Otyłość matki, skład mleka matki i wzrost niemowlęcia ((MILK))

Ogólny projekt badania Prospektywna obserwacyjna kohorta ciążowa 360 matek bez cukrzycy, które karmią swoje dzieci wyłącznie piersią do co najmniej 1 miesiąca po porodzie, zostanie zrekrutowana w drugim trymestrze ciąży, w szerokim zakresie BMI matki przed ciążą, z równą liczbą kobiet z prawidłową masą ciała, z nadwagą i otyłością. Kobiety będą rekrutowane w dwóch ośrodkach badawczych (University of Oklahoma Health Sciences Center w Oklahoma City, OK i Health Partners Research Foundation w Saint Paul/Minneapolis, MN). , 3 i 6 miesięcy po porodzie w Celach Szczegółowych 1 i 2. W Celu Szczegółowym 3 podzbiór 60 takich diad matka/niemowlę „Matki w centrum uwagi” (30 matek OB i 30 NW) zostanie zwerbowanych w celu uzyskania dodatkowych próbek biologicznych pobieranie, w tym próbki mleka w wieku 2 i 6 miesięcy, zmiany składu ciała matki za pomocą DXA, DXA niemowlęcia, porównanie metabolomiczne seryjnych próbek mleka i obserwacja do 12, a nie 6 miesięcy.

Elementy gromadzenia danych:

Otyłość matki. Status BMI matki przed ciążą (NW, OW, OB) to podstawowa ekspozycja wykorzystana do zasilania badania. BMI przed ciążą zostanie określone na podstawie pierwszej (wyjściowej) wagi klinicznej z elektronicznej dokumentacji medycznej (EMR) (nie więcej niż 90 dni po ostatniej miesiączce) oraz wzrostu zmierzonego przez personel badawczy podczas pierwszej wizyty matki w naszych ośrodkach badawczych . BMI zostanie sklasyfikowany jako niedowaga (BMI <18,5), prawidłowa waga (BMI 18,5 - <25), nadwaga (BMI 25 - <30) i otyłość (BMI ≥30 kg/m2).

Przyrost masy ciała w ciąży (GWG) i utrata/utrzymanie masy ciała po porodzie: Całkowity GWG zostanie obliczony jako różnica między masą urodzeniową a masą wyjściową (jak udokumentowano powyżej). Jeśli waga przy porodzie nie jest dostępna, zostanie użyta ostatnia waga prenatalna w EMR, ≤14 dni od urodzenia. GWG specyficzne dla trymestru zostanie obliczone na podstawie EMR. GWG będzie stosowany jako ekspozycja ciągła i kategoryczna (nadmierna, odpowiednia i niewystarczająca, zgodnie z wytycznymi IOM 2009. Wczesna utrata masy ciała PP (od porodu do 1 miesiąca po porodzie) oraz późniejsza utrata masy ciała PP od 1 miesiąca do 3 miesięcy PP zostanie obliczona. Zbadane zostaną równoczesne zmiany masy ciała matki i poziomów adipocytokin w mleku w okresie od 0 do 1 miesiąca i od 1 do 3 miesięcy, przy założeniu, że większa utrata masy PP (niższa retencja masy ciała) jest związana z niższymi poziomami adipocytokin w mleku.

Pobieranie mleka: Zmiany w składzie mleka będą oceniane od 1 do 3 miesięcy. Definicja wyłącznego karmienia piersią: Personel badania potwierdzi, że wszystkie niemowlęta były karmione wyłącznie mlekiem matki (tj. bez mleka modyfikowanego, bez płynów innych niż woda i bez pokarmów stałych) co najmniej 14 dni przed wizytą w 1 miesiącu i planuje kontynuować karmienie wyłącznie piersią do 3 miesięcy. Wyłączne karmienie piersią obejmuje dowolną kombinację odciągniętego mleka matki i mleka matki karmionego piersią.

Protokół pobierania pokarmu matki: Matka i dziecko zgłoszą się do ośrodka badawczego 1 i 3 miesiące (± 5 dni) po porodzie, w godzinach 8:00-10:00, co najmniej 1,5 godziny od ostatniego karmienia i podczas pościć co najmniej 1 godzinę. Waga niemowlęcia przed karmieniem zostanie uzyskana przy użyciu skali o wysokiej czułości, matka będzie zachęcana do karmienia dziecka ad libitum z obu piersi, aż do dobrowolnego zaspokojenia, a waga niemowlęcia zostanie uzyskana po karmieniu (różnica = produkcja mleka). Zostaną zebrane informacje z kwestionariusza, antropometria matki i dane dotyczące składu ciała niemowlęcia, a 2 godziny później matka dostarczy pojedynczą próbkę odciągania piersi za pomocą elektrycznego laktatora (Medela, Inc., dostarczonego przez zespół badawczy). Mleko matki zostanie zmieszane, podzielone na porcje i przechowywane w temperaturze -80°C.

Testy adipocytokin w mleku: Próbki mleka zostaną rozmrożone w lodówce i worteksowane. Tłuszcz mleczny zostanie oddzielony od fazy wodnej przez wirowanie przy 3000 g przez 10 minut w temperaturze 4°C. Otrzymane odtłuszczone mleko będzie badane przy użyciu dostępnych w handlu zestawów immunologicznych do oznaczania insuliny, IGF-1/BP, adiponektyny o wysokiej masie cząsteczkowej, wisfatyny, leptyny, IL-1β, IL-6, IL-10 i TNF-α. Glukoza będzie mierzona metodą oksydazy glukozowej. Aby zbadać dodatkowe stężenia cytokin i czynników wzrostu (np. interleukin, interferonów, TGF-β) w sposób oszczędzający próbkę, zostanie zastosowany test multipleksowy (EMD Millipore, Billerica, MA) i analizator Luminex 200 Multiplex.

Analiza danych dla celu szczegółowego 1: Dla każdej z adipocytokin mleka (ciągłe zmienne zależne) zostaną skonstruowane oddzielne modele regresji efektów mieszanych (w celu uwzględnienia seryjnych danych dotyczących mleka), najpierw testując surowe powiązania IL-6 w mleku zarówno w 1, jak i 3 -miesięcy z każdą zmienną otyłości matki (nadmierny GWG, status BMI przed ciążą, całkowity GWG, specyficzny dla trymestru GWG, wczesna i późna utrata masy PP), a następnie modele minimalnie dostosowane (również dostosowujące się do płci niemowlęcia i wieku ciążowego, centrum badawcze (OK lub MN), wiek matki, parytet, pochodzenie etniczne i status społeczno-ekonomiczny matki), a wreszcie w pełni dostosowane modele regresji, w tym zmienne określone jako potencjalne czynniki zakłócające. W analizach wtórnych możliwa modyfikacja wpływu powiązań z otyłością matki zostanie oceniona poprzez dodanie terminów interakcji. Jeśli termin interakcji jest istotny, zostaną przeprowadzone analizy warstwowe.

Zbieranie danych dla określonego celu 2 Skład ciała niemowlęcia. Całkowity skład ciała zostanie zmierzony za pomocą pletyzmografii wypierania powietrza (ADP), tj. strąk grochu (v 3.1.1), szybka, trafna, wysoce niezawodna (% tłuszczu CV% < 2,5% w naszych rękach) metoda szacowania całkowitej objętości ciała, z której określa się całkowitą zawartość tkanki tłuszczowej (FM) i beztłuszczową masę ciała (FFM) za pomocą równań prognostycznych. Zarówno University of Minnesota, jak i University of Oklahoma mają ten sam ADP (ten sam producent, ten sam model i wersje oprogramowania).

Wydzielanie insuliny i oporność niemowlęcia w wieku 6 miesięcy: zostanie zebrany peptyd C lub peptyd łączący jako marker wydzielania insuliny. Peptyd C w surowicy jest wydzielany w ilościach równomolowych przez trzustkę jako insulina, ale jest bardziej stabilnym środkiem, ponieważ nie jest podatny na degradację po hemolizie. Peptyd C był używany jako marker funkcji płodowych komórek beta w badaniu HAPO (hiperglikemia i niepożądany wynik ciąży) w celu oceny wpływu otyłości matki i cukrzycy ciążowej na niepożądaną ciążę i wyniki noworodka. Oporność na insulinę zostanie oszacowana za pomocą oceny modelu homeostazy (HOMA-IR). Krew zostanie pobrana z pięty niemowlęcia podczas 6-miesięcznej wizyty w ośrodku badawczym, zgodnie z rutyną w naszych laboratoriach, co daje około 1,0 cm3 krwi. Pełna krew będzie przechowywana w lodzie do czasu odwirowania w naszych laboratoriach, a 0,5 ml surowicy zostanie podzielone na porcje w temperaturze -80 C do czasu wysłania do laboratorium dr Fieldsa w celu analizy przy użyciu testu ELISA (Millipore, Billerica, MA; CV wewnątrz testu = 5 %; CV między testami = 6%). Interpretacja C-peptydu wymaga poziomu glukozy we krwi, który zostanie zmierzony w tej samej próbce krwi metodą oksydazy glukozy.

Zawartość makroskładników w mleku: Całkowita zawartość tłuszczu zostanie zmierzona metodą Mojonniera. Skład kwasów tłuszczowych zostanie oceniony metodą chromatografii gazowej przy użyciu metod Międzynarodowej Federacji Mleczarskiej (IDF). Inne standardowe metody oznaczają ilościowo całkowity azot, popiół, wilgoć i węglowodany.

Apetyt, sytość i dieta niemowląt: Skrócone wersje kwestionariuszy dotyczących diety niemowląt stosowanych w badaniu II dotyczącym praktyk żywieniowych niemowląt w wieku 1 miesiąca, 3 miesięcy i 6 miesięcy będą oceniać raporty matek dotyczące spożycia pokarmu przez niemowlęta. Postrzeganie przez matkę apetytu niemowlęcia będzie mierzone za pomocą Kwestionariusza zachowań żywieniowych niemowląt. Sen niemowlęcia: Krótki kwestionariusz snu niemowlęcia Sadeh został zweryfikowany na podstawie aktygrafii i będzie używany do oceny zachowania podczas snu podczas każdej wizyty. Dodatkowe potencjalne czynniki zakłócające: zob. Cel szczegółowy 1.

Analiza danych (Cel szczegółowy 2) Analiza statystyczna: Nadrzędna hipoteza pierwotna jest taka, że ​​stężenie adipocytokin w mleku będzie związane ze zmienionym składem ciała w wieku od 1 do 6 miesięcy oraz z podwyższonym stężeniem peptydu C lub HOMA-IR w wieku 6 miesięcy, niezależnie od potencjalnych zakłóceń. Przykładowa hipoteza 2.a1: Wyższe poziomy leptyny, hormonu tłumiącego apetyt, w 1. i/lub 3. miesiącu będą wiązać się z niższym przyrostem masy ciała niemowlęcia, odzwierciedlając w szczególności niższy przyrost FFM od 1. do 6. miesiąca życia. Użyjemy regresji liniowej i logistycznej z efektami mieszanymi jako podstawowego podejścia do analizy, aby odnieść się do tej i powiązanych hipotez. Dane dotyczące wzrostu i składu ciała będą seryjne (0 [dla wagi], 1, 3 i 6 miesięcy), które zostaną zbadane przy użyciu modeli efektów mieszanych, które modelują strukturę kowariancji powtarzanych pomiarów w obrębie podmiotu i umożliwiają specyficzne dla podmiotu punkt przecięcia i nachylenia, które mają być modelowane. Adipocytokiny mleka są niezależnymi zmiennymi będącymi przedmiotem zainteresowania. Ponieważ ich indywidualne związki ze wzrostem niemowląt i innymi wynikami mogą nie być liniowe, zbadane zostaną kwintyle lub kwartyle adipocytokin mleka, jak również zmienne o ciągłym rozkładzie. Wiele adipocytokin mleka zostanie włączonych jednocześnie do ostatecznych modeli, aby przetestować ich niezależny wpływ na wyniki niemowląt i ocenić ich łączny wpływ (wyjaśnienie wariancji).