Desgaste muscular en el cáncer (MWIC) (MWIC)

Pacientes: Se reclutarán pacientes con cáncer gastrointestinal superior e inferior para cirugía de resección planificada. Los pacientes serán identificados por el equipo clínico en la reunión del equipo multidisciplinario correspondiente y luego se acercarán para obtener información sobre el estudio y consentimiento en la clínica quirúrgica. Controles sanos de la misma edad que se sometieron a cirugía electiva por afecciones benignas (p. hernias) también serán reclutados.

Fenotipado del paciente: las tomografías computarizadas realizadas como parte rutinaria del diagnóstico y la estadificación se utilizarán para el análisis de la composición corporal. Se analizarán las tomografías computarizadas de todos los pacientes reclutados cuando estén presentes. Pacientes de control (p. hernias) pueden no tener tomografías computarizadas, pero cuando estén disponibles, se analizarán. Se evaluará una imagen de TC transversal de la tercera vértebra lumbar y se estimarán los volúmenes de tejido por un solo observador capacitado. El área de la sección transversal del músculo y el tejido adiposo se normalizará para la estatura (cm2/m2). Las estimaciones de las reservas de todo el cuerpo se generarán a partir de datos sin procesar (cm2) utilizando ecuaciones de regresión. Los puntos de corte para baja musculatura se basan en estudios de sarcopenia más obesidad basados ​​en TC de pacientes con cáncer. En un estudio anterior, la mediana de tiempo para la biopsia muscular después de la tomografía computarizada fue de 18 días. El fenotipado también implicará la medición de atributos físicos básicos (p. ej., peso, altura, etc.) y habilidades físicas autoinformadas (a través de cuestionarios).

Evaluación de la función muscular/actividad física: Se realizará una evaluación objetiva de la capacidad física en la clínica para todos los pacientes. Esto implicará una prueba de "tiempo arriba y marcha" y una prueba de "caminata de 6 minutos". Estas pruebas han sido bien validadas en la literatura y tienen una buena confiabilidad entre evaluadores. Si bien agregan una ligera carga de inconvenientes a la visita a la clínica del paciente, esto es mínimo. Además, se colocará un medidor de actividad física en el muslo de los pacientes bajo un vendaje impermeable. Los investigadores han validado estos medidores en pacientes con cáncer y son pequeños (35x53x7 mm) y livianos (20 g). Cuando se usaron en estudios previos como los anteriores, los pacientes los encontraron discretos y se toleraron bien. Siempre que sea posible, los investigadores pedirán a los pacientes que repitan el "tiempo de levantarse y marcharse" y la "prueba de marcha de 6 minutos" en la clínica posoperatoria hasta 12 meses después de la cirugía.

Evaluación autoinformada por el paciente: en la clínica de rutina, se les pedirá a todos los pacientes que completen cuestionarios validados sobre su salud física y sus percepciones al respecto. Estos se utilizarán para evaluar la gravedad de la comorbilidad y también para evaluar la fragilidad. Los cuestionarios de ejemplo incluyen la puntuación de gravedad de la comorbilidad escocesa, el índice de comorbilidad de Charlson y la escala de fragilidad de Edmonton. Se considerarán otros cuestionarios relacionados con el apetito y la función autoinformados, pero el objetivo general será hacer preguntas seleccionadas para reducir la carga de las preguntas y evitar la fatiga del cuestionario. Los investigadores pedirán a los participantes que repitan estos cuestionarios en la clínica de rutina hasta 12 meses después de la cirugía.

Muestreo de sangre y orina: en la clínica de rutina del Servicio Nacional de Salud (NHS), se les pedirá a todos los pacientes que proporcionen una muestra de sangre y orina. Cuando esto no sea posible, el equipo de investigación solicitará permiso para tomar estas muestras bajo anestesia general en la cirugía planificada a través de catéteres urinarios y vasculares insertados como parte de la atención de rutina. En la fase posoperatoria, los investigadores pedirán a los participantes que proporcionen muestras de sangre y orina, cuando sea posible, en la clínica de rutina hasta 12 meses después de la cirugía.

Biopsia del músculo: el cirujano que realiza la operación tomará una biopsia del músculo recto del abdomen en todos los pacientes. Esto se tomará de la incisión realizada para la cirugía planificada y no requiere más incisiones. Siempre que sea posible, también se tomará una muestra de una biopsia con aguja adicional del cuádriceps (músculo del muslo) para comparar. Las muestras se limpiarán de grasas, sangre/tejido fibroso, se congelarán instantáneamente en nitrógeno líquido y se almacenarán a -80 °C. Para la inmunohistoquímica (IHC), las muestras de músculo se coserán en un corcho, se tratarán con la temperatura de corte óptima (OCT) y luego sumergido en disolvente de isopentano enfriado (-190°C) antes del almacenamiento a -80°C.

Biopsia de grasa: una biopsia de grasa subcutánea y, cuando sea posible, de grasa visceral se recolectará en el momento de la cirugía para todos los pacientes por parte del cirujano que realiza la operación. Este procedimiento no requiere incisiones adicionales. Estas muestras se congelarán instantáneamente en nitrógeno líquido y se almacenarán a -80 °C.

Biopsia del tumor: para los pacientes con cáncer, una vez que se haya extraído la muestra de resección en la cirugía, esta se llevará fresca al laboratorio de patología donde el patólogo de turno extraerá las secciones del tumor. Esto se hará sin comprometer la estadificación clínica y de acuerdo con los procedimientos actuales. Las muestras de tumor se dividirán en alícuotas y se congelarán instantáneamente en nitrógeno líquido a -80 °C. Esto no se aplicará al grupo de control.

Muestreo repetido: en la clínica de seguimiento del NHS, se pedirá a todos los pacientes que proporcionen muestras de sangre y orina repetidas que se dividirán en alícuotas y se congelarán rápidamente en nitrógeno líquido a -80 °C. Cuando el paciente sea susceptible, también se le pedirá que proporcione una biopsia con aguja repetida única del músculo cuádriceps. Esto se realizará en la clínica bajo anestesia local utilizando una técnica aséptica estándar. Hay algunas molestias asociadas con la inyección de anestésico local pero esto es transitorio. También hay algunas molestias asociadas con la biopsia muscular, pero esto es de corta duración y en el pasado ha sido bien tolerado. La biopsia de cuádriceps se solicitará únicamente en el seguimiento de rutina (alrededor de 6 a 8 meses después de la cirugía). Siempre que sea posible, se solicitarán muestras de sangre y orina repetidas en las citas de seguimiento de rutina posteriores durante la duración del estudio. Los investigadores anticiparían que esto ocurriría hasta 12 meses después de la operación.

Inmunohistoquímica (IHC) y Western Blots: Estos se realizarán según publicaciones anteriores. Para IHC, las secciones de músculo congeladas se tiñen conjuntamente para la cadena pesada de laminina y miosina o lla para distinguir el tipo de fibra. Las secciones de parafina también se pueden usar y teñir. La distribución de los tipos de fibras, el área de la sección transversal de las fibras individuales y la distribución de los núcleos (ubicación central versus periférica para evaluar el nivel de regeneración) se evaluarán mediante una plataforma de análisis de imágenes patentada. Los marcadores potenciales para la medición incluirán vías miembros de la autofagia (beclin, lámpara, globulina antitimocito (ATG)); apoptosis (poliadenosina difosfato ribosa polimerasa (PARP), caspasa-3); estrés oxidativo (4-hidroxinonenal nitrosilado (HNE) y proteínas ubiquitinadas [K48, K63]); estrés celular (factor nuclear (derivado eritroide 2)-like 2 proteína derivada de células eritroides tipo Kelch con homología Cap 'N' Collar-proteína asociada 1 (NRF2KEAP1), proteína de choque térmico (HSP), estrés del retículo endoplásmico (ER) ); inflamación (quinasa IkB (IKK), potenciador de la cadena ligera kappa del factor nuclear de las células B activadas (NFkB)-9p65, p.38, quinasa relacionada con la señal extracelular (erk)1/2, quinasa c-Jun N-terminal (jnk)); maduración de células satélite (Paired Box (Pax)3, Pax7, factor miogénico (MYF)5, M-cadherina); miogénesis (miogenina, desmina); sma/madres contra decapentapléjico(SMAD) (SMAD3, fosfoSMAD3); y P-selectina.

Análisis de proteína C reactiva (CRP): la inflamación sistémica (SI) se evaluará utilizando la concentración de CRP en plasma, que se medirá con un ensayo inmunoturbidimétrico automatizado por el Departamento de Química Clínica, Royal Infirmary of Edinburgh (RIE).

Estos análisis se realizarán tanto en la Universidad de Edimburgo como en las instalaciones de colaboradores internacionales. Cualquier tejido transferido fuera del cuidado de la Universidad se anonimizará por completo utilizando identificadores de estudio únicos.

Este estudio actual es una continuación de un estudio anterior financiado y respaldado por Cancer Research United Kingdom (UK). Como parte de ese estudio se recolectaron muestras de tejido, algunas de las cuales permanecen en la Universidad. Los investigadores tienen la intención de usar estas muestras restantes para agregar poder a las nuevas muestras que recopilan al aumentar el tamaño de la cohorte y, por lo tanto, la probabilidad de que cualquier biomarcador potencial identificado sea significativo en lugar de erróneo. Además, la inclusión de estas muestras en el análisis aumentará su valor, por encima del ya ganado por la inclusión en el proyecto anterior.