Muskelsvinn i kreft (MWIC) (MWIC)

Pasienter: Pasienter med øvre og nedre mage-tarmkreft til planlagt reseksjonskirurgi vil bli rekruttert. Pasienter vil bli identifisert av det kliniske teamet på det aktuelle tverrfaglige teammøtet og deretter oppsøkt for studieinformasjon og samtykke i kirurgisk klinikk. Alderstilpassede, friske kontroller som gjennomgår elektiv kirurgi for godartede tilstander (f.eks. brokk) vil også bli rekruttert.

Pasientfenotyping: CT-skanninger utført som en rutinemessig del av diagnose og iscenesettelse vil bli brukt for analyse av kroppssammensetning. Alle pasienter som rekrutteres vil få sine CT-skanninger analysert der de er tilstede. Kontrollpasienter (f.eks. brokk) har kanskje ikke CT-skanning, men vil bli analysert der det er tilgjengelig. Et tverrgående CT-bilde fra tredje lumbale vertebrae vil bli vurdert og vevsvolumer estimert av en enkelt trent observatør. Tverrsnittsareal for muskel- og fettvev vil normaliseres for statur (cm2/m2). Estimater av hele kroppslagre vil bli generert fra rådata (cm2) ved bruk av regresjonsligninger. Cutoffs for lav muskulæritet er basert på CT-basert sarkopeni pluss fedmestudier av kreftpasienter. I en tidligere studie var mediantiden til muskelbiopsi etter CT-skanning 18 dager. Fenotyping vil også innebære å måle grunnleggende fysiske egenskaper (f.eks. vekt, høyde osv.) og selvrapporterte fysiske evner (gjennom spørreskjemaer).

Muskelfunksjon/fysisk aktivitetsvurdering: Det vil bli foretatt en objektiv vurdering av fysisk evne i klinikken for alle pasienter. Dette vil innebære en "timed up and go" test og en "6 minutters gange" test. Disse testene er godt validert i litteraturen og har god inter-rater reliabilitet. Selv om de legger til en liten ulempe for pasientklinikken, er dette minimalt. I tillegg vil en fysisk aktivitetsmåler påføres pasientens lår under en vanntett bandasje. Etterforskerne har validert disse målerne hos kreftpasienter, og de er små (35x53x7 mm) og lette (20g). Når de ble brukt i tidligere studier som ovenfor, har pasientene funnet dem lite påtrengende og de har blitt godt tolerert. Der det er mulig, vil etterforskerne be pasientene om å gjenta "timed up and go" og "6 minutters gangtest" i postoperativ klinikk opptil 12 måneder etter operasjonen.

Pasientens egenrapporterte vurdering: På rutineklinikken vil alle pasienter bli bedt om å fylle ut validerte spørreskjemaer angående deres fysiske helse, og deres oppfatning av dette. Disse vil bli brukt til å vurdere alvorlighetsgraden av komorbiditet, og også for å vurdere skrøpelighet. Eksempler på spørreskjemaer inkluderer Scottish Co-Morbidity Severity Score, Charlson Co-morbidity Index og Edmonton Frail Scale. Andre spørreskjemaer knyttet til selvrapportert appetitt og funksjon vil bli vurdert, men det overordnede målet vil være å stille utvalgte spørsmål for å redusere belastningen ved å spørre og forhindre tretthet i spørreskjemaet. Etterforskerne vil be deltakerne om å gjenta disse spørreskjemaene på rutineklinikken inntil 12 måneder etter operasjonen.

Blod- og urinprøvetaking: Ved rutinemessig National Health Service (NHS) klinikk vil alle pasienter bli bedt om å gi en blod- og urinprøve. Der dette ikke er mulig, vil forskerteamet be om tillatelse til å ta disse prøvene under generell anestesi ved planlagt operasjon via urin- og karkateter som legges inn som en del av rutinemessig behandling. I den postoperative fasen vil etterforskerne be deltakerne om å gi blod- og urinprøver, der det er mulig, på rutineklinikken inntil 12 måneder etter operasjonen.

Muskelbiopsi: En biopsi av muskelen rectus abdominis vil bli tatt ved operasjonen av operasjonskirurgen for alle pasienter. Dette vil bli tatt fra snittet utført for den planlagte operasjonen og krever ingen ytterligere snitt. Der det er mulig, vil en ekstra nålbiopsi av quadriceps (lårmuskel) også bli tatt prøver for sammenligning. Prøver vil bli renset for fett, blod/fibrøst vev, hurtigfrosset i flytende nitrogen og lagret ved -80°C. For immunhistokjemi (IHC) vil muskelprøver bli sydd på en kork, behandlet med optimal skjæretemperatur (OCT) og deretter senkes ned i avkjølt isopentan-løsningsmiddel (-190°C) før lagring ved -80°C.

Fettbiopsi: En biopsi av subkutant fett, og der det er mulig, visceralt fett vil bli samlet inn ved operasjonstidspunktet for alle pasienter av operasjonskirurgen. Denne prosedyren krever ingen ekstra snitt. Disse prøvene vil bli hurtigfryst i flytende nitrogen og lagret ved -80°C.

Tumorbiopsi: For kreftpasientene, når reseksjonsprøven er fjernet ved operasjonen, vil denne bli tatt fersk til patologilaboratoriet hvor vakthavende patolog vil hente ut svulster. Dette vil gjøres uten å gå på akkord med klinisk stadie og i samsvar med gjeldende prosedyrer. Svulstprøvene vil bli delt inn i alikvoter og hurtigfryst i flytende nitrogen ved -80°C. Dette vil ikke gjelde for kontrollgruppen.

Gjentatt prøvetaking: Ved oppfølging av NHS-klinikken vil alle pasienter bli bedt om å gi gjentatte blod- og urinprøver som deles i alikvoter og hurtigfryses i flytende nitrogen ved -80°C. Der pasienten er mottakelig, vil de også bli bedt om å gi en enkelt gjentatt nålbiopsi av quadriceps-muskelen. Dette vil bli utført på klinikken under lokalbedøvelse ved bruk av standard aseptisk teknikk. Det er noe ubehag forbundet med injeksjon av lokalbedøvelse, men dette er forbigående. Det er også noe ubehag forbundet med muskelbiopsien, men dette er kortvarig og har tidligere vært godt tolerert. Quadriceps-biopsi vil kun bli bedt om ved rutinemessig oppfølging (ca. 6-8 måneder etter operasjonen). Der det er mulig, vil det bli bedt om gjentatte blod- og urinprøver ved påfølgende rutinemessige oppfølgingsavtaler i løpet av studien. Etterforskerne forventer at dette vil skje i opptil 12 måneder postoperativt.

Immunhistokjemi (IHC) og Western Blots: Disse vil bli utført i henhold til tidligere publikasjoner. For IHC vil frosne muskelseksjoner samfarges for laminin og myosin tung kjede eller lla for å skille fibertype. Parafinseksjoner kan også brukes og farges. Fordelingen av fibertyper, tverrsnittsarealet til individuelle fibre og fordelingen av kjerner (sentral versus perifer plassering for å vurdere regenereringsnivå) vil bli vurdert av en proprietær bildeanalyseplattform. Potensielle markører for måling vil inkludere pathways medlemmer av autofagi (beclin, lampe, anti-tymocytt globulin (ATG)); apoptose (poly-adenosin di-fosfat ribose polymerase (PARP), caspase-3); oksidativt stress (nitrosylert 4-hydroksynonenal (HNE) og ubiquitinerte [K48, K63] proteiner); cellestress (Nukleær faktor (erytroid avledet 2)-lignende 2 Kelch-lignende erytroid celle-avledet protein med Cap 'N' Collar homologi-assosiert protein 1 (NRF2KEAP1), Heat Shock Protein (HSP), endoplasmatisk retikulum (ER)-stress ); betennelse (IkB kinase (IKK), kjernefaktor kappa-lettkjedeforsterker av aktiverte B-celler (NFkB)-9p65, s.38, ekstracellulær signalrelatert kinase (erk)1/2, c-Jun N-terminal kinase (jnk)); satellittcellemodning (Paired Box (Pax)3, Pax7, Myogenic factor (MYF)5, M-cadherin); myogenese (myogenin, desmin); sma/mødre mot decapentaplegi (SMAD) (SMAD3, phosphoSMAD3); og P-selektin.

C - reaktivt protein (CRP) Analyse: Systemisk inflammasjon (SI) vil bli vurdert ved bruk av plasma CRP-konsentrasjon, som vil bli målt med en automatisert immunoturbidimetrisk analyse av Institutt for klinisk kjemi, Royal Infirmary of Edinburgh (RIE).

Disse analysene vil bli utført både ved University of Edinburgh og i lokalene til internasjonale samarbeidspartnere. Eventuelt vev som overføres utenfor universitetets omsorg vil bli fullstendig anonymisert ved hjelp av unike studieidentifikatorer.

Denne nåværende studien er en fortsettelse av en tidligere studie finansiert og støttet av Cancer Research United Kingdom (UK). Som en del av denne studien ble det samlet inn vevsprøver, hvorav noen forblir på universitetet. Etterforskerne har til hensikt å bruke disse gjenværende prøvene for å gi kraft til de nye prøvene etterforskerne samler inn ved å øke kohortstørrelsen og dermed sannsynligheten for at en eventuell identifisert potensiell biomarkør er signifikant snarere enn feil. I tillegg vil det å inkludere disse prøvene i analysen øke verdien, utover det som allerede er oppnådd ved inkludering i forrige prosjekt.