier bekreftet at underskudd i vedvarende oppmerksomhet og eksekutiv funksjon er spesifikke for schizofreni og relatert til schizofrene patofysiologiske prosesser. Underskuddene har også vært assosiert med genetisk risiko for schizofreni og kan tjene som en endofenotype i genetisk analyse ved schizofreni.

   4. Endofenotype-tilnærming i molekylærgenetiske studier av schizofreni For å løse problemene med utilstrekkelig kraft til genetiske analyser og genetisk heterogenitet av schizofreni, ble en alternativ strategi tatt til orde for at bruken av en spesifikk nevrobiologisk karakteristikk av sykdommen som en ekstra fenotype som kan reflektere mer nær effekten av en enkelt genetisk endring.

   De visuelle vedvarende oppmerksomhetssviktene målt ved CPT var en potensiell endofenotype av den genetiske følsomheten for schizofreni. CPT-mangel var til stede ikke bare hos schizofrenipasienter, men også hos deres ikke-psykotiske slektninger. Ved å bruke data fra 148 ikke-psykotiske slektninger og 345 voksne i lokalsamfunnet fant man at risikoraten for tilbakefall λ var større enn 15 for ikke-degradert CPT og større enn 30 for degradert CPT.

   De eksekutive funksjonsmangelene målt ved WCST kan også tjene som en endofenotype i genetiske studier av schizofreni. WCST-underskudd presentert både hos schizofrene pasienter og deres friske søsken.

   Derfor vil bruk av CPT-mangel og WCST-mangel som endofenotyper av schizofreni gi et verdifullt mål på genetisk risiko, ville forbedre kraften til genetiske analyser og kan bidra til å identifisere mottakelighetsgener for schizofreni.

   Denne endofenotypestrategien har vært vellykket i kartlegging av et nevrofysiologisk underskudd av schizofreni, reduksjon av P50-hemming, til loki ved kromosom 15q13-14, nylig. Den genomomfattende koblingsanalysen av P50-hemmingsunderskuddet i ni multiplekse schizofrenifamilier fant en signifikant lod-score (Z = 5,30,  = 0) ved et loci-kromosom 15q14. Når den kliniske diagnosen schizofreni ble brukt som den berørte fenotypen, var den maksimale lod-skåren ved samme markør ikke statistisk signifikant. Det andre nevrobiologiske underskuddet, øyesporingsdysfunksjon av schizofreni, har blitt kartlagt til kromosom 6p23-21 med maksimal flerpunkts lod-score på 4,02. Igjen, mens den kliniske diagnosen schizofreni ble brukt som den berørte fenotypen, var koblingsresultatet ikke-signifikant.

   Oppsummert, med våre foreløpige studier i koblingsanalyser ved bruk av ko-påvirkede søskenpar av schizofreni og nevropsykologiske mangler ved schizofreni, anses dette prosjektet for å samle inn schizofrene av foreldre-avkom-trioer med veldefinerte nevropsykologiske endofenotyper for å være et avgjørende prosjekt for søker etter følsomhetsgenene til schizofreni.

3. Forstudier

   1. Samling av schizofreni-medpåvirkede Sibpairs-familien P.I. har selv vært engasjert i å samle den schizofreni-medpåvirkede søskenparfamilien siden 1990. Med bevisstheten om viktigheten og den kritiske nødvendigheten av diagnostisk vurdering, ble disse probandene, medpåvirkede søsken og tilgjengelige ikke-påvirkede søsken samt foreldrene vurdert med et semistrukturert diagnostisk intervju med psykiater ved bruk av diagnostiske kriterier for DSM-III-R og/eller DSM-IV. Dessuten, under den evolusjonsteoretiske modellen for psykopatologi, ble utviklingsdata også samlet inn. Alle disse kliniske dataene og slektstredataene ble etablert i databanken til det molekylærgenetiske laboratoriet (DBMGL) i Institutt for psykiatri, College of Medicine, National Taiwan University i regi av P.I. Totalt er det rundt 120 schizofreni-sampåvirkede søskenparfamilier tilgjengelig for koblingsanalyse i DBMGL. Som regel ble DNA-prøvene hentet fra de perifere hvite cellene til alle tilgjengelige forsøkspersoner i familien, spesielt de medpåvirkede søskene, minst en ikke-påvirket søsken og foreldrene. Totalt var det rundt 1000 DNA-prøver i DBMGL. Cellelinjer av EBV-958 transformerte lymfoblastceller ble også etablert. Alle disse studiepersonene var godt informert for denne studien og informert samtykke innhentet. Alle familier som deltok i denne studien ble invitert til å bli med i en "New-Hope Family Club" for periodisk møte og diskusjon. Rundt 150 schizofrenitilfeller som mottok detaljert klinisk vurdering og regelmessig oppfølging og omfattende nevropsykologisk vurdering, inkludert CPT, WCST, WAIS-R og WMS, ble rekruttert for å innhente DNA-prøver. Rundt 200 normale kontrollpersoner ble også rekruttert for å få DNA-prøver.

      Instrumentene som brukes i genetiske studier er etablert. Diagnostic Interview Schedule for Genetic Study (DIGS) og schizotypi-intervjuplanen (SIS) ble oversatt og modifisert for å være nyttig i Taiwan-fag. Perceptual aberration scale (PAS) og Schizotypal Personality Questionnaire (SPQ) ble også brukt i samfunnsstudier om schizofreni-relaterte personlighetsforstyrrelser. Det tverrkulturelle hensynet ble tatt i bruk.

      Et 5-årig landsomfattende samarbeidsarbeid i Taiwan (Taiwan Schizophrenia Linkage Study, TSLS), sponset av NIMH, U.S.A., for å samle inn familier med medpåvirkede søskenpar med schizofreni har pågått i de tredje årene. Totalt skal det samles inn 600 familier. DNA-prøver, cellelinjer og kliniske data fra DIGS, FIGS, samt nevropsykologiske testdata ble samlet inn. DNA-prøven vil være åpen for forskerteam over hele verden.

   2. Molekylærgenetiske studier av schizofreni Våre molekylærgenetiske studier av schizofreni ble støttet av tre påfølgende prosjekter: det molekylærgenetiske prosjektet sponset av National Science Council (1989-1992), det molekylærgenetiske prosjektet til MPGRP (1993-1998) og det molekylærgenetiske prosjektet av MPSS (1998-2001) sponset av NHRI. Den tidlige fasen (1989-1992) av dette molekylærgenetiske prosjektet fokuserte på etablering av laboratoriefasiliteter og innsamling av medpåvirkede schizofrene søskenparfamilier. Den andre fasen av dette molekylærgenetiske prosjektet (1993-1998) fortsatte innsamlingen av familier, og samlingen ble utvidet til å samle de medpåvirkede bipolare søskenparene, schizofrene tilfeller og normale kontroller. Vi fant at polymorfismen til androgenreseptorgenet til (CAG)n hadde en sannsynlig assosiasjon med schizofreni. Dette funnet støttet funnet til DeLisi et al. De molekylærgenetiske metodene for koblingsanalyse og kandidatgenassosiasjon ble fremmet, dette laboratoriet til P.I. (Dr. Hwu) flyttet for å understreke også på dette området. Resultatene fra dette laboratoriet var: (1) Polymorfismen til (48bp) gjentakelser i DRD4-reseptorgenet var ikke signifikant knyttet til schizofreni; (2) En enkelt mutasjon i DRD2 ble funnet å ikke være assosiert med schizofreni (3) Prøvene fra databanken til dette prosjektet hadde sluttet seg til tre internasjonale samarbeidsstudier ved bruk av posisjonell kloningstilnærming som trenger relativt store prøver. Den ene er organisert av Gill et al med tittelen "Schizophrenia Collaborative Linkage Group", en annen ble ledet av Dr. Moises ved Kiel University, Tyskland og den tredje er sammen med Dr. Powell i London. Alle disse resultatene avslørte mulige markører i kromosomene 6p, 11q, 13q, 19q og 22q. Dette antyder at taiwanske pasienter kan ha mulige følsomhetsgener i disse regionene, bortsett fra kromosom 13q, som passer til en oligogenetisk modell. (4) Assosiasjonsstudien på 5-HT2-reseptorgenet lokalisert på kromosom 13q ble funnet å være negativ; (5) Klinisk epidemiologisk analyse ved bruk av ko-påvirkede søskenpar demonstrerte tendensen til 3 uavhengige symptomklynger av virkelighetsdesorganisering, desorganisering og negativ tilstand. (6) Svak koblingsbevis til loci ved kromosom 6p24-22.

      Den tredje fasen av den molekylærgenetiske studien (1998-2001) fortsatte å fokusere på innsamling av co-affiserte schizofrene søskenparfamilier og koblingsanalyse på rapporterte antydende bevis på kromosomregioner, inkludert kromosom 1q21-q22, 1q31-q42, 21p, 8p. 15q13-q14, 22q11-q14. Koblingsresultatene var (1) antydende bevis på kobling for schizofreni med og uten de negative symptomene på kromosom 6p24 og 22q12 (2) ingen koblingsbevis for GABAA reseptor α1 (GABRA1) , β1 (GABRB1) og β3 (GABAB3) subenhetgen med schizophreni (3) ingen koblingsbevis for Glutamat GluR5- og GluR6-reseptorgen med schizofreni (4) ingen koblingsbevis for SCA1-gen med schizofreni (5) antydende koblingsbevis på markører for kromosom 8p med schizofreni (Hwu et al., 2001a) (6) svake koblingsbevis for markører for kromosom 1q31-42 med schizofreni (7) antydende koblingsbevis for markører på 15q13-14 med schizofreni (8) beskjedne koblingsbevis for schizofreni til loci på kromosom 1q21-22. Kandidatgentilnærmingen har avslørt følgende resultater: (1) mulig assosiasjon mellom dopamin D4-reseptor (DRD4) genpolymorfisme med rask behandlingsrespons av schizofreni (Liu et al., 2001d). (2) ingen assosiasjon mellom cytosolisk fosfolipase A2 (c-PLA2) genpolymorfisme og schizofreni.

   3. Studier av nevropsykologiske mangler ved schizofreni Vi fant svekket vedvarende oppmerksomhet ved kontinuerlig ytelsestest (CPT) som egenskapsmarkør for schizofreni. Familiestudier har indikert at vedvarende oppmerksomhetssvikt målt ved CPT er sårbarhetsmarkører for schizofreni. Resultatene er: (1) en betydelig andel av ikke-psykotiske slektninger til schizofreniprobander (19-34%) har CPT-underskudd, som kan forutsies ut fra deres probands CPT-ytelse; (2) personer med schizotypiske personlighetstrekk viser også CPT-underskudd, som spesifikt er assosiert med negative faktorer ved schizotypi; (3) CPT-mangel er tilstede hos schizofrene pasienter, er spesielt assosiert med negative og uorganiserte symptomer, og de med vanskeligere CPT-versjoner er ikke mottagelig for nevroleptisk behandling.

   Spesifisiteten til CPT ble studert i en gruppe schizofrenipasienter (n=41) i motsetning til gruppen bipolare pasienter med psykotiske symptomer (n=46) og gruppen bipolare pasienter uten psykotiske symptomer (n=22) og en gruppe av pasienter med ikke-psykotisk alvorlig depressiv lidelse (n=22). Det ble funnet at CPT-underskudd er stabile sårbare indikatorer for schizofreni, medierende sårbarhetsindikatorer for bipolar lidelse og tilstandsavhengig indikator for alvorlig depresjon. Disse resultatene viser at CPT-underskudd er gyldige trekkmarkører for schizofreni.

   Alle disse foreløpige dataene støtter at PI og hans medarbeidere er i stand til å utføre dette prosjektet, inkludert innsamling av foreldre-avkom-triofamilier, DNA-ekstraksjon og cellekulturlaboratorieteknikker, og den nevropsykologiske vurderingen.

4. Forskningsdesign og metoder

   1. Emner Vi forbereder oss på å samle foreldre-avkom triosfamilier fra Medical Center of National Taiwan University Hospital og de tilknyttede psykiatriske sykehusene, Taoyuan Psychiatric Center. Probandsakene som skal rekrutteres er innbyggerne i den nordlige delen av Taiwan. Informert samtykke vil innhentes før rekruttering til studier. De første slektningene som skal rekrutteres er foreldrene og minst ett av de upåvirkede søsknene. Diagnosen av probandtilfellene er schizofreni definert av DSM-IV-kriterier.

   1. Kliniske vurderingstiltak I. Diagnostisk intervju for genetiske studier (DIGS) Alle forsøkspersoner vil bli personlig intervjuet med DIGS, som ble opprettet av Tsuang og Faraone fra NIMH Human Genetics Initiative. DIGS gjør en detaljert vurdering av sykdomsforløpet, og gjør en nøye vurdering av rus- og humørsymptomer. Dette åpner for en lettere differensialdiagnose mellom schizofreni og rusrelaterte psykoser, schizoaffektive lidelser og psykotiske stemningslidelser. Denne detaljerte vurderingen bidrar til å beskytte mot falsk positiv diagnose.

      I tillegg gir DIGS en rik beskrivelse av mange domener innen psykopatologi: somatisering, alvorlig depresjon, mani/hypomani, dystymi/depressiv personlighet/hypertymisk personlighet, alkoholmisbruksforstyrrelser, patologisk gambling og antisosial personlighetsforstyrrelse. Den samler også inn selvrapporterte demografiske og medisinske historiedata. Det gjøres også vurderinger på den globale vurderingsskalaen og skalaene for vurdering av positive og negative symptomer. Schizotypiske og andre Axis II Cluster A-personlighetstrekk vurderes ved å bruke en modifisert versjon av Structured Interview for Schizotypy.

      II. Familieintervjuet for genetiske studier (FIGS) Som en ekstra kilde til stamtavleinformasjon, vil FIGS bli utført med alle medlemmer av familien. Dette intervjuet spør systematisk en informant om tilstedeværelsen av psykiatrisk sykdom hos pårørende. Vi administrerer figurene i tre trinn. Først tegnes strukturen i familiestamtavlen og gjennomgås med informanten. Deretter stilles psykiatriske screeningsspørsmål om alle pårørende i stamtavlen. Basert på svarene på screeningsspørsmålene fylles en eller flere av fem symptomsjekklister (depresjon, mani, rusmisbruk, psykose, paranoid / schizoid / schizotyp personlighetsforstyrrelse) ut for hver førstegrads slektning, ektefelle eller annen slektning. kjent for informanten.

      DIGS og FIGS ble oversatt til kinesisk. Reliabiliteten og validiteten er fastslått i våre forstudier.

      III. Diagnostikkprosedyren Alle diagnoser vil bli stilt ved hjelp av DSM-IV. Disse diagnosene vil bli stilt av to styresertifiserte psykiatere med klinisk og forskningserfaring i diagnostisering av psykotiske pasienter. Endelige diagnoser av probander og pårørende vil være basert på intervjuets innhold, saksvignett, opplysninger gitt av pårørende og fullstendig journalgjennomgang av hver diagnostiker. Dersom de to diagnostikerne er uenige om noen av pasientens diagnoser, vil en tredje diagnostiker bli brukt som tie-breaker.

      IV. Opplæring av intervjuere Opplæringsprogrammet vil sertifisere intervjuerne: (1) etablere en praktisk kunnskap om diagnosesystemene som brukes i DIGS og FIGS; (2) utvikle ekspertise i administrasjon og skåring av det strukturerte diagnostiske instrumentet; og (3) fullt ut forstå prosessen med informert samtykke og behovet for streng overholdelse av samtykkeprosedyrer.

      Opplæringsprogrammet er delt inn i to trinn: (1) formell didaktisk opplæring og (2) veiledet erfaring ved bruk av det strukturerte diagnostiske intervjuet.

      Den didaktiske opplæringen starter med at deltakerne leser og setter seg inn i diagnosesystemene DIGS bruker. Denne første eksponeringen er supplert med forelesninger som gjennomgår diagnostiske kriterier for alle psykiatriske lidelser som dekkes av intervjuet. Sentrale problemstillinger som tas opp i disse forelesningene er: (1) viktigheten av å etablere diagnoser på grunnlag av objektiv atferdsbeskrivelse; (2) nøye avgrensning og differensiering av syndromer som involverer både psykotiske og affektive fenomener; og (3) klargjøring av store forskjeller i syndromdefinisjon blant diagnostiske systemer.

      Den andre komponenten i opplæringen fokuserer på de strukturerte diagnostiske instrumentene. Traineer blir først kjent med strukturen i intervjuet. Dette legges til rette ved at traineer gjennomfører praksisintervjuer der de vekselvis spiller rollene som intervjuer og subjekt. Disse innledende intervjuene gjennomføres med en seniorpsykiater til stede for å identifisere problemområder i administrasjonen og for å sikre klinisk sensitiv bruk av intervjuet.

      Opplæringsprogrammet inkluderer også en modul om det modifiserte strukturerte intervjuet for schizotypi (SIS). SIS-opplæringen inkluderer en gjennomgang av litteraturen om schizotyp personlighetsforstyrrelse, en orientering og gjennomgang av instrumentet, en mulighet for deltakere til å observere og foreta kliniske vurderinger av et live-intervju, og en gjennomgang og diskusjon av kliniske vurderinger for å klargjøre poengkriterier. Alle kursene er godt etablert i våre forstudier.

   2. Nevropsykologiske evalueringer

      Tatt i betraktning kompleksiteten til de foreslåtte nevropsykologiske defektene ved schizofreni, er et testbatteri som benytter flere aspekter av cerebral prosess valgt for å utforske pasienters generelle mønster av nevropsykologiske mangler. Batteriet består av tester som skal måle:

      1. Vedvarende oppmerksomhet (Continuous Performance Test (CPT), både i ugraderte og degraderte testsituasjoner)
      2. Sentrale eksekutive funksjoner (Wisconsin Card Sorting Test (WCST); Trail-making B);
      3. Minnefunksjon (Weschler Memory Scale-tredje utgave, WMS-III).
      4. Test for generelle intellektuelle prestasjoner (blokkdesign; bildefullføring; informasjon; likhet; aritmetikk; sifferspenn; siffersymbolerstatning).

      Den nevropsykologiske testen brukt i denne studien og validiteten til testbatteriet er godt etablert i våre foreløpige studier. Vi forbereder oss på å administrere det nevropsykologiske testbatteriet til probandene og alle de rekrutterte familiemedlemmene som mulig. Det nevropsykologiske testbatteriet er ganske tidkrevende, anslått å ta 3 til 4 timer å fullføre. Derfor vil det nevropsykologiske testbatteriet administreres i delte økter, fullført på to dager. To mastergradsforskningsassistenter med hovedfag i psykologi vil utføre alle testene.

   2. Laboratoriearbeid: Dette prosjektet har to linjer med laboratoriearbeid

   1. Innsamling av blodprøver og ekstraksjon av DNA Tjue til tretti ml venøst ​​blod vil bli innhentet fra alle studieobjektene i lilla topp og grønne topp vacutainer-rør. Blodprøven i lilla topprør vil bli brukt til DNA-ekstraksjon. Vi forbereder å trekke ut DNA ved hjelp av en modifisert utsaltingsmetode.
   2. Cellelinjeoppsett Alle blodprøver som nylig er tatt vil få lymfocytten transformert til lymfoblastisk celle for bevaring av cellelinje som vil bli deponert i cellebanken til NHRI som forespurt. Detaljprosedyrene for cellekultur etablert i vårt molekylærgenetiske laboratorium er oppført som vedlagte filer molekylærgenetisk studie.

   3. Databehandling Vi har allerede satt opp den datastyrte DIGS-databaseprogramvaren i vår forrige studie (Taiwan Schizophrenia Linkage Study, TSLS) og nevropsykologisk databank i en annen tidligere studie (Multidimensional Psychopathological Study for Schizophrenia, MPSS). Alle kliniske og nevropsykologiske data i dette prosjektet vil bli innlemmet i disse databankene.

   Familiens stamtavledata, DNA-data og cellekulturdata vil bli innlemmet i vår tidligere etablerte databank: Bank of Molecular Genetic Laboratory Data (BMGLD). Denne BMGLD vil inkludere 4 sett med data: (1) familietre og genotypedatabank. Disse dataene er satt opp ved hjelp av det kyrilliske programmet; (2) DNA-prøvebank; (3) kliniske data og endofenotypebank og (4) cellelinjebank. Denne velorganiserte BMGLD vil være av stor verdi for kontinuerlig forskningsarbeid.

   Prosedyrene for dataregistrering vil følge retningslinjene som vi bruker for våre pågående prosjekter. Disse prosedyrene søker å maksimere nøyaktigheten til data. Dataene vil bli dobbeltinnført, og originalfilene og verifikasjonsfilene vil bli sammenlignet for avvik. Alle datasett vil bli sikkerhetskopiert til disk regelmessig. Sikkerhetskopien og originaldatasettene vil bli opprettholdt i forskjellige låste kontorer.

   Datasettene i dette prosjektet vil være tilgjengelige for andre etterforskere i henhold til retningslinjene til RFA. Vi vil lage et datasett som vil inkludere alle data som kreves av RFA og eventuelle tilleggsdata NHRI ønsker å innlemme i cellebanken. Disse dataene vil bli sendt til databehandlingssenteret utpekt av NHRI for senere distribusjon til medlemmet av genotypekonsortiet.

5. Forventede resultater Vi forventer gjennom dette prosjektet å oppnå følgende mål: (1) å samarbeide med dette viktige Taiwan Genotyping Consortium foreslått av NHRI, (2) for å oppdage store schizofreni-følsomhetsgener som er relatert til den nevropsykologiske endofenotypen, (3) til foreta ytterligere finkartlegging av suggestive koblingskromosomregioner for å gjenskape tidligere koblingsstudieresultater ved å bruke vår tidligere innsamlede co-affekterte søskenpar-familieprøve, og (4) for å deponere lymfoblastcellelinjene i NHRI Cell Bank som fungerer som en nasjonal ressurs for grunnleggende forskning i Taiwan.

6. Menneskelige forsøkspersoner Dette er en genetisk studie, alle forsøkspersoner som rekrutteres vil presentere sitt signerte informerte samtykke før de blir registrert for studiet. Det er ingen invasiv prosedyre med potensiell fare i prosessen med det kliniske intervjuet og de nevropsykologiske evalueringene. Blodprøver på 30 c.c. vil bli trukket. Dette gjøres med en nål, og dette kan forårsake en smertefull følelse som vanligvis er ubetydelig i kliniske omgivelser. Disse deltakende forsøkspersonene vil bli beroliget ettersom enhver ubehagsfølelse oppstår under studieprosedyrene.

   Alle forskere som deltok i denne studieprosedyren er alle godt trent. Hvis dette er en uventet følelsesmessig eller fysisk reaksjon som skjer under studieprosedyren, vil P.I. av prosjektet bør informeres og nødvendige tiltak vil bli iverksatt umiddelbart. Siden dette er en genetisk studie, kan det i studieprosedyren ha spørsmålet om genetisk veiledning tatt opp. De deltakende forskerne vil bli utdannet før de deltar i denne studien for dette emnet genetisk rådgivning. Disse forsøkspersonene eller deres familie som har behov for spesifikk genetisk rådgivning vil bli henvist til spesialklinikken, lokalisert i poliklinisk avdeling ved National Taiwan University Hospital, i P.I. av dette prosjektet for spesiell omsorg.

7. Dyreundersøkelse ikke involvert.
8. Potensielle farer Det kliniske intervjuet, de nevropsykologiske evalueringene og blodprøven som tas vil være svært trygge. Imidlertid kan denne genetiske studien provosere noen emosjonelle reaksjoner fra familien, spesielt når det gjelder den genetiske arvbarheten. I dette tilfellet vil de fremmøtte forskerne, godt trent, gi umiddelbar forsikring og vurdering. Hvis noe anses å være nødvendig, vil disse personene bli henvist til spesialklinikken til P.I. av dette prosjektet for spesialpsykiatrisk omsorg.

Prosedyren for blodprøvetaking kan skape mild grad av smertefull følelse eller frykt. Disse sakene vil bli beroliget umiddelbart. Generelt sett er denne studieprosedyren trygg og de potensielle farene er minimale og er håndterbare hvis noe skulle skje.