がんにおける筋萎縮 (MWIC) (MWIC)

患者: 計画された切除手術のための上部および下部消化管癌の患者が募集されます。 患者は、関連する学際的なチーム会議で臨床チームによって特定され、その後、外科クリニックでの研究情報と同意についてアプローチされます。 年齢が一致した健康な対照で、良性疾患の選択的手術を受けている（例： ヘルニア）も募集します。

患者の表現型検査: 診断および病期分類の日常的な部分として実行される CT スキャンは、体組成の分析に使用されます。 募集されたすべての患者は、CTスキャンが存在する場合に分析されます。 コントロール患者（例： ヘルニア) は CT スキャンを持っていないかもしれませんが、利用可能な場合は分析されます。 3 番目の腰椎からの横断 CT 画像が評価され、1 人の訓練を受けた観察者によって組織の体積が推定されます。 筋肉と脂肪組織の断面積は、身長 (cm2/m2) に対して正規化されます。 回帰式を使用して、生データ (cm2) から全身の貯蔵量を推定します。 低筋肉量のカットオフは、CT ベースのサルコペニアとがん患者の肥満研究に基づいています。 以前の研究では、CT スキャン後の筋生検までの時間の中央値は 18 日でした。 フェノタイピングには、基本的な身体的属性 (体重、身長など) および自己申告による身体能力 (アンケートによる) の測定も含まれます。

筋機能/身体活動の評価: すべての患者の身体能力の客観的な評価がクリニックで行われます。 これには、「タイムアップ アンド ゴー」テストと「6 分間ウォーキング」テストが含まれます。 これらのテストは、文献で十分に検証されており、評価者間の信頼性が良好です。 彼らは患者の診療所の訪問に不便さのわずかな負担を加えますが、これは最小限です. さらに、身体活動計は、防水ドレッシングの下で​​患者の太ももに適用されます。 治験責任医師は、がん患者でこれらの測定器を検証しており、それらは小さく (35x53x7mm) 軽量 (20g) です。 上記のように以前の研究で使用された場合、患者は目立たず、忍容性が良好であることがわかりました. 可能であれば、治験責任医師は患者に、手術後最大 12 か月まで、術後クリニックで「タイムアップ アンド ゴー」と「6 分間の歩行テスト」を繰り返すように依頼します。

患者の自己報告による評価: 通常の診療所では、すべての患者に、身体の健康とこれに対する認識に関する検証済みのアンケートに記入するよう求められます。 これらは、併存疾患の重症度を評価するために、また脆弱性を評価するために使用されます。 アンケートの例には、スコットランドの併存疾患重症度スコア、チャールソン併存疾患指数、エドモントン フレイル スケールなどがあります。 自己申告による食欲と機能に関連する他のアンケートも検討されますが、全体的な目的は、質問の負担を軽減し、アンケートの疲労を防ぐために選択した質問をすることです. 治験責任医師は、手術後 12 か月まで、通常の診療所でこれらのアンケートを繰り返すように参加者に依頼します。

血液と尿のサンプリング: 定期的な国民健康サービス (NHS) の診療所では、すべての患者に血液と尿のサンプルを提供するよう求められます。 これが不可能な場合、研究チームは、定期的なケアの一環として挿入された尿道および血管カテーテルを介して、計画された手術で全身麻酔下でこれらのサンプルを採取する許可を求めます。 術後の段階で、治験責任医師は参加者に、可能であれば手術後 12 か月までの通常の診療所で血液と尿のサンプルを提供するように依頼します。

筋生検: 腹直筋の生検は、手術時にすべての患者に対して執刀医によって行われます。 これは、計画された手術のために行われた切開から採取され、それ以上切開する必要はありません。 可能であれば、大腿四頭筋（太ももの筋肉）の追加の針生検も比較のためにサンプリングされます。 サンプルから脂肪、血液/繊維組織を除去し、液体窒素で瞬間凍結し、-80°C で保存します。免疫組織化学 (IHC) のために、筋肉標本をコルクに縫い付け、最適切断温度 (OCT) で処理してから、 -80℃で保存する前に、冷却したイソペンタン溶媒（-190℃）に落とします。

脂肪生検：すべての患者の手術時に、執刀医が皮下脂肪および可能であれば内臓脂肪の生検を行います。 この手順では、追加の切開は必要ありません。 これらのサンプルは、液体窒素で瞬間凍結され、-80°C で保存されます。

腫瘍生検: がん患者の場合、手術時に切除標本が取り除かれると、これは新鮮な状態で病理学研究室に運ばれ、当直の病理医が腫瘍の切片を回収します。 これは、臨床病期分類を損なうことなく、現在の手順に従って行われます。 腫瘍サンプルをアリコートに分割し、液体窒素で-80°Cでスナップ凍結します。 これは、コントロール グループには適用されません。

繰り返しサンプリング: フォローアップ NHS クリニックでは、すべての患者に繰り返し血液と尿のサンプルを提供するよう求められます。これらのサンプルはアリコートに分割され、-80°C の液体窒素で瞬間凍結されます。 患者が従順な場合は、大腿四頭筋の針生検を 1 回繰り返すように求められます。 これは、標準的な無菌技術を使用して局所麻酔下でクリニックで行われます。 局所麻酔薬の注射に伴う不快感がありますが、これは一時的なものです。 筋肉生検に関連する不快感もありますが、これは短命であり、過去には十分に許容されていました. 大腿四頭筋生検は、通常のフォローアップ時 (手術後約 6 ～ 8 か月) にのみ要求されます。 可能であれば、研究期間中のその後の定期的なフォローアップの予定で、繰り返しの血液と尿のサンプルが要求されます。 治験責任医師は、これが術後 12 か月まで続くと予想しています。

免疫組織化学 (IHC) およびウエスタンブロット: これらは、以前の出版物に従って実行されます。 IHC では、凍結した筋肉切片をラミニンおよびミオシン重鎖または lla で共染色して、繊維の種類を識別します。 パラフィン切片を使用して染色することもできます。 繊維タイプの分布、個々の繊維の断面積、および核の分布 (再生のレベルを評価するための中心と周辺の位置) は、独自の画像分析プラットフォームによって評価されます。 測定のための潜在的なマーカーには、オートファジーの経路メンバー (ベクリン、ランプ、抗胸腺細胞グロブリン (ATG)) が含まれます。アポトーシス（ポリアデノシン二リン酸リボースポリメラーゼ（PARP）、カスパーゼ-3）;酸化ストレス (ニトロシル化 4-ヒドロキシノネナール (HNE) およびユビキチン化 [K48、K63] タンパク質);細胞ストレス (核因子 (赤血球由来 2) 様 2 ケルチ様赤血球細胞由来タンパク質、Cap 'N' Collar 相同性関連タンパク質 1 (NRF2KEAP1)、熱ショックタンパク質 (HSP)、小胞体 (ER) ストレス);炎症 (IkB キナーゼ (IKK)、活性化 B 細胞の核因子カッパ軽鎖エンハンサー (NFkB)-9p65、p.38、細胞外シグナル関連キナーゼ (erk)1/2、c-Jun N 末端キナーゼ(jnk));衛星細胞の成熟 (Paired Box (Pax)3、Pax7、筋原性因子 (MYF)5、M-カドヘリン);筋形成（ミオゲニン、デスミン）; decapentaplegic (SMAD) に対する sma/mothers (SMAD3、phosphoSMAD3);およびP-セレクチン。

C - 反応性タンパク質（CRP）分析：全身性炎症（SI）は、血漿CRP濃度を使用して評価されます。これは、エジンバラの王立診療所（RIE）の臨床化学部門による自動免疫比濁分析で測定されます。

これらの分析は、エジンバラ大学と国際協力者の施設の両方で実施さ​​れます。 大学の管理外に移された組織は、一意の研究識別子を使用して完全に匿名化されます。

この現在の研究は、Cancer Research United Kingdom (UK) によって資金提供および支援された以前の研究の継続です。 その研究の一環として、組織サンプルが収集され、その一部は大学に残っています。 治験責任医師は、これらの残りのサンプルを使用して、コホートのサイズを大きくすることで治験責任医師が収集する新しいサンプルに力を加え、したがって特定された潜在的なバイオマーカーが誤りではなく重要である可能性を高めるつもりです。 さらに、これらのサンプルを分析に含めることで、以前のプロジェクトに含めることで得られた価値をさらに高めることができます。