Атрофия мышц при раке (MWIC) (MWIC)

Пациенты: будут набраны пациенты с раком верхних и нижних отделов желудочно-кишечного тракта для плановой резекционной хирургии. Пациенты будут определены клинической командой на соответствующем собрании многопрофильной группы, а затем к ним будут обращаться за информацией об исследовании и согласием в хирургической клинике. Подходящие по возрасту здоровые контроли, перенесшие плановую операцию по поводу доброкачественных состояний (например, грыжи) также будут набраны.

Фенотипирование пациента: компьютерная томография, выполняемая как рутинная часть диагностики и стадирования, будет использоваться для анализа состава тела. Все набранные пациенты будут проанализированы их компьютерные томограммы, где они присутствуют. Контрольные пациенты (т.е. грыжи) могут не проходить компьютерную томографию, но там, где они доступны, они будут проанализированы. Поперечное КТ-изображение третьего поясничного позвонка будет оцениваться, а объемы тканей оцениваться одним обученным наблюдателем. Площадь поперечного сечения мышц и жировой ткани будет приведена к росту (см2/м2). Оценки запасов всего тела будут получены из необработанных данных (см2) с использованием уравнений регрессии. Пороговые значения для низкой мышечной массы основаны на исследованиях саркопении на основе КТ и ожирения у онкологических больных. В предыдущем исследовании среднее время биопсии мышц после компьютерной томографии составляло 18 дней. Фенотипирование также будет включать измерение основных физических характеристик (например, веса, роста и т. д.) и самооценки физических способностей (с помощью анкет).

Мышечная функция/оценка физической активности: В клинике для всех пациентов будет проведена объективная оценка физических способностей. Это будет включать в себя тест «вставай и иди на время» и тест «6-минутная прогулка». Эти тесты были хорошо подтверждены в литературе и имеют хорошую межэкспертную надежность. В то время как они добавляют небольшое бремя неудобства к визиту пациента в клинику, это минимально. Кроме того, на бедро пациентов под водонепроницаемую повязку наложат измеритель физической активности. Исследователи проверили эти измерители на больных раком, они маленькие (35x53x7 мм) и легкие (20 г). При использовании в предыдущих исследованиях, как указано выше, пациенты сочли их ненавязчивыми и хорошо переносили. Там, где это возможно, исследователи будут просить пациентов повторить тесты «вставай и иди на время» и «6-минутный тест ходьбы» в послеоперационной клинике в течение 12 месяцев после операции.

Самостоятельная оценка пациента: в обычной клинике всех пациентов попросят заполнить утвержденные анкеты, касающиеся их физического здоровья и их восприятия этого. Они будут использоваться для оценки тяжести сопутствующих заболеваний, а также для оценки слабости. Примеры опросников включают шотландскую шкалу тяжести сопутствующих заболеваний, индекс сопутствующих заболеваний Чарлсона и шкалу Эдмонтона Frail. Будут рассмотрены и другие анкеты, относящиеся к самооценке аппетита и функции, но общая цель будет состоять в том, чтобы задать избранные вопросы, чтобы уменьшить нагрузку на вопросы и предотвратить утомление анкеты. Исследователи попросят участников повторить эти анкеты в обычной клинике в течение 12 месяцев после операции.

Образцы крови и мочи: в обычной клинике Национальной службы здравоохранения (NHS) всех пациентов попросят сдать образцы крови и мочи. Если это невозможно, исследовательская группа попросит разрешения взять эти образцы под общей анестезией во время плановой операции через мочевой и сосудистый катетеры, установленные в рамках обычного ухода. На послеоперационном этапе исследователи попросят участников предоставить образцы крови и мочи, если это возможно, в обычной клинике в течение 12 месяцев после операции.

Мышечная биопсия: Биопсия прямой мышцы живота будет взята во время операции оперирующим хирургом у всех пациентов. Это будет взято из разреза, сделанного для запланированной операции, и не требует дополнительных разрезов. По возможности для сравнения также будет взята дополнительная игольчатая биопсия четырехглавой мышцы бедра. Образцы будут очищены от жира, крови/фиброзной ткани, быстро заморожены в жидком азоте и сохранены при температуре -80°C. опускают в охлажденный изопентановый растворитель (-190°С) перед хранением при -80°С.

Биопсия жира: биопсия подкожного жира и, по возможности, висцерального жира будет взята оперирующим хирургом во время операции у всех пациентов. Эта процедура не требует дополнительных разрезов. Эти образцы будут быстро заморожены в жидком азоте и храниться при температуре -80°C.

Биопсия опухоли: у больных раком после удаления резекционного образца во время операции он будет доставлен свежим в патологоанатомическую лабораторию, где дежурный патологоанатом извлечет срезы опухоли. Это будет сделано без ущерба для клинической стадии и в соответствии с действующими процедурами. Образцы опухолей будут разделены на аликвоты и быстро заморожены в жидком азоте при температуре -80°C. Это не относится к контрольной группе.

Повторный отбор проб: в клинике NHS всех пациентов попросят предоставить повторные образцы крови и мочи, которые будут разделены на аликвоты и быстро заморожены в жидком азоте при температуре -80°C. Если пациент согласен, его также попросят провести однократную повторную игольную биопсию четырехглавой мышцы. Это будет выполнено в клинике под местной анестезией с использованием стандартной асептической техники. Существует некоторый дискомфорт, связанный с инъекцией местного анестетика, но он преходящий. Существует также некоторый дискомфорт, связанный с биопсией мышц, но он непродолжителен и в прошлом хорошо переносился. Биопсия квадрицепса будет запрошена только при плановом последующем наблюдении (примерно через 6-8 месяцев после операции). По возможности повторные образцы крови и мочи будут запрошены при последующих плановых контрольных посещениях на протяжении всего исследования. Исследователи предполагают, что это произойдет в течение 12 месяцев после операции.

Иммуногистохимия (IHC) и вестерн-блоты: они будут выполняться в соответствии с предыдущими публикациями. Для IHC замороженные срезы мышц будут окрашиваться совместно на ламинин и тяжелую цепь миозина или lla, чтобы различать тип волокна. Парафиновые срезы также можно использовать и окрашивать. Распределение типов волокон, площадь поперечного сечения отдельных волокон и распределение ядер (центральное или периферическое расположение для оценки уровня регенерации) будут оцениваться с помощью запатентованной платформы анализа изображений. Потенциальные маркеры для измерения будут включать пути участников аутофагии (беклин, лампа, антитимоцитарный глобулин (АТГ)); апоптоз (полиаденозиндифосфатрибозополимераза (PARP), каспаза-3); окислительный стресс (нитрозилированный 4-гидроксиноненаль (HNE) и убиквитинированные [K48, K63] белки); клеточный стресс (ядерный фактор (эритроидного происхождения 2)-подобный 2 Келх-подобный белок эритроидного происхождения с гомологичным белком 1 Cap 'N' Collar (NRF2KEAP1), белок теплового шока (HSP), стресс эндоплазматического ретикулума (ER) ); воспаление (киназа IkB (IKK), ядерный фактор каппа-легкая цепь-энхансер активированных В-клеток (NFkB)-9p65, стр.38, киназа, связанная с внеклеточным сигналом (erk)1/2, N-концевая киназа c-Jun (жнк)); созревание сателлитных клеток (Paired Box (Pax)3, Pax7, миогенный фактор (MYF)5, М-кадгерин); миогенез (миогенин, десмин); сма/матери против декапентаплегии (SMAD) (SMAD3, фосфоSMAD3); и Р-селектин.

C - анализ реактивного белка (CRP): системное воспаление (SI) будет оцениваться с использованием концентрации CRP в плазме, которая будет измерена с помощью автоматизированного иммунотурбидиметрического анализа Отделом клинической химии Королевской больницы Эдинбурга (RIE).

Эти анализы будут проводиться как в Эдинбургском университете, так и в помещениях международных сотрудников. Любая ткань, переданная из-под опеки Университета, будет полностью анонимной с использованием уникальных идентификаторов исследования.

Это текущее исследование является продолжением предыдущего исследования, финансируемого и поддерживаемого Cancer Research United Kingdom (Великобритания). В рамках этого исследования были собраны образцы тканей, некоторые из которых остались в университете. Исследователи намерены использовать эти оставшиеся образцы для увеличения мощности новых образцов, которые собирают Исследователи, за счет увеличения размера когорты и, таким образом, вероятности того, что любой выявленный потенциальный биомаркер будет значимым, а не ошибочным. Кроме того, включение этих образцов в анализ повысит их ценность сверх того, что уже было получено за счет включения в предыдущий проект.