암에서의 근육 소모(MWIC) (MWIC)

환자: 계획된 절제 수술을 위한 상부 및 하부 위장관 암 환자를 모집합니다. 관련 다학제 팀 회의에서 임상 팀이 환자를 식별한 다음 수술 클리닉에서 연구 정보 및 동의를 위해 접근합니다. 양성 상태(예: 탈장)도 모집합니다.

환자 표현형: 진단 및 병기 결정의 일상적인 부분으로 수행되는 CT 스캔은 체성분 분석에 사용됩니다. 모집된 모든 환자는 존재하는 경우 CT 스캔을 분석하게 됩니다. 대조군 환자(예: 탈장) CT 스캔이 없을 수 있지만 가능한 경우 분석됩니다. 훈련된 한 명의 관찰자가 세 번째 요추의 가로 CT 이미지를 평가하고 조직 부피를 추정합니다. 근육 및 지방 조직의 단면적은 키(cm2/m2)에 대해 정규화됩니다. 회귀 방정식을 사용하여 원시 데이터(cm2)에서 전신 매장량의 추정치를 생성합니다. 낮은 근력에 대한 컷오프는 CT 기반 근감소증과 암 환자의 비만 연구를 기반으로 합니다. 이전 연구에서 CT 스캔 후 근육 생검까지 걸리는 평균 시간은 18일이었습니다. Phenotyping은 또한 기본 신체적 특성(예: 체중, 키 등) 및 자가 보고된 신체 능력(설문지를 통해) 측정을 포함합니다.

근육 기능/신체 활동 평가: 신체 능력에 대한 객관적인 평가는 모든 환자를 대상으로 클리닉에서 수행됩니다. 여기에는 "timed up and go" 테스트와 "6분 도보" 테스트가 포함됩니다. 이 테스트는 문헌에서 잘 검증되었으며 평가자 간 신뢰도가 좋습니다. 그들이 환자 진료소 방문에 약간의 불편함을 가중시키지만 이것은 최소한입니다. 또한 방수 드레싱 아래 환자의 허벅지에 신체 활동 측정기를 적용합니다. 조사관은 암 환자에게 이 측정기를 검증했으며 작고(35x53x7mm) 가볍고(20g). 위와 같이 이전 연구에서 사용했을 때 환자들은 그것들이 눈에 잘 띄지 않는다는 것을 알았고 잘 견뎠습니다. 가능한 경우 조사관은 환자에게 수술 후 최대 12개월까지 수술 후 클리닉에서 "시간 초과 및 이동" 및 "6분 도보 테스트"를 반복하도록 요청할 것입니다.

환자 자가 보고 평가: 일상적인 클리닉에서 모든 환자는 신체 건강 및 이에 대한 인식에 대해 검증된 설문지를 작성해야 합니다. 이들은 동반이환의 중증도를 평가하고 허약함을 평가하는 데 사용될 것입니다. 예제 설문지에는 Scottish Co-morbidity Severity Score, Charlson Co-morbidity Index 및 Edmonton Frail Scale이 포함됩니다. 자가 보고식 식욕 및 기능과 관련된 다른 설문지가 고려되지만 전반적인 목표는 질문의 부담을 줄이고 설문지 피로를 방지하기 위해 선택 질문을 하는 것입니다. 조사관은 참가자에게 수술 후 최대 12개월까지 일상적인 클리닉에서 이러한 설문지를 반복하도록 요청할 것입니다.

혈액 및 소변 샘플링: 일상적인 NHS(National Health Service) 클리닉에서 모든 환자에게 혈액 및 소변 샘플을 제공하도록 요청합니다. 이것이 가능하지 않은 경우 연구팀은 일상적인 치료의 일환으로 삽입된 비뇨기 및 혈관 카테터를 통해 계획된 수술에서 전신 마취 상태에서 이러한 샘플을 채취할 수 있도록 허가를 요청할 것입니다. 수술 후 단계에서 수사관은 가능한 경우 참가자에게 수술 후 최대 12개월까지 일상적인 클리닉에서 혈액 및 소변 샘플을 제공하도록 요청할 것입니다.

근육 생검: 수술 시 모든 환자에 대해 수술의가 복직근 생검을 실시합니다. 이것은 계획된 수술을 위해 수행된 절개에서 가져오며 추가 절개가 필요하지 않습니다. 가능한 경우 비교를 위해 대퇴사두근(허벅지 근육)의 추가 바늘 생검도 샘플링됩니다. 샘플은 지방, 혈액/섬유 조직을 제거하고 액체 질소에서 급속 냉동하여 -80°C에서 보관합니다. 면역조직화학(IHC)의 경우 근육 표본을 코르크에 꿰매고 최적 절단 온도(OCT)로 처리한 다음 -80°C에서 보관하기 전에 냉각된 이소펜탄 용매(-190°C)로 낮춥니다.

지방 생검: 피하 지방의 생검 및 가능한 경우 내장 지방은 모든 환자의 수술 시 수술 의사가 수집합니다. 이 절차는 추가 절개가 필요하지 않습니다. 이 샘플은 액체 질소에서 급속 냉동되어 -80°C에서 보관됩니다.

종양 생검: 암 환자의 경우 절제 표본이 수술 중에 제거되면 병리학 실험실로 신선하게 옮겨져 의무 병리학자가 종양 부분을 회수합니다. 이는 임상 병기 결정을 손상시키지 않고 현재 절차에 따라 수행됩니다. 종양 샘플을 분취량으로 나누고 -80°C의 액체 질소에서 급속 동결합니다. 컨트롤 그룹에는 적용되지 않습니다.

반복 샘플링: 후속 NHS 클리닉에서 모든 환자는 반복 혈액 및 소변 샘플을 제공하도록 요청받게 되며, 이 샘플은 분취량으로 나누어지고 -80°C의 액체 질소에서 급속 냉동됩니다. 환자가 순응하는 경우, 그들은 또한 대퇴사두근의 단일 반복 바늘 생검을 제공하도록 요청받을 것입니다. 이것은 표준 무균 기술을 사용하여 국소 마취하에 클리닉에서 수행됩니다. 국소 마취제 주입과 관련된 약간의 불편함이 있지만 이는 일시적입니다. 근육 생검과 관련된 약간의 불편함도 있지만 이것은 수명이 짧고 과거에는 잘 견뎌왔습니다. 대퇴사두근 생검은 일상적인 후속 조치(수술 후 약 6-8개월)에만 요청됩니다. 가능한 경우 반복 혈액 및 소변 샘플은 연구 기간 동안 후속 정기 후속 약속에서 요청됩니다. 수사관은 이것이 수술 후 최대 12개월 동안 발생할 것으로 예상합니다.

면역조직화학(IHC) 및 웨스턴 블롯: 이들은 이전 간행물에 따라 수행됩니다. IHC의 경우 섬유 유형을 구별하기 위해 라미닌 및 미오신 중쇄 또는 lla에 대해 냉동 근육 섹션을 공동 염색합니다. 파라핀 섹션을 사용하고 염색할 수도 있습니다. 섬유 유형의 분포, 개별 섬유의 단면적 및 핵의 분포(재생 수준을 평가하기 위한 중앙 대 주변 위치)는 독점 이미지 분석 플랫폼에 의해 평가됩니다. 측정을 위한 잠재적 마커에는 autophagy의 경로 구성원(beclin, lamp, anti-thymocyte globulin(ATG)); 아폽토시스(폴리 아데노신 디포스페이트 리보스 폴리머라제(PARP), 카스파제-3); 산화 스트레스(nitrosylated 4-Hydroxynonenal(HNE) 및 ubiquitinated [K48, K63] 단백질); 세포 스트레스(NRF2KEAP1), 열충격 단백질(HSP), 소포체(ER)-스트레스 ); 염증(IkB 키나아제(IKK), 활성화된 B 세포의 핵 인자 카파-경쇄 강화제(NFkB)-9p65, p.38, 세포외 신호 관련 키나아제(erk)1/2, c-Jun N-말단 키나아제 (jnk)); 위성 세포 성숙(Paired Box (Pax)3, Pax7, Myogenic factor(MYF)5, M-cadherin); 근육형성(myogenin, desmin); sma/mothers against decapentaplegic(SMAD) (SMAD3, phosphoSMAD3); 및 P-셀렉틴.

C - 반응성 단백질(CRP) 분석: 전신 염증(SI)은 혈장 CRP 농도를 사용하여 평가될 것이며, 이는 에든버러 왕립 의료원(RIE)의 임상 화학부에서 자동화된 면역 탁도 측정법으로 측정될 것입니다.

이러한 분석은 에든버러 대학교와 국제 협력업체 구내에서 모두 수행됩니다. 대학 관리 외부로 이전된 모든 조직은 고유한 연구 식별자를 사용하여 완전히 익명화됩니다.

이 현재 연구는 영국 암 연구(Cancer Research United Kingdom, UK)가 자금을 지원하고 지원한 이전 연구의 연속입니다. 그 연구의 일환으로 조직 샘플을 수집했으며 그 중 일부는 대학에 남아 있습니다. 조사관은 이러한 나머지 샘플을 사용하여 코호트 크기를 증가시켜 조사관이 수집하는 새로운 샘플에 힘을 더하고 따라서 식별된 잠재적 바이오마커가 오류가 아니라 중요할 가능성을 높일 계획입니다. 또한 이러한 샘플을 분석에 포함하면 이전 프로젝트에 포함하여 이미 얻은 것 이상으로 가치가 추가됩니다.