Molecular Genetic Study of Schizofreni: Parent-Offspring Trios

1. Specifika syften Vi föreslår att samla in genomiskt DNA och lymfoblastcellinjer från totalt 150 familjer med proband som uppfyller kriterierna för DSM-IV schizofreni inom tre år. De första gradens släktingar till probands, inklusive föräldrar (förälder-avkomma trios) och icke-drabbade syskon, totalt cirka 3 till 6 försökspersoner, kommer också att rekryteras i studien. Tillräcklig statistisk kraft för molekylärgenetiska studier är det stora bekymret. För denna oro kommer vi att undersöka probands och familjemedlemmar kliniskt genom att använda den diagnostiska intervjun för genetiska studier (DIGS) för diagnostisk bedömning och genom att använda neuropsykologiskt batteri inklusive upprätthålla uppmärksamhet, exekutiv funktion, verbalt minne och allmän intelligens.

   Dessa specifika mål med detta projekt är: (1) att samarbeta med detta viktiga Taiwan Genotyping Consortium som föreslagits av NHRI; (2) att detektera gener för större schizofrenikänslighet som är relaterade till den neuropsykologiska endofenotypen; (3) att göra ytterligare fin kartläggning av suggestiva kopplingskromosomregioner för att replikera tidigare kopplingsstudieresultat med hjälp av vårt tidigare insamlade sampåverkade sib-par familjeprov; och (4) att deponera lymfoblastcellinjerna i NHRI Cell Bank som fungerar som en nationell resurs för grundforskning i Taiwan.

2. Bakgrund

   1. Genetisk grund för schizofreni De flesta familjestudier bekräftar att schizofreni och relaterade störningar är en familjär störning och att risken för första gradens släktingar till schizofrena patienter är ungefär tio gånger så stor som risken för släktingar till kontroller. Tvillingstudier har hittat överensstämmelsefrekvenser från 46%~53% för MZ tvillingpar och från 14%~15% för DZ tvillingpar (Kendler KS 1983; Gottesman II 1993; Prescott och Gottesman II, 1993); ger därför starka bevis för en ärftlig komponent till schizofreni. Konkordansfrekvensen hos MZ-tvillingar är dock långt ifrån 100% , vilket också betonar vikten av miljöfaktorer i etiologin för schizofreni. Bevisen för genetiskt bidrag till etiologin av schizofreni stöds ytterligare av adoptionsstudier. Adoptionsstudier av schizofreni har visat att när biologiska avkommor till schizofrena mödrar fostrades av adoptivföräldrar, visade de högre frekvens av schizofreni som vuxna, jämfört med kontrolladopterade.

   Segregationsanalyser indikerar att multifaktoriell polygen modell, som anger ett stort, ospecificerat antal loci att kombinera additivt för att orsaka schizofreni, bättre passar de observerade mönstren av schizofreni i familjestudier än gör en enda större locus-modell. Det föreslogs att flera gener med liten effekt i epistas kan vara ansvariga för genetisk etiologi av schizofreni.

   Placeringen av mottaglighetsgenen för schizofreni är fortfarande under aktiv sökning med hjälp av molekylärgenetiska metoder. Detta sätt att tillvägagångssätt inkluderade länkanalys, studie av kandidatgenassociationer och positionskandidatgenansats, det finns ingen a priori-hypotes som skulle leda till att man fokuserar på en given kromosomregion. Alltså måste hela genomet screenas systemiskt. Ett fåtal genomomfattande skanningar av schizofreni har publicerats under decenniet och många kromosomregioner visade suggestiva bevis för koppling, inklusive kromosom 1q21-q22, 1q31-q42, 2p22-q21, 4q24-q32, 6p24-q2, 6p24-q2, 8p24-p21, 10p14-p13, 13q14-q32, 15q13-q14, 22q11-q13. Emellertid har endast ett fåtal kromosomregioner någonsin rapporterats ha genomomfattande signifikanta kopplingsbevis, inklusive kromosom 1q21-q22, 6p24-p22, 8p21 och 13q32.

   Studier av kandidatgener avslöjade inkonsekventa resultat under det senaste decenniet. Neurotransmittorrelaterade gener, såsom dopamin (D1, D2, D3, D4, D5), serotonin-, r-aminosmörsyra- och glutamatreceptorgener hade studerats med användning av både associations- och kopplingsstudier och inga konsekventa resultat erhölls. Neurontillväxtrelaterade gener, fosfolipasgener och en kaliumkanalgen (hKCa3/KCNN3) har rapporterats samband med schizofreni. Hypotesen om den patofysiologiska mekanismen för schizofreni tillhandahåller den troliga kandidatgenen i den molekylärgenetiska studien. Det finns två problem som ska lösas för kandidatgenmetoden med användning av fallkontrolldesign. För det första är en kritisk fråga vid bedömningen av betydelsen av samband med fenotypiska mått sannolikheten för typ I-fel. Eftersom många gener och fenotyper kan utvärderas för schizofreni, måste signifikansnivån justeras på grund av den låga förhandssannolikheten och multipla tester. För det andra kan effekterna av olika populationsblandningar mellan fall och kontroller öka typ I-felen Positionell kandidatgenstrategi som använder en strategi för länkdysequilibrium kan lösa de två ovanstående problemen som tagits upp av tillvägagångssättet med kandidatgenassociationsstudie baserat på tidigare länkningsresultat för att öka tidigare sannolikhet och använda förälder-avkomma trios som intern kontroll. Detta tillvägagångssätt är mer kraftfullt än kopplingsstudie för att lokalisera känslighetsgenerna för komplex sjukdom som schizofreni. Med de fina kartläggningsbevisen, hela genomsekvensen och kartan för enkel nukleotidpolymorfism (SNP) och den avancerade mikroarraytekniken som finns tillgänglig, är detta tillvägagångssätt mer effektivt för att lokalisera mottaglighetsgener för schizofreni. Nyligen har en studie som använder ovanstående strategi rapporterats signifikanta kopplingsdysequilibriumbevis för schizofreni till en mikrosatellitpolymorfism och en SNP av en gen, NOTCH4-genen, vid kromosom 6p21.

   Med tanke på potentialen för positionskandidatgentillvägagångssätt med användning av kopplingsdysequilibriumstrategier, föreslår vi att man samlar förälder-avkomma trios av schizofreni som provet av ytterligare molekylärgenetisk studie av schizofreni. Med våra tidigare och pågående ansträngningar i kopplingsstudier av schizofreni med hjälp av sampåverkade sib-par av schizofreni (se preliminära resultat), kan detta prov användas för ytterligare positionella kandidatgenstudier.

   3. Neuropsykologiskt underskott vid schizofreni Inom området neuropsykologi har schizofreni visat sig ha ett unikt mönster av försämringar i centrala exekutiva funktioner, ihållande uppmärksamhet och arbetsminne var ganska unika vid schizofreni och tyder på frontostriatal dysfunktion. De flesta forskare var överens om att neuropsykologiska försämringar av schizofreni bäst demonstrerades genom omfattande testbatterier som använde olika neuropsykologiska processer, snarare än enstaka, isolerade test, och för närvarande tyder försämringarna starkt på dysfunktion av frontal-temporal-limbisk krets.

   Bland de neuropsykologiska bristerna vid schizofreni studerades visuell ihållande uppmärksamhet mätt med Continuous Performance Test (CPT) och exekutiv funktion mätt med Wisconsin Card Sorting Test (WCST) mer ingående. Gemensamma drag för CPT är att deltagarna måste svara på förutbestämda mål bland stimuli som presenteras med en snabb fast hastighet. Diskrimineringsuppgiften för CPT:n kan bestå av en enda stimulans (CPT-X, enstaka tecken eller nummer som målet) eller två på varandra följande stimuli (CPT-AX, ett tecken eller nummer som föregås av ett annat tecken eller nummer som målet). Svårighetsgraden för CPT kan höjas ytterligare genom att suddra stimuli (försämrad CPT) eller använda ett relativt mål (CPT-Identical Pairs Version eller CPT-IP). De olika CPT-versionerna kan utnyttja olika komponenter av ihållande uppmärksamhet: de svårare är stabila sårbarhetsindikatorer, medan de enklare kan förmedla sårbarhetsindikatorer vid schizofreni. Bland studier som specifikt undersöker sambanden mellan CPT-prestandaindex och kliniska symtomdimensioner, är ett av de mest konsekventa fynden att CPT-brister är associerade med negativa symtom. Många studier fann också att sämre prestanda på CPT var associerade med tankestörning eller oorganiserade symtom.

   Exekutiva funktionsdefekter mätt med WCST hänvisade till onormal funktion av prefrontal cortex. Brister i WCST-prestanda är bestående och centrala egenskaper hos schizofreni och förutsäger långvarig funktionsnedsättning, oberoende av andra kognitiva brister. Funktionella neuroimagingstudier har funnit att WCST aktiverar den dorsolaterala prefrontala cortexen och att de dopamimetiska läkemedlen förbättrar prestandan på denna uppgift hos patienter med schizofreni och förstärker signalen till brus från det prefrontala fysiologiska svaret.

   Tidigare studier bekräftade att brister i ihållande uppmärksamhet och exekutiva funktioner är specifika för schizofreni och relaterade till schizofren patofysiologisk process. Underskotten har också associerats med genetisk risk för schizofreni och kan fungera som en endofenotyp vid genetisk analys vid schizofreni.

   4. Endofenotyp tillvägagångssätt i molekylärgenetiska studier av schizofreni För att lösa problemen med otillräcklig kraft i genetiska analyser och genetisk heterogenitet av schizofreni, förespråkades en alternativ strategi att användningen av en specifik neurobiologisk egenskap hos sjukdomen som en ytterligare fenotyp som kan återspegla mer nära effekten av en enda genetisk förändring.

   De visuella ihållande uppmärksamhetsbristerna mätt med CPT var en potentiell endofenotyp av den genetiska känsligheten för schizofreni. CPT-brist förekom inte bara hos schizofrenipatienter utan även hos deras icke-psykotiska släktingar. Genom att använda data från 148 icke-psykotiska släktingar och 345 vuxna i samhället fann man att risken för återfall λ var större än 15 för odegraderad CPT och större än 30 för degraderad CPT.

   De verkställande funktionsbristerna mätt med WCST kan också fungera som en endofenotyp i genetiska studier av schizofreni. WCST-underskott presenteras både hos schizofrena patienter och deras friska syskon.

   Att använda CPT-brister och WCST-brister som endofenotyper av schizofreni skulle således ge ett värdefullt mått på genetisk risk, skulle förbättra kraften hos genetiska analyser och kan hjälpa till att identifiera känslighetsgener för schizofreni.

   Denna endofenotypstrategi har varit framgångsrik vid kartläggning av ett neurofysiologiskt underskott av schizofreni, minskning av P50-hämning, till loci vid kromosom 15q13-14, nyligen. Den genomomfattande kopplingsanalysen av P50-hämningsunderskottet i nio multiplex schizofrenifamiljer fann en signifikant lod-poäng (Z = 5,30,  = 0) vid en loci-kromosom 15q14. När den kliniska diagnosen schizofreni användes som den drabbade fenotypen, var den maximala lod-poängen vid samma markör inte statistiskt signifikant. Den andra neurobiologiska bristen, eye tracking-dysfunktion av schizofreni, har kartlagts till kromosom 6p23-21 med den maximala flerpunktslod-poängen på 4,02. Återigen, medan den kliniska diagnosen schizofreni användes som den drabbade fenotypen, var kopplingsresultatet icke-signifikant.

   Sammanfattningsvis, med våra preliminära studier i kopplingsanalyser med hjälp av sampåverkade syskonpar av schizofreni och neuropsykologiska defekter vid schizofreni, anses detta projekt för att samla in schizofreni från förälder-avkomma trios med väldefinierade neuropsykologiska endofenotyper vara ett avgörande projekt för söka efter känslighetsgener för schizofreni.

3. Förstudier

   1. Samling av schizofreni-medpåverkade Sibpairs-familjen P.I. har själv varit engagerad i att samla in den schizofreni-samdrabbade syskonfamiljen sedan 1990. Med medvetenhet om vikten och den kritiska nödvändigheten av diagnostisk bedömning, utvärderades dessa proband, sampåverkade syskon och tillgängliga icke-påverkade syskon samt föräldrarna med en semistrukturerad psykiaterdiagnostisk intervju med diagnostiska kriterier för DSM-III-R och/eller DSM-IV. Dessutom, under den evolutionsteoretiska modellen för psykopatologi, samlades också utvecklingsdata in. Alla dessa kliniska data och släktträdsdata etablerades i databanken för det molekylärgenetiska laboratoriet (DBMGL) vid Institutionen för psykiatri, College of Medicine, National Taiwan University under överinseende av P.I. Totalt finns det cirka 120 schizofreni-sampåverkade sib-par-familjer tillgängliga för länkanalys i DBMGL. Som regel erhölls DNA-proverna från de perifera vita blodkropparna från alla tillgängliga försökspersoner i familjen, särskilt de sampåverkade syskonen, minst ett icke-påverkat syskon och föräldrarna. Totalt fanns omkring 1 000 DNA-prover i DBMGL. Cellinjer av EBV-958-transformerade lymfoblastceller etablerades också. Alla dessa försökspersoner var välinformerade för denna studie och informerat samtycke erhölls. Alla familjer som deltog i denna studie bjöds in att gå med i en "New-Hope Family Club" för regelbundna möten och diskussioner. Omkring 150 schizofrenifall som fick detaljerad klinisk bedömning och regelbunden uppföljning och omfattande neuropsykologisk bedömning, inklusive CPT, WCST, WAIS-R och WMS, rekryterades för att ta DNA-prov. Omkring 200 normala kontrollpersoner rekryterades också för att ta DNA-prover.

      De instrument som används i genetiska studier har etablerats. Det diagnostiska intervjuschemat för genetiska studier (DIGS) och schizotypiintervjuschemat (SIS) översattes och modifierades för att vara användbara i Taiwan-ämnen. Perceptual aberration scale (PAS) och Schizotypal personality questionnaire (SPQ) användes också i samhällsstudier om schizofrenirelaterade personlighetsstörningar. Den tvärkulturella hänsynen användes.

      Ett 5-årigt rikstäckande samarbete i Taiwan (Taiwan Schizophrenia Linkage Study, TSLS), sponsrat av NIMH, U.S.A., för att samla in familjer med samtidigt drabbade syskonpar med schizofreni har pågått under de tredje åren. Totalt kommer 600 familjer att samlas in. DNA-prover, cellinjer och kliniska data från DIGS, FIGS, såväl som neuropsykologiska testdata samlades in. DNA-provet skulle vara öppet för forskarlag över hela världen.

   2. Molekylärgenetiska studier av schizofreni Våra molekylärgenetiska studier av schizofreni stöddes av tre på varandra följande projekt: det molekylärgenetiska projektet sponsrat av National Science Council (1989-1992), det molekylärgenetiska projektet av MPGRP (1993-1998) och det molekylärgenetiska projektet av MPSS (1998-2001) sponsrad av NHRI. Den tidiga fasen (1989-1992) av detta molekylärgenetiska projekt fokuserade på etablering av laboratorieanläggningar och insamling av samdrabbade schizofrena sib-par familjer. Den andra fasen av detta molekylärgenetiska projekt (1993-1998) fortsatte insamlingen av familjer, och samlingen utökades till att samla in de bipolära syskonparen, schizofrena fall och normala kontroller. Vi fann att polymorfismen av androgenreceptorgenen för (CAG)n hade ett troligt samband med schizofreni. Detta fynd stödde upptäckten av DeLisi et al. De molekylärgenetiska metoderna för länkanalys och kandidatgenassociation främjades, detta laboratorium av P.I. (Dr. Hwu) flyttade för att betona även på detta område. Resultaten av detta laboratorium var: (1) Polymorfismen av (48bp) upprepningar i DRD4-receptorgenen var inte signifikant kopplad till schizofreni; (2) En enskild mutation i DRD2 visade sig inte vara associerad med schizofreni (3) Proverna i databanken för detta projekt hade anslutit sig till tre internationella samarbetsstudier med användning av positionell kloningsmetod som kräver relativt stort urval. Den ena är organiserad av Gill et al med titeln "Schizophrenia Collaborative Linkage Group", en annan leddes av Dr. Moises vid Kiel University, Tyskland och den tredje är med Dr. Powell i London. Alla dessa resultat avslöjade möjliga markörer i kromosomerna 6p, 11q, 13q, 19q och 22q. Detta tyder på att taiwanesiska patienter kan ha möjliga känslighetsgener i dessa regioner, förutom kromosom 13q, som passar en oligogenetisk modell. (4) Associationsstudien på 5-HT2-receptorgenen lokaliserad på kromosom 13q visade sig vara negativ; (5) Klinisk epidemiologisk analys med hjälp av sampåverkade syskonpar visade tendensen hos 3 oberoende symtomkluster av verklighetsdesorganisation, desorganisering och negativt tillstånd. (6) Svag kopplingsbevis till loci vid kromosom 6p24-22.

      Den 3:e fasen av den molekylärgenetiska studien (1998-2001) fortsatte att fokusera på att samla in sampåverkade schizofrena sib-pair-familjer och kopplingsanalys på rapporterade suggestiva tecken på kromosomregioner, inklusive kromosom 1q21-q22, 1q31-q42, 21p, 8p. 15q13-q14, 22q11-q14. Kopplingsresultaten var (1) tydande bevis på koppling för schizofreni med och utan de negativa symtomen på kromosom 6p24 och 22q12 (2) inga kopplingsbevis för GABAA-receptorn α1 (GABRA1), β1 (GABRB1) och β3 (GABAB3) subenhetsgenen med schizop (3) inga kopplingsbevis för glutamat GluR5- och GluR6-receptorgenen med schizofreni (4) inga kopplingsbevis för SCA1-genen med schizofreni (5) suggestiva kopplingsbevis på markörer för kromosom 8p med schizofreni (Hwu et al., 2001a) (6) svaga kopplingsbevis för markörer för kromosom 1q31-42 med schizofreni (7) suggestiva kopplingsbevis för markörer på 15q13-14 med schizofreni (8) blygsamma kopplingsbevis för schizofreni till loci vid kromosom 1q21-22. Kandidatgenansatsen har avslöjat följande resultat: (1) möjlig association mellan dopamin D4-receptor (DRD4) genpolymorfism med snabb behandlingsrespons av schizofreni (Liu et al., 2001d). (2) inget samband mellan cytosoliskt fosfolipas A2 (c-PLA2) genpolymorfism och schizofreni.

   3. Studier av neuropsykologiska brister vid schizofreni Vi fann nedsatt ihållande uppmärksamhet genom kontinuerligt prestationstest (CPT) som egenskapsmarkör för schizofreni. Familjestudier har visat att ihållande uppmärksamhetsbrist mätt med CPT är sårbarhetsmarkörer för schizofreni. Resultaten är: (1) en betydande andel av icke-psykotiska släktingar till schizofreniproband (19-34%) har CPT-underskott, vilket kan förutsägas utifrån deras probands CPT-prestanda; (2) försökspersoner med schizotypa personlighetsdrag uppvisar också CPT-brist, som är specifikt associerade med negativa faktorer av schizotypi; (3) CPT-brister finns hos schizofrena patienter, är särskilt förknippade med negativa och oorganiserade symtom, och de med svårare CPT-versioner är inte mottagliga för neuroleptisk behandling.

   Specificiteten av CPT studerades i en grupp schizofrenipatienter (n=41) till skillnad från gruppen bipolära patienter med psykotiska symtom (n=46) och gruppen bipolära patienter utan psykotiska symtom (n=22) och en grupp av patienter med icke-psykotisk egentlig depression (n=22). Det visade sig att CPT-underskott är stabila sårbara indikatorer på schizofreni, förmedlande sårbarhetsindikatorer för bipolär sjukdom och tillståndsberoende indikator för allvarlig depression. Dessa resultat visar att CPT-brist är giltig markör för schizofreni.

   Alla dessa preliminära data stödjer att PI och hans medarbetare är kapabla att utföra detta projekt, inklusive insamling av förälder-avkomma triosfamiljer, DNA-extraktion och cellodlingslaboratorietekniker och den neuropsykologiska bedömningen.

4. Forskningsdesign och metoder

   1. Ämnen Vi förbereder oss för att samla förälder-avkomma triosfamiljer från Medical Center of National Taiwan University Hospital och de anslutna psykiatriska sjukhusen, Taoyuan Psychiatric Center. De proband-fall som ska rekryteras är invånarna i den norra delen av Taiwan. Informerat samtycke kommer att erhållas före rekryteringen för studier. De första gradens släktingar som ska rekryteras är föräldrarna och minst ett av de opåverkade syskonen. Diagnosen av probandfallen är schizofreni definierad av DSM-IV-kriterier.

   1. Kliniska bedömningsåtgärder I. Den diagnostiska intervjun för genetiska studier (DIGS) Alla ämnen kommer att personligen intervjuas med DIGS, som skapades av Tsuang och Faraone från NIMH Human Genetics Initiative. DIGS gör en detaljerad bedömning av sjukdomsförloppet och gör en noggrann bedömning av missbruk och humörsymtom. Detta möjliggör en lättare differentialdiagnos mellan schizofreni och substansrelaterade psykoser, schizoaffektiva störningar och psykotiska humörstörningar. Denna detaljerade bedömning hjälper till att skydda mot falsk positiv diagnos.

      Dessutom ger DIGS en rik beskrivning av många domäner av psykopatologi: somatisering, egentlig depression, mani/hypomani, dystymi/depressiv personlighet/hypertymisk personlighet, alkoholmissbruksstörningar, patologiskt spelande och antisocial personlighetsstörning. Den samlar också in självrapporterad demografisk och medicinsk historia. Betyg görs också på den globala bedömningsskalan och skalorna för bedömning av positiva och negativa symtom. Schizotypa och andra Axis II Cluster A-personlighetsegenskaper bedöms genom att använda en modifierad version av den strukturerade intervjun för schizotypi.

      II. Familjeintervjun för genetiska studier (FIGS) Som en ytterligare källa till stamtavlainformation kommer FIGS att genomföras med alla familjemedlemmar. Denna intervju ifrågasätter systematiskt en informant om förekomsten av psykiatrisk ohälsa hos anhöriga. Vi administrerar figurerna i tre steg. Först ritas strukturen på familjens stamtavla och gås igenom med informanten. Därefter ställs psykiatriska screeningfrågor om alla anhöriga i antavlan. Baserat på svaren på screeningfrågorna fylls sedan i en eller flera av fem symtomchecklistor (depression, mani, missbruk, psykos, paranoid /schizoid/schizotyp personlighetsstörning) för varje första gradens släkting, make eller annan släkting. känd för uppgiftslämnaren.

      DIGS och FIGS översattes till kinesiska. Reliabiliteten och validiteten har fastställts i våra förstudier.

      III. Diagnostikproceduren Alla diagnoser kommer att göras med DSM-IV. Dessa diagnoser kommer att ställas av två styrelsecertifierade psykiatriker med klinisk och forskningserfarenhet av diagnostik av psykotiska patienter. Slutliga diagnoser av proband och anhöriga kommer att baseras på intervjuns innehåll, fallvinjetten, information lämnad av anhöriga och en fullständig genomgång av journalen av respektive diagnostiker. Om de två diagnostikerna är oense om någon av patientens diagnoser, kommer en tredje diagnostiker att användas som tie-breaker.

      IV. Utbildning av intervjuare Utbildningsprogrammet kommer att certifiera intervjuarna: (1) etablera en praktisk kunskap om de diagnostiska systemen som används i DIGS och FIG; (2) utveckla expertis inom administration och poängsättning av det strukturerade diagnostiska instrumentet; och (3) till fullo förstå processen för informerat samtycke och behovet av strikt efterlevnad av samtyckesprocedurer.

      Utbildningsprogrammet är uppdelat i två steg: (1) formell didaktisk utbildning och (2) handled erfarenhet av den strukturerade diagnostiska intervjun.

      Den didaktiska utbildningen börjar med att praktikanter läser och bekantar sig med de diagnossystem som används av DIGS. Denna initiala exponering kompletteras med föreläsningar som går igenom diagnostiska kriterier för alla psykiatriska störningar som omfattas av intervjun. Centrala frågor som tas upp i dessa föreläsningar är: (1) vikten av att fastställa diagnoser utifrån objektiv beteendebeskrivning; (2) noggrann avgränsning och differentiering av syndrom som involverar både psykotiska och affektiva fenomen; och (3) klargörande av stora skillnader i syndromdefinition mellan diagnostiska system.

      Den andra komponenten i utbildningen fokuserar på de strukturerade diagnostiska instrumenten. Praktikanterna blir först bekanta med strukturen på intervjun. Detta underlättas genom att praktikanter genomför praktikintervjuer där de växelvis spelar rollen som intervjuare och subjekt. Dessa inledande intervjuer genomförs med en närvarande senior psykiater för att identifiera problemområden inom administrationen och för att säkerställa kliniskt känslig användning av intervjun.

      Utbildningsprogrammet innehåller också en modul om den modifierade strukturerade intervjun för schizotypi (SIS). SIS-utbildningen inkluderar en genomgång av litteraturen om schizotyp personlighetsstörning, en orientering och granskning av instrumentet, en möjlighet för praktikanter att observera och göra kliniska betyg av en liveintervju samt en genomgång och diskussion av kliniska betyg för att klargöra poängkriterier. Alla utbildningar är väl förankrade i våra förstudier.

   2. Neuropsykologiska utvärderingar

      Med tanke på komplexiteten hos de föreslagna neuropsykologiska bristerna vid schizofreni, väljs ett testbatteri som utnyttjar flera aspekter av cerebral process för att utforska patienternas övergripande mönster av neuropsykologiska brister. Batteriet består av tester som ska mäta:

      1. Ihållande uppmärksamhet (Continuous Performance Test (CPT), både i odegraderade och försämrade testsituationer)
      2. Centrala verkställande funktioner (Wisconsin Card Sorting Test (WCST); Trail-making B);
      3. Minnesfunktion (Weschler Memory Scale-tredje upplagan, WMS-III).
      4. Testa för allmänna intellektuella prestationer (blockdesign; bildkomplettering; information; likhet; aritmetik; sifferspan; siffersymbolersättning).

      Det neuropsykologiska testet som används i denna studie och testbatteriets validitet har varit väl etablerade i våra preliminära studier. Vi förbereder oss för att administrera det neuropsykologiska testbatteriet till probanden och alla rekryterade familjemedlemmar som möjligt. Det neuropsykologiska testbatteriet är ganska tidskrävande, beräknas ta 3 till 4 timmar att slutföra. Det neuropsykologiska testbatteriet kommer därför att administreras i delade sessioner, avslutade på två dagar. Två masterexamen forskarassistenter med huvudämne i psykologi kommer att utföra alla tester.

   2. Laboratoriearbete: Detta projekt har två rader av laboratoriearbete

   1. Insamling av blodprover och extraktion av DNA Tjugo till trettio ml venöst blod kommer att erhållas från alla försökspersoner i lila topp- och gröna toppvakutainerrör. Blodprovet i lila topprör kommer att användas för DNA-extraktion. Vi förbereder oss för att extrahera DNA:t med en modifierad utsaltningsmetod.
   2. Celllinjeuppsättning Alla blodprover som nyligen tagits kommer att få lymfocyten omvandlad till lymfoblastisk cell för bevarande av cellinje som kommer att deponeras i NHRI:s cellbank enligt förslaget. De detaljerade förfarandena för cellodling som etablerats i vårt molekylärgenetiska laboratorium är listade som bifogade filer molekylärgenetisk studie.

   3. Datahantering Vi har redan satt upp den datoriserade DIGS-databasmjukvaran i vår tidigare studie (Taiwan Schizophrenia Linkage Study, TSLS) och neuropsykologisk databank i en annan tidigare studie (Multidimensional Psychopathological Study for Schizophrenia, MPSS). Alla kliniska och neuropsykologiska data i detta projekt kommer att införlivas i dessa databanker.

   Familjens stamtavladata, DNA-data och cellodlingsdata kommer att införlivas i vår tidigare etablerade databank: Bank of Molecular Genetic Laboratory Data (BMGLD). Denna BMGLD kommer att inkludera 4 uppsättningar data: (1) släktträd och genotypningsdatabank. Dessa data ställs in med det kyrilliska programmet; (2) DNA-provbank; (3) kliniska data och endofenotypbank och (4) cellinjebank. Denna välorganiserade BMGLD kommer att vara av stort värde för kontinuerligt forskningsarbete.

   Datainmatningsprocedurerna kommer att följa de riktlinjer som vi använder för våra pågående projekt. Dessa procedurer syftar till att maximera noggrannheten hos data. Uppgifterna kommer att matas in dubbelt, och original- och verifieringsfilerna kommer att jämföras med avseende på avvikelser. Alla datauppsättningar kommer att säkerhetskopieras till skiva regelbundet. Säkerhetskopieringen och originaldatauppsättningarna kommer att behållas i olika låsta kontor.

   Datauppsättningarna i detta projekt kommer att vara tillgängliga för andra utredare enligt riktlinjerna från RFA. Vi kommer att skapa en datauppsättning som kommer att inkludera all data som krävs av RFA och vilken ytterligare data som NHRI vill införliva i cellbanken. Dessa data kommer att skickas till det datahanteringscenter som utsetts av NHRI för efterföljande distribution till medlemmen i genotypningskonsortiet.

5. Förväntade resultat Vi förväntar oss att genom detta projekt uppnå följande mål: (1) att samarbeta med detta viktiga Taiwan Genotyping Consortium som föreslagits av NHRI, (2) att upptäcka gener för schizofrenikänslighet som är relaterade till den neuropsykologiska endofenotypen, (3) till göra ytterligare fin kartläggning av suggestiva länkkromosomregioner för att replikera tidigare länkstudieresultat med hjälp av vårt tidigare insamlade sampåverkade sib-par familjeprov, och (4) för att deponera lymfoblastcellinjerna i NHRI Cell Bank som fungerar som en nationell resurs för grundläggande forskning i Taiwan.

6. Mänskliga försökspersoner Detta är en genetisk studie, alla försökspersoner som rekryteras kommer att presentera sitt undertecknade informerade samtycke innan de registreras för studien. Det finns ingen invasiv procedur med potentiell fara i processen för den kliniska intervjun och de neuropsykologiska utvärderingarna. Blodprover på 30 c.c. kommer att dras. Detta kommer att göras med hjälp av en nål och detta kan orsaka en smärtsam känsla som vanligtvis är försumbar i klinisk miljö. Dessa deltagande försökspersoner kommer att lugnas när alla obehagskänsla uppstår under studieprocedurerna.

   Alla forskare som deltog i denna studieprocedur är alla välutbildade. Om detta är någon oväntad känslomässig eller fysisk reaktion som inträffar under studieproceduren, ska P.I. om projektet bör informeras och nödvändiga åtgärder kommer att vidtas omedelbart. Eftersom det här är en genetisk studie kan frågan om genetisk rådgivning tas upp i studieproceduren. De deltagande forskarna kommer att utbildas innan de deltar i denna studie för ämnet genetisk rådgivning. Dessa försökspersoner eller deras familjer som är i behov av specifik genetisk rådgivning kommer att hänvisas till specialkliniken, belägen på polikliniken vid National Taiwan University Hospital, av P.I. av detta projekt för särskild vård.

7. Djurutredning är inte inblandad.
8. Potentiella faror Den kliniska intervjun, de neuropsykologiska utvärderingarna och blodprovet som tas kommer att vara mycket säkra. Emellertid kan denna genetiska studie provocera fram en känslomässig reaktion hos familjen, särskilt när det gäller den genetiska ärftligheten. I detta fall kommer de närvarande forskarna, välutbildade, att ge omedelbar försäkran och bedömning. Om något anses nödvändigt kommer dessa ämnen att remitteras till P.I.s specialklinik. av detta projekt för särskild psykiatrisk vård.

Proceduren för blodprovtagning kan skapa en mild grad av smärtsam känsla eller rädsla. Dessa fall kommer att lugnas omedelbart. Generellt sett är denna studieprocedur säker och de potentiella riskerna är minimala och kan hanteras om något händer.