Fonte musculaire dans le cancer (MWIC) (MWIC)

Patients : des patients atteints d'un cancer gastro-intestinal supérieur et inférieur pour une chirurgie de résection planifiée seront recrutés. Les patients seront identifiés par l'équipe clinique lors de la réunion d'équipe multidisciplinaire pertinente, puis approchés pour obtenir des informations sur l'étude et le consentement dans la clinique chirurgicale. Témoins en bonne santé, appariés selon l'âge, subissant une chirurgie élective pour des affections bénignes (par ex. hernies) seront également recrutés.

Phénotypage du patient : les tomodensitogrammes effectués dans le cadre du diagnostic et de la stadification de routine seront utilisés pour l'analyse de la composition corporelle. Tous les patients recrutés verront leurs tomodensitogrammes analysés lorsqu'ils sont présents. Patients témoins (par ex. hernies) peuvent ne pas avoir de tomodensitogrammes, mais le cas échéant, seront analysés. Une image CT transversale de la troisième vertèbre lombaire sera évaluée et les volumes de tissus estimés par un seul observateur qualifié. La section transversale des tissus musculaires et adipeux sera normalisée pour la stature (cm2/m2). Les estimations des réserves du corps entier seront générées à partir des données brutes (cm2) à l'aide d'équations de régression. Les seuils de faible musculature sont basés sur des études CT sur la sarcopénie plus l'obésité chez des patients atteints de cancer. Dans une étude précédente, le délai médian de biopsie musculaire après tomodensitométrie était de 18 jours. Le phénotypage impliquera également de mesurer les attributs physiques de base (par exemple, le poids, la taille, etc.) et les capacités physiques autodéclarées (au moyen de questionnaires).

Évaluation de la fonction musculaire/de l'activité physique : une évaluation objective de la capacité physique sera entreprise à la clinique pour tous les patients. Cela impliquera un test "chronométré" et un test "6 minutes de marche". Ces tests ont été bien validés dans la littérature et ont une bonne fidélité inter-juges. Bien qu'ils ajoutent un léger inconvénient à la visite du patient à la clinique, cela est minime. De plus, un compteur d'activité physique sera appliqué sur la cuisse du patient sous un pansement imperméable. Les Investigateurs ont validé ces compteurs chez des patients cancéreux, et ils sont petits (35x53x7mm) et légers (20g). Lorsqu'ils ont été utilisés dans des études précédentes comme ci-dessus, les patients les ont trouvés discrets et ils ont été bien tolérés. Dans la mesure du possible, les enquêteurs demanderont aux patients de répéter le «test de marche chronométré» et le «test de marche de 6 minutes» en clinique postopératoire jusqu'à 12 mois après la chirurgie.

Évaluation auto-déclarée par le patient : lors de la clinique de routine, tous les patients seront invités à remplir des questionnaires validés concernant leur santé physique et leur perception de celle-ci. Ceux-ci seront utilisés pour évaluer la gravité de la comorbidité, ainsi que pour évaluer la fragilité. Des exemples de questionnaires comprennent le Scottish Co-Morbidity Severity Score, le Charlson Co-morbidity Index et l'Edmonton Frail Scale. D'autres questionnaires relatifs à l'appétit et à la fonction autodéclarés seront pris en compte, mais l'objectif général sera de poser des questions sélectionnées pour réduire le fardeau des questions et éviter la fatigue du questionnaire. Les enquêteurs demanderont aux participants de répéter ces questionnaires dans une clinique de routine jusqu'à 12 mois après la chirurgie.

Échantillonnage de sang et d'urine : à la clinique de routine du National Health Service (NHS), tous les patients seront invités à fournir un échantillon de sang et d'urine. Lorsque cela n'est pas possible, l'équipe de recherche demandera l'autorisation de prélever ces échantillons sous anesthésie générale lors d'une intervention chirurgicale planifiée via des cathéters urinaires et vasculaires insérés dans le cadre des soins de routine. Dans la phase postopératoire, les enquêteurs demanderont aux participants de fournir des échantillons de sang et d'urine, si possible, dans une clinique de routine jusqu'à 12 mois après la chirurgie.

Biopsie musculaire : Une biopsie du muscle droit de l'abdomen sera effectuée lors de la chirurgie par le chirurgien opérateur pour tous les patients. Cela sera tiré de l'incision pratiquée pour la chirurgie prévue et ne nécessite aucune autre incision. Dans la mesure du possible, une biopsie à l'aiguille supplémentaire du quadriceps (muscle de la cuisse) sera également prélevée à des fins de comparaison. Les échantillons seront débarrassés des graisses, du sang/tissu fibreux, congelés dans de l'azote liquide et stockés à -80 °C. Pour l'immunohistochimie (IHC), les échantillons musculaires seront cousus sur un bouchon de liège, traités avec une température de coupe optimale (OCT), puis abaissé dans un solvant isopentane refroidi (-190°C) avant stockage à -80°C.

Biopsie de la graisse : Une biopsie de la graisse sous-cutanée et, si possible, de la graisse viscérale sera prélevée au moment de la chirurgie pour tous les patients par le chirurgien opérant. Cette procédure ne nécessite aucune incision supplémentaire. Ces échantillons seront congelés instantanément dans de l'azote liquide et conservés à -80°C.

Biopsie tumorale : Pour les patients cancéreux, une fois que l'échantillon de résection a été retiré lors de la chirurgie, il sera apporté frais au laboratoire de pathologie où le pathologiste de service récupérera des sections de tumeur. Cela se fera sans compromettre la stadification clinique et conformément aux procédures en vigueur. Les échantillons de tumeurs seront divisés en aliquotes et congelés instantanément dans de l'azote liquide à -80 °C. Cela ne s'appliquera pas au groupe de contrôle.

Répéter l'échantillonnage : à la clinique de suivi du NHS, tous les patients seront invités à fournir des échantillons répétés de sang et d'urine qui seront divisés en aliquotes et congelés instantanément dans de l'azote liquide à -80 °C. Lorsque le patient est prêt, il lui sera également demandé de fournir une seule biopsie à l'aiguille répétée du muscle quadriceps. Ceci sera effectué en clinique sous anesthésie locale en utilisant une technique aseptique standard. Il y a un certain inconfort associé à l'injection d'anesthésique local mais c'est transitoire. Il y a aussi un certain inconfort associé à la biopsie musculaire, mais cela est de courte durée et a été bien toléré dans le passé. La biopsie du quadriceps sera demandée lors du suivi de routine (environ 6 à 8 mois après la chirurgie) uniquement. Dans la mesure du possible, des échantillons de sang et d'urine répétés seront demandés lors des rendez-vous de suivi de routine ultérieurs pendant la durée de l'étude. Les enquêteurs s'attendent à ce que cela se produise jusqu'à 12 mois après l'opération.

Immunohistochimie (IHC) et Western Blots : Ceux-ci seront effectués conformément aux publications précédentes. Pour l'IHC, les sections musculaires congelées seront co-colorées pour la chaîne lourde de la laminine et de la myosine ou lla afin de distinguer le type de fibre. Des sections de paraffine peuvent également être utilisées et colorées. La distribution des types de fibres, la section transversale des fibres individuelles et la distribution des noyaux (localisation centrale ou périphérique pour évaluer le niveau de régénération) seront évaluées par une plate-forme d'analyse d'images propriétaire. Les marqueurs potentiels pour la mesure comprendront les voies membres de l'autophagie (beclin, lampe, globuline anti-thymocyte (ATG)); apoptose (poly adénosine diphosphate ribose polymérase (PARP), caspase-3); le stress oxydatif (protéines nitrosylées 4-Hydroxynonenal (HNE) et ubiquitinées [K48, K63]) ; stress cellulaire (facteur nucléaire (dérivé érythroïde 2) de type 2 Kelch-like erythroid cell-derived protein with Cap 'N' Collar homology-associated protein 1 (NRF2KEAP1), Heat Shock Protein (HSP), endoplasmic reticulum (ER)-stress ); inflammation (IkB kinase (IKK), facteur nucléaire kappa-amplificateur de la chaîne légère des cellules B activées (NFkB)-9p65, p.38, kinase liée au signal extracellulaire (erk)1/2, c-Jun N-terminal kinase (jnk)); la maturation des cellules satellites (Paired Box (Pax)3, Pax7, Myogenic factor (MYF)5, M-cadhérine); myogenèse (myogénine, desmine); sma/mères contre la décapentaplégie (SMAD) (SMAD3, phosphoSMAD3); et la P-sélectine.

C - Analyse de la protéine réactive (CRP) : L'inflammation systémique (SI) sera évaluée à l'aide de la concentration plasmatique de CRP, qui sera mesurée avec un dosage immunoturbidimétrique automatisé par le Département de chimie clinique, Royal Infirmary of Edinburgh (RIE).

Ces analyses seront effectuées à la fois à l'Université d'Edimbourg et dans les locaux de collaborateurs internationaux. Tout tissu transféré hors des soins de l'Université sera entièrement anonymisé à l'aide d'identifiants d'étude uniques.

Cette étude actuelle est la continuation d'une étude précédente financée et soutenue par Cancer Research United Kingdom (UK). Dans le cadre de cette étude, des échantillons de tissus ont été prélevés, dont certains restent à l'Université. Les enquêteurs ont l'intention d'utiliser ces échantillons restants pour ajouter de la puissance aux nouveaux échantillons que les enquêteurs collectent en augmentant la taille de la cohorte et donc la probabilité que tout biomarqueur potentiel identifié soit significatif plutôt qu'erroné. De plus, l'inclusion de ces échantillons dans l'analyse ajoutera à leur valeur, au-delà de celle déjà acquise par l'inclusion dans le projet précédent.