Spierverspilling bij kanker (MWIC) (MWIC)

Patiënten: Patiënten met bovenste en onderste gastro-intestinale kanker voor geplande resectiechirurgie zullen worden geworven. Patiënten worden geïdentificeerd door het klinische team tijdens de relevante multidisciplinaire teamvergadering en vervolgens benaderd voor onderzoeksinformatie en toestemming in de chirurgische kliniek. Gezonde controles van dezelfde leeftijd die een electieve operatie ondergaan voor goedaardige aandoeningen (bijv. hernia) zal ook worden aangeworven.

Fenotypering van de patiënt: CT-scans die worden uitgevoerd als een routinematig onderdeel van de diagnose en stadiëring zullen worden gebruikt voor analyse van de lichaamssamenstelling. Alle patiënten die worden aangeworven, zullen hun CT-scans laten analyseren, indien aanwezig. Controlepatiënten (bijv. hernia) hebben mogelijk geen CT-scans, maar zullen, indien beschikbaar, worden geanalyseerd. Een transversaal CT-beeld van de derde lumbale wervels zal worden beoordeeld en de weefselvolumes zullen worden geschat door een enkele getrainde waarnemer. Dwarsdoorsnede voor spier- en vetweefsel wordt genormaliseerd voor postuur (cm2/m2). Schattingen van de voorraden in het hele lichaam zullen worden gegenereerd op basis van onbewerkte gegevens (cm2) met behulp van regressievergelijkingen. Cutoffs voor lage gespierdheid zijn gebaseerd op CT-gebaseerde sarcopenie plus obesitasstudies van kankerpatiënten. In een eerdere studie was de mediane tijd tot spierbiopsie na CT-scan 18 dagen. Fenotypering omvat ook het meten van fysieke basiskenmerken (bijv. Gewicht, lengte, enz.) en zelfgerapporteerde fysieke vermogens (door middel van vragenlijsten).

Spierfunctie/lichamelijke activiteitsbeoordeling: In de kliniek zal voor alle patiënten een objectieve beoordeling van het fysieke vermogen worden uitgevoerd. Dit omvat een "timed up and go" -test en een "6 minuten lopen" -test. Deze tests zijn goed gevalideerd in de literatuur en hebben een goede interbeoordelaarsbetrouwbaarheid. Hoewel ze een lichte last van ongemak toevoegen aan het bezoek aan de kliniek, is dit minimaal. Bovendien zal een fysieke activiteitsmeter op de dij van de patiënt worden aangebracht onder een waterdicht verband. De onderzoekers hebben deze meters gevalideerd bij kankerpatiënten, en ze zijn klein (35x53x7 mm) en licht (20 g). Bij gebruik in eerdere onderzoeken zoals hierboven, vonden de patiënten ze onopvallend en werden ze goed verdragen. Waar mogelijk zullen de onderzoekers de patiënten vragen om de "timed up and go" en "6 minuten looptest" te herhalen in de postoperatieve kliniek tot 12 maanden na de operatie.

Zelfgerapporteerde beoordeling door de patiënt: in de routinekliniek wordt aan alle patiënten gevraagd om gevalideerde vragenlijsten in te vullen over hun lichamelijke gezondheid en hun perceptie hiervan. Deze zullen worden gebruikt om de ernst van comorbiditeit te beoordelen, maar ook om kwetsbaarheid te beoordelen. Voorbeelden van vragenlijsten zijn de Scottish Co-Morbidity Severity Score, de Charlson Co-morbidity Index en de Edmonton Frail Scale. Andere vragenlijsten met betrekking tot zelfgerapporteerde eetlust en functie zullen worden overwogen, maar het algemene doel zal zijn om geselecteerde vragen te stellen om de last van het stellen van vragen te verminderen en vragenlijstmoeheid te voorkomen. De onderzoekers zullen de deelnemers vragen deze vragenlijsten tot 12 maanden na de operatie in de routinekliniek te herhalen.

Bloed- en urinemonsters: in de routinekliniek van de National Health Service (NHS) wordt aan alle patiënten gevraagd om een ​​bloed- en urinemonster te geven. Waar dit niet mogelijk is, zal het onderzoeksteam toestemming vragen om deze monsters onder algehele narcose te nemen bij een geplande operatie via urinaire en vasculaire katheters die als onderdeel van de routinezorg worden ingebracht. In de postoperatieve fase zullen de onderzoekers de deelnemers vragen om waar mogelijk bloed- en urinemonsters af te staan ​​in de routinekliniek tot 12 maanden na de operatie.

Spierbiopsie: Een biopsie van de rectus abdominis-spier zal tijdens de operatie worden genomen door de opererende chirurg voor alle patiënten. Dit wordt genomen van de incisie die is gemaakt voor de geplande operatie en vereist geen verdere incisies. Waar mogelijk wordt ter vergelijking ook een extra naaldbiopsie van de quadriceps (dijspier) genomen. Monsters worden ontdaan van vetten, bloed/vezelweefsel, snel ingevroren in vloeibare stikstof en bewaard bij -80 °C. Voor immunohistochemie (IHC) worden spiermonsters op een kurk gehecht, behandeld met optimale snijtemperatuur (OCT) en vervolgens verlaagd in gekoeld isopentaan-oplosmiddel (-190°C) voorafgaand aan opslag bij -80°C.

Vetbiopsie: Een biopsie van onderhuids vet, en waar mogelijk visceraal vet, zal op het moment van de operatie voor alle patiënten door de opererende chirurg worden verzameld. Deze procedure vereist geen extra incisies. Deze monsters worden snel ingevroren in vloeibare stikstof en bewaard bij -80°C.

Tumorbiopsie: voor de kankerpatiënten, zodra het resectiemonster tijdens de operatie is verwijderd, wordt dit vers naar het pathologielaboratorium gebracht waar de dienstdoende patholoog secties van de tumor zal ophalen. Dit zal gebeuren zonder de klinische stadiëring in gevaar te brengen en in overeenstemming met de huidige procedures. De tumormonsters worden verdeeld in aliquots en snel ingevroren in vloeibare stikstof bij -80°C. Dit geldt niet voor de controlegroep.

Herhaalde bemonstering: in de follow-up NHS-kliniek zullen alle patiënten worden gevraagd om herhaalde bloed- en urinemonsters te verstrekken die in aliquots worden verdeeld en snel worden ingevroren in vloeibare stikstof bij -80°C. Als de patiënt vatbaar is, zal hem ook worden gevraagd om een ​​enkele herhaalde naaldbiopsie van de quadriceps-spier te geven. Dit zal in de kliniek worden uitgevoerd onder plaatselijke verdoving met behulp van standaard aseptische technieken. Er is wat ongemak geassocieerd met de injectie van plaatselijke verdoving, maar dit is van voorbijgaande aard. Er is ook wat ongemak geassocieerd met de spierbiopsie, maar dit is van korte duur en werd in het verleden goed verdragen. Quadriceps-biopsie zal alleen worden aangevraagd bij routinematige follow-up (ongeveer 6-8 maanden na de operatie). Waar mogelijk zullen herhaalde bloed- en urinemonsters worden aangevraagd bij daaropvolgende routinematige vervolgafspraken voor de duur van het onderzoek. De onderzoekers verwachten dat dit tot 12 maanden na de operatie zal gebeuren.

Immunohistochemie (IHC) en Western Blots: deze worden uitgevoerd zoals in eerdere publicaties. Voor IHC worden bevroren spiersecties samen gekleurd voor laminine en myosine zware keten of lla om het vezeltype te onderscheiden. Paraffinecoupes kunnen ook worden gebruikt en gekleurd. De verdeling van vezeltypes, dwarsdoorsnede van individuele vezels en de verdeling van kernen (centrale versus perifere locatie om het regeneratieniveau te beoordelen) zullen worden beoordeeld door een eigen beeldanalyseplatform. Potentiële markers voor meting omvatten routes die leden van autofagie zijn (beclin, lamp, anti-thymocytenglobuline (ATG)); apoptose (polyadenosinedifosfaatribosepolymerase (PARP), caspase-3); oxidatieve stress (genitrosyleerde 4-Hydroxynonenal (HNE) en alomtegenwoordige [K48, K63] eiwitten); celstress (Nucleaire factor (erytroïde afgeleid 2)-achtig 2 Kelch-achtig erytroïde cel-afgeleid eiwit met Cap 'N' Collar homologie-geassocieerd eiwit 1 (NRF2KEAP1), Heat Shock Protein (HSP), endoplasmatisch reticulum (ER) -stress ); ontsteking (IkB-kinase (IKK), nucleaire factor kappa-lichte-keten-versterker van geactiveerde B-cellen (NFkB)-9p65, p.38, extracellulaire signaalgerelateerde kinase (erk)1/2, c-Jun N-terminale kinase (jnk)); rijping van satellietcellen (Paired Box (Pax)3, Pax7, Myogene factor (MYF)5, M-cadherine); myogenese (myogenine, desmine); sma/moeders tegen decapentaplegie (SMAD) (SMAD3, phosphoSMAD3); en P-selectine.

Analyse van C-reactief proteïne (CRP): Systemische ontsteking (SI) zal worden beoordeeld met behulp van plasma-CRP-concentratie, die zal worden gemeten met een geautomatiseerde immunoturbidimetrische assay door het Department of Clinical Chemistry, Royal Infirmary of Edinburgh (RIE).

Deze analyses zullen zowel in de Universiteit van Edinburgh als in de lokalen van internationale medewerkers worden uitgevoerd. Al het weefsel dat buiten de zorg van de universiteit wordt overgedragen, wordt volledig geanonimiseerd met behulp van unieke studie-ID's.

Deze huidige studie is een voortzetting van een eerdere studie gefinancierd en ondersteund door Cancer Research United Kingdom (VK). Als onderdeel van dat onderzoek werden weefselmonsters verzameld, waarvan sommige in de universiteit blijven. De onderzoekers zijn van plan deze resterende monsters te gebruiken om kracht toe te voegen aan de nieuwe monsters die de onderzoekers verzamelen door de cohortgrootte te vergroten en dus de waarschijnlijkheid dat een geïdentificeerde potentiële biomarker significant is in plaats van foutief. Bovendien zal het opnemen van deze monsters in de analyse hun waarde vergroten, bovenop de reeds gewonnen door opname in het vorige project.