母親の肥満、母乳組成、乳児の成長 ((MILK))

一般的な研究デザイン 分娩後少なくとも 1 か月まで乳児を完全に母乳で育てる 360 人の非糖尿病の母親の前向き観察妊娠コホートが、妊娠第 2 期に募集されます。標準体重、太りすぎ、肥満の女性が同数。 女性は2つのスタディセンター（オクラホマ州オクラホマシティのオクラホマ大学健康科学センターとセントポール/ミネアポリス、ミネソタ州セントポールのヘルスパートナー研究財団）で募集され、母親と乳児の食事、体組成、代謝の健康状態が前向きに追跡されます。 、特定の目的 1 および 2 の産後 3 および 6 か月。特定の目的 3 では、これらの母子ペアの 60 のサブセット「焦点を絞った母親」(30 人の OB および 30 人の NW の母親) が、追加の生物標本のために採用されます。 2 か月と 6 か月の乳サンプルを含む収集、DXA を使用した母体組成の変化、乳児 DXA、一連の乳サンプルのメタボロミクス比較、および 6 ヶ月ではなく 12 までのフォローアップ。

データ収集要素:

母体の肥満。 母体の妊娠前の BMI 状態 (NW、OW、OB) は、研究を強化するために使用される主要な曝露です。 妊娠前の BMI は、電子医療記録 (EMR) からの最初の (ベースライン) クリニックの体重 (最終月経後 90 日以内) と、研究センターへの母親の最初の訪問時に研究スタッフによって測定された身長を使用して決定されます。 . BMI は、低体重 (BMI <18.5)、標準体重 (BMI 18.5 - <25)、過体重 (BMI 25 - <30)、および肥満 (BMI ≥30 kg/m2) に分類されます。

妊娠中の体重増加 (GWG) および産後の体重減少/保持: 合計 GWG は、分娩時体重とベースライン時体重の差として計算されます (上記に記載)。 出産時の体重が利用できない場合は、EMR の最後の出生前体重、生後 14 日以内が使用されます。 学期固有の GWG は、EMR から計算されます。 GWG は、IOM 2009 ガイドラインに従って、継続的かつカテゴリ別のエクスポージャー (過剰、適切、および不十分) として使用されます。 初期のPP減量（出産から産後1ヶ月まで）と、後期のPP減量で1ヶ月から3ヶ月PPを計算します。 母体の体重と母乳アディポサイトカイン レベルの 0 ～ 1 か月および 1 ～ 3 か月の同時変化を調べ、PP 減量の増加（体重維持率の低下）がミルク アディポサイトカインのレベルの低下と関連していると仮定します。

搾乳: 乳成分の変化は 1 ～ 3 か月で評価されます。 完全母乳育児の定義: 研究スタッフは、すべての乳児が完全に母乳で育てられていることを確認します (つまり、 人工乳なし、水以外の液体なし、固形物なし）、少なくとも 1 か月の来院の 14 日前までに、完全母乳育児を 3 か月まで継続する予定です。 完全母乳育児には、さく乳した母乳と乳房からの母乳の任意の組み合わせが含まれます。

母乳収集プロトコル: 母親と子供は、産後 1 か月と 3 か月 (± 5 日) の午前 8:00 から 10:00 の間、最後の授乳から少なくとも 1 時間半後に、母親が母乳を飲んでいる間に研究施設に報告します。少なくとも1時間絶食。 高感度スケールを使用して授乳前の乳児の体重を取得し、母親が自発的に満足するまで両方の乳房から自由に授乳することを奨励し、授乳後の乳児の体重を取得します (差 = 乳量)。 アンケート情報、母体の人体測定、および乳児の体組成データが収集され、2 時間後、母親は電動さく乳器 (Medela, Inc.、研究チーム提供) を使用して 1 つの搾乳サンプルを提供します。 母乳を混合し、分注し、-80°C で保存します。

ミルク アディポサイトカイン アッセイ: ミルク サンプルを冷蔵庫で解凍し、ボルテックスします。 4℃、3,000gで10分間遠心分離することにより、乳脂肪を水相から分離する。 得られた脱脂乳は、インスリン、IGF-1/BP、高分子量アディポネクチン、ビスファチン、レプチン、IL-1β、IL-6、IL-10、および TNF-α の市販のイムノアッセイ キットを使用してアッセイされます。 グルコースは、グルコースオキシダーゼ法によって測定されます。 サンプルを保存する方法で追加のサイトカインおよび増殖因子濃度 (例えば、インターロイキン、インターフェロン、TGF-β) を調べるために、マルチプレックスアッセイ (EMD Millipore、マサチューセッツ州ビレリカ) および Luminex 200 マルチプレックスアナライザーが採用されます。

特定の目的 1 のデータ分析: 牛乳のアディポサイトカイン (連続従属変数) のそれぞれについて、別々の混合効果回帰モデル (一連の牛乳データを説明するため) を構築し、最初に 1 と 3 の両方で牛乳 IL-6 の粗結合をテストします。 -各母親の肥満変数（過剰なGWG、妊娠前のBMIステータス、総GWG、三半期固有のGWG、早期および後期のPP減量）、および最小調整モデル（乳児の性別および妊娠期間、スタディセンターも調整）を使用した月(OK または MN)、母体の年齢、出産歴、民族性、および母体の社会経済的地位)、そして最後に、潜在的な交絡因子であると判断された変数を含む完全に調整された回帰モデル。 二次分析では、相互作用項を追加することにより、母親の肥満関連の影響の修正の可能性が評価されます。 交互作用項が有意な場合、層別分析が行われます。

特定の目的のためのデータ収集 2 幼児の体組成。 全身組成は、空気置換プレチスモグラフィー（ADP）を使用して測定されます。 ピーポッド (v 3.1.1)、 予測方程式を使用して総体脂肪 (FM) と無脂肪量 (FFM) を決定する、迅速で有効な信頼性の高い (% 脂肪 CV% < 2.5%) 総体容積推定法。 ミネソタ大学とオクラホマ大学の ADP は同じです (製造元、モデル、およびソフトウェアのバージョンが同じです)。

乳児のインスリン分泌および6ヶ月での抵抗性:インスリン分泌のマーカーとしてのC-ペプチドまたは結合ペプチドを収集する。 血清 C-ペプチドは、膵臓からインスリンとして等モル量で分泌されますが、溶血後の分解を受けにくいため、より安定した測定値です。 C-ペプチドは、HAPO (Hyperglycemia and Adverse Pregnancy Out-come) 研究で胎児ベータ細胞機能のマーカーとして使用され、母親の肥満と妊娠糖尿病が妊娠と乳児の有害転帰に及ぼす影響を評価しました。 インスリン抵抗性は、ホメオスタシス モデル評価 (HOMA-IR) を使用して推定されます。 私たちの研究所で日常的に行われているように、スタディセンターへの6か月の訪問時に乳児のヒールスティックを介して血液が得られ、約1.0 ccの血液が得られます。 全血は、当社の研究室で遠心分離するまで氷上に保管し、ELISA (Millipore、ビレリカ、マサチューセッツ州、アッセイ内 CV = 5 %; アッセイ間 CV = 6%)。 C-ペプチドの解釈には、グルコースオキシダーゼ法を使用して同じ血液サンプルで測定される血糖値が必要です。

牛乳の主要栄養素含有量: 総脂肪含有量はモジョニエ法によって測定されます。脂肪酸組成は、国際酪農連盟 (IDF) の方法を使用したガスクロマトグラフィーによって評価されます。 その他の標準的な方法では、全窒素、灰分、水分、および炭水化物を定量化します。

乳児の食欲、満腹感、および食事: 1 か月、3 か月、および 6 か月の幼児の摂食実践研究 II で使用される乳児の食事アンケートの短縮版は、乳児の食事摂取に関する母親のレポートを評価します。 幼児の食欲に対する母親の認識は、赤ちゃんの摂食行動アンケートを使用して測定されます。 乳児の睡眠: Sadeh Brief Infant Sleep Questionnaire は、アクティグラフィに対して検証されており、訪問ごとに睡眠行動を評価するために使用されます。 その他の潜在的な交絡因子: 特定の目的 1 を参照してください。

データ分析 (特定の目的 2) 統計分析: 包括的な主要な仮説は、牛乳のアディポサイトカイン濃度は、生後 1 か月から 6 か月までの体組成の変化と、生後 6 か月での C ペプチドまたは HOMA-IR の上昇と関連しているというものです。潜在的な交絡因子とは無関係です。 仮説 2.a1 の例: 生後 1 か月および/または 3 か月での食欲抑制ホルモン レプチンのレベルの上昇は、特に 1 ～ 6 か月間の FFM 増加の低下を反映して、乳児の体重増加の低下と関連します。 これと関連する仮説に対処するための主要な分析アプローチとして、混合効果の線形およびロジスティック回帰を使用します。 成長と体組成のデータはシリアル (0 [体重]、1、3、および 6 か月) であり、被験者内の反復測定の共分散構造をモデル化し、被験者固有のモデル化するインターセプトとスロープ。 牛乳アディポサイトカインは、関心のある独立変数です。 乳児の成長やその他の結果との個々の関係は線形ではない可能性があるため、牛乳アディポサイトカインの五分位数または四分位数、および連続的に分布する変数を調べます。 複数のミルクアディポサイトカインが最終モデルに同時に含まれ、乳児の転帰に対する独立した効果をテストし、それらの総効果を評価します（分散の説明）。