Материнское ожирение, состав грудного молока и рост младенцев ((MILK))

Общий дизайн исследования Проспективная группа беременных, в которую будут входить наблюдатели, из 360 матерей, не страдающих диабетом, которые кормят своих детей исключительно грудным молоком по крайней мере до 1 месяца после родов, будет набрана во втором триместре беременности с широким диапазоном ИМТ матерей до беременности, с равным количеством женщин с нормальным весом, избыточным весом и ожирением. Женщины будут набраны в двух исследовательских центрах (Центр медицинских наук Университета Оклахомы в Оклахома-Сити, Оклахома и Исследовательский фонд Health Partners в Сент-Поле/Миннеаполисе, Миннесота), при этом питание матери и ребенка, состав тела и метаболическое здоровье отслеживаются проспективно в 1 , через 3 и 6 месяцев после родов в Конкретных целях 1 и 2. В Конкретной цели 3 подмножество из 60 таких пар мать/младенец «Матери в фокусе» (30 OB и 30 NW матерей) будут набраны для дополнительных биообразцов. сбор, включая образцы молока в возрасте 2 и 6 месяцев, изменения состава тела матери с использованием DXA, DXA младенцев, метаболомическое сравнение серийных образцов молока и последующее наблюдение до 12, а не 6 месяцев.

Элементы сбора данных:

Материнское ожирение. Состояние ИМТ матери до беременности (NW, OW, OB) является основным воздействием, используемым для исследования. ИМТ до беременности будет определяться с использованием первого (исходного) клинического веса из электронных медицинских карт (EMR) (не более чем через 90 дней после последней менструации) и роста, измеренного исследовательским персоналом при первом визите матери в наши исследовательские центры. . ИМТ будет классифицироваться как недостаточная масса тела (ИМТ <18,5), нормальная масса тела (ИМТ 18,5 - <25), избыточная масса тела (ИМТ 25 - <30) и ожирение (ИМТ ≥30 кг/м2).

Прибавка в весе во время беременности (GWG) и послеродовая потеря/сохранение веса: Общий GWG будет рассчитываться как разница между весом при родах и исходным весом (как указано выше). Если вес при родах недоступен, будет использоваться последний пренатальный вес в EMR, ≤14 дней от рождения. GWG для конкретного триместра будет рассчитываться на основе EMR. GWG будет использоваться как непрерывное и как категорическое воздействие (чрезмерное, уместное и недостаточное, в соответствии с рекомендациями МОМ 2009 г.). Будет рассчитана ранняя потеря веса PP (от родов до 1 месяца после родов) и более поздняя потеря веса PP от 1 месяца до 3 месяцев PP. Будут изучены одновременные изменения веса матери и уровня адипоцитокинов в молоке в возрасте от 0 до 1 месяца и от 1 до 3 месяцев, и будет выдвинута гипотеза о том, что большая потеря веса PP (меньшее удержание веса) связана с более низкими уровнями адипоцитокинов в молоке.

Сбор молока: Изменения в составе молока будут оцениваться в возрасте от 1 до 3 месяцев. Определение исключительно грудного вскармливания: Исследовательский персонал подтвердит, что все младенцы находятся на исключительно грудном вскармливании (т.е. никакой смеси, никакой жидкости, кроме воды, и никакой твердой пищи) по крайней мере за 14 дней до визита в возрасте 1 месяца и планируете продолжать исключительно грудное вскармливание до 3 месяцев. Исключительно грудное вскармливание будет включать любую комбинацию сцеженного грудного молока и грудного молока, вскармливаемого через грудь.

Протокол сбора грудного молока: Мать и ребенок явятся в исследовательский центр через 1 и 3 месяца (± 5 дней) после родов, с 8:00 до 10:00, не менее чем через 1,5 часа после последнего кормления и пока мать голодал не менее 1 часа. Вес младенца перед кормлением будет получен с использованием шкалы высокой чувствительности, матери будет предложено кормить ребенка вволю из обеих грудей до тех пор, пока он не будет удовлетворен, и будет получен вес младенца после кормления (разница = выход молока). Будут собраны данные анкеты, антропометрия матери и данные о составе тела младенца, а через 2 часа мать предоставит образец сцеживания одной груди с помощью электрического молокоотсоса (Medela, Inc., предоставлен исследовательской группой). Грудное молоко смешивают, делят на аликвоты и хранят при температуре -80°C.

Анализ адипоцитокинов молока: Образцы молока размораживают в холодильнике и встряхивают. Молочный жир отделяют от водной фазы центрифугированием при 3000g в течение 10 минут при 4°C. Полученное обезжиренное молоко будет анализироваться с использованием имеющихся в продаже наборов для иммуноанализа инсулина, IGF-1/BP, высокомолекулярного адипонектина, висфатина, лептина, IL-1β, IL-6, IL-10 и TNF-α. Глюкозу измеряют глюкозооксидазным методом. Для исследования дополнительных концентраций цитокинов и факторов роста (например, интерлейкинов, интерферонов, TGF-β) таким образом, чтобы сохранить образец, будет использоваться мультиплексный анализ (EMD Millipore, Billerica, MA) и анализатор Luminex 200 Multiplex.

Анализ данных для конкретной цели 1: Для каждого из адипоцитокинов молока (непрерывные зависимые переменные) будут построены отдельные регрессионные модели со смешанными эффектами (для учета серийных данных о молоке), сначала тестируя необработанные ассоциации IL-6 молока как в 1, так и в 3 - месяцев с каждой переменной материнского ожирения (чрезмерная GWG, статус ИМТ до беременности, общая GWG, специфичная для триместра GWG, ранняя и более поздняя потеря веса PP), а затем минимально скорректированные модели (также с поправкой на пол ребенка и гестационный возраст, исследовательский центр (OK или MN), возраст матери, паритет, этническая принадлежность и социально-экономический статус матери) и, наконец, полностью скорректированные регрессионные модели, включающие те переменные, которые определены как потенциальные искажающие факторы. Во вторичных анализах возможный эффект модификации ассоциаций материнского ожирения будет оцениваться путем добавления условий взаимодействия. Если срок взаимодействия значителен, будет проведен стратифицированный анализ.

Сбор данных для конкретной цели 2 Состав тела младенца. Общий состав тела будет измеряться с помощью плетизмографии с вытеснением воздухом (ADP), т.е. Стручок гороха (v 3.1.1), быстрый, достоверный, высоконадежный (% CV% жира < 2,5% в наших руках) метод оценки общего объема тела, на основе которого определяется общий жир тела (FM) и безжировая масса (FFM) с использованием прогнозных уравнений. И в Университете Миннесоты, и в Университете Оклахомы один и тот же ADP (один и тот же производитель, модель и версии программного обеспечения).

Секреция и резистентность к инсулину у младенцев в возрасте 6 месяцев: будет собран С-пептид или соединительный пептид в качестве маркера секреции инсулина. С-пептид сыворотки секретируется поджелудочной железой в эквимолярных количествах в виде инсулина, но является более стабильным показателем, поскольку не подвержен деградации после гемолиза. С-пептид использовался в качестве маркера функции бета-клеток плода в исследовании HAPO (гипергликемия и неблагоприятный исход беременности) для оценки влияния материнского ожирения и гестационного диабета на неблагоприятные исходы беременности и новорожденных. Резистентность к инсулину будет оцениваться с использованием модели оценки гомеостаза (HOMA-IR). Кровь будет получена через пяточную палочку у младенца во время 6-месячного визита в исследовательский центр, как это обычно делается в наших лабораториях, что дает ~ 1,0 см3 крови. Цельная кровь будет храниться на льду до центрифугирования в наших лабораториях, а аликвоты 0,5 мл сыворотки будут храниться при температуре -80°C до отправки в лабораторию доктора Филдса для анализа с помощью ELISA (Millipore, Billerica, MA; CV внутри анализа = 5). %; CV между анализами = 6%). Для интерпретации С-пептида требуется уровень глюкозы в крови, который будет измерен в том же образце крови с использованием метода глюкозооксидазы.

Содержание макронутриентов в молоке: Общее содержание жира будет измеряться методом Можонье. Состав жирных кислот будет оцениваться с помощью газовой хроматографии с использованием методов Международной молочной федерации (IDF). Другие стандартные методы будут определять количество общего азота, золы, влаги и углеводов.

Аппетит, сытость и диета младенцев: Сокращенные версии вопросников по питанию младенцев, использованные в Исследовании практики кормления младенцев II в возрасте 1, 3 и 6 месяцев, будут оценивать отчеты матерей о рационе питания младенцев. Восприятие материнским аппетитом младенца будет измеряться с помощью Опросника детского пищевого поведения. Сон младенцев: Краткий опросник Саде о сне младенцев был подтвержден актиграфией и будет использоваться для оценки поведения во сне при каждом посещении. Дополнительные потенциальные помехи: см. Конкретную цель 1.

Анализ данных (конкретная цель 2) Статистический анализ. Общая первичная гипотеза состоит в том, что концентрация адипоцитокинов в молоке будет связана с изменением состава тела в возрасте от 1 до 6 месяцев, а также с повышенным уровнем С-пептида или HOMA-IR в возрасте 6 месяцев. независимо от потенциальных помех. Пример Гипотеза 2.a1: Более высокие уровни гормона лептина, подавляющего аппетит, в возрасте 1 и/или 3 месяцев будут связаны с более низкой прибавкой веса у младенцев, отражая, в частности, более низкую прибавку FFM в возрасте от 1 до 6 месяцев. Мы будем использовать линейную и логистическую регрессию со смешанными эффектами в качестве основного подхода к анализу для решения этой и связанных с ней гипотез. Данные о росте и составе тела будут серийными (0 [для веса], 1, 3 и 6 месяцев), которые будут изучены с использованием моделей смешанных эффектов, которые моделируют ковариационную структуру повторных измерений в пределах субъекта и позволяют для конкретного субъекта пересечение и уклоны, подлежащие моделированию. Молочные адипоцитокины представляют собой представляющие интерес независимые переменные. Поскольку их индивидуальная взаимосвязь с ростом младенцев и другими исходами может быть нелинейной, будут исследованы квинтили или квартили адипоцитокинов молока, а также постоянно распределенные переменные. Несколько молочных адипоцитокинов будут одновременно включены в окончательные модели, чтобы проверить их независимое влияние на исходы у младенцев и оценить их совокупное влияние (вариантность объяснена).