Anyai elhízás, az anyatej összetétele és a csecsemő növekedése ((MILK))

Általános vizsgálati terv Egy 360 nem cukorbeteg anyából álló, csecsemőjüket a szülés után legalább 1 hónapig kizárólag szoptató anyából álló, megfigyeléses terhességi csoportot vesznek fel a terhesség második trimeszterében, az anyák terhesség előtti BMI-jének széles skáláján. egyenlő számú normál testsúlyú, túlsúlyos és elhízott nővel. A nőket két tanulmányi központban (Oklahoma Egyetem Egészségtudományi Központ Oklahoma Cityben, OK és Health Partners Research Foundation, Saint Paul/Minneapolis, MN) toborozzák, az anyák és a csecsemők étrendjét, testösszetételét és anyagcsere-egészségügyi állapotát előretekintően 1 órakor követik. , 3 és 6 hónappal a szülés után az 1. és 2. specifikus célban. A 3. specifikus célban a „Fókuszban lévő anyák” anya/csecsemő diádok 60 fős alcsoportját (30 OB és 30 ÉNy-i anya) veszik fel további biominta készítésére. gyűjtés, beleértve a 2 és 6 hónapos tejmintákat, az anyai testösszetétel változásait DXA használatával, a csecsemő DXA-t, a sorozatos tejminták metabolomikus összehasonlítását és a 6 hónapos helyett 12 hónapos követést.

Adatgyűjtési elemek:

Anyai zsírosodás. Az anyai terhesség előtti BMI állapot (NW, OW, OB) az elsődleges expozíció, amelyet a vizsgálathoz használtak. A terhesség előtti BMI-t az elektronikus orvosi nyilvántartásból (EMR) származó első (alapvonali) klinikai súlyok (legfeljebb 90 nappal az utolsó menstruáció után) és a kutatószemélyzet által az anya kutatóközpontjainkban tett első látogatásakor mért testsúly alapján határozzák meg. . A BMI alulsúly (BMI <18,5), normál súly (BMI 18,5 - <25), túlsúly (BMI 25 - <30) és elhízott (BMI ≥30 kg/m2) kategóriába kerül besorolásra.

Terhességi súlygyarapodás (GWG) és szülés utáni súlyvesztés/megtartás: A teljes GWG-t a szállítási súly és a kiindulási súly különbségeként számítják ki (a fent dokumentált módon). Ha a szüléskori súly nem áll rendelkezésre, az EMR-ben szereplő utolsó, születés előtti súlyt veszik figyelembe, amely a születéstől számított ≤14 nap. A trimeszterspecifikus GWG-t az EMR-ből számítják ki. A GWG-t folyamatos és kategorikus expozícióként fogják használni (túlzott, megfelelő és elégtelen, az IOM 2009-es irányelvei szerint). A korai PP fogyás (szüléstől a szülés utáni 1 hónapig), és a későbbi PP fogyás 1 hónaptól 3 hónapig kerül kiszámításra. Megvizsgálják az anyai testtömeg és a tej adipocitokinszintjének egyidejű változásait 0-1 hónap és 1-3 hónap között, feltételezve, hogy a nagyobb PP-tömegcsökkenés (alacsonyabb testtömeg-visszatartás) a tej adipocitokineinek alacsonyabb szintjével jár.

Tejgyűjtés: A tej összetételében bekövetkezett változásokat 1-től 3 hónapig értékelik. A kizárólagos szoptatás meghatározása: A vizsgálati személyzet megerősíti, hogy minden csecsemő kizárólag anyatejjel táplált (pl. 1 hónapos vizit előtt legalább 14 nappal, és tervezi, hogy 3 hónapig kizárólag szoptatást folytat. A kizárólagos anyatejes táplálás magában foglalja a lefejtett anyatej és a mellen keresztül táplált anyatej bármilyen kombinációját.

Anyatejgyűjtési protokoll: Az anya és gyermeke a szülés után 1 és 3 hónappal (± 5 nappal) jelentkezik a vizsgálati helyszínre, reggel 8:00 és 10:00 óra között, legalább 1,5 órával az utolsó etetés óta, és amíg az anya legalább 1 órát koplalt. A szoptatás előtti csecsemő súlyát nagy érzékenységű skála segítségével határozzák meg, az anyát arra ösztönzik, hogy ad libitum etesse a gyermeket mindkét mellből, amíg nem akarja kielégíteni, és megkapja a szoptatás utáni csecsemő súlyát (különbség = tejtermelés). A kérdőíves információkat, az anyai antropometriát és a csecsemő testösszetételének adatait összegyűjtik, majd 2 órával később az anya egyetlen emlőkifejezési mintát ad egy elektromos mellszívó segítségével (Medela, Inc., a vizsgálati csoport). Az anyatejet összekeverik, alikvotokra osztják és -80°C-on tárolják.

Tej-adipocitokin vizsgálatok: A tejmintákat a hűtőszekrényben felolvasztják és vortexelnek. A tejzsírt a vizes fázistól centrifugálással választják el 3000 g-vel 10 percig 4 °C-on. A kapott fölözött tejet a kereskedelemben kapható immunoassay kitekkel vizsgálják az inzulinra, IGF-1/BP-re, nagy molekulatömegű adiponektinre, viszfatinra, leptinre, IL-1β-ra, IL-6-ra, IL-10-re és TNF-α-ra. A glükózt a glükóz-oxidáz módszerrel kell mérni. További citokin- és növekedési faktor-koncentrációk (pl. interleukinok, interferonok, TGF-β) vizsgálatához a mintát megőrző módon multiplex vizsgálatot (EMD Millipore, Billerica, MA) és a Luminex 200 Multiplex analizátort kell alkalmazni.

Adatelemzés az 1. specifikus célhoz: Minden tej adipocitokinjére (folyamatosan függő változók) külön vegyes hatású regressziós modelleket készítenek (a soros tejadatok figyelembevétele érdekében), először a tej IL-6 nyers asszociációit tesztelve az 1. és 3. -hónapok minden anyai zsírosodási változóval (túlzott GWG, terhesség előtti BMI állapot, teljes GWG, trimeszter-specifikus GWG, korai és későbbi PP súlycsökkenés), majd minimálisan korrigált modellekkel (a csecsemő neméhez és terhességi korához is igazítva, tanulmányi központ) (OK vagy MN), az anyai életkor, a paritás, az etnikai hovatartozás és az anya társadalmi-gazdasági státusza) és végül teljesen kiigazított regressziós modellek, beleértve azokat a változókat, amelyeket potenciálisan zavaró tényezőként határoztak meg. A másodlagos elemzések során az anyai zsírosodási társulások lehetséges hatásmódosítását interakciós kifejezések hozzáadásával értékeljük. Ha az interakciós tag szignifikáns, rétegzett elemzéseket végeznek.

Adatgyűjtés a 2. konkrét cél csecsemő testösszetételéhez. A teljes testösszetétel mérése légeltolódásos pletizmográfia (ADP) segítségével történik, azaz. Pea Pod (v 3.1.1), gyors, érvényes, nagyon megbízható (% zsír CV%< 2,5% a kezünkben) teljes testtérfogat becslési módszer, amelyből a teljes testzsír (FM) és a zsírmentes tömeg (FFM) meghatározható predikciós egyenletekkel. Mind a University of Minnesota, mind az University of Oklahoma ugyanazzal az ADP-vel rendelkezik (ugyanaz a gyártó, a modell és a szoftver verziója).

Csecsemő inzulinszekréciója és rezisztenciája 6 hónapos korban: C-peptidet vagy összekötő peptidet gyűjtenek az inzulinszekréció markereként. A szérum C-peptidet a hasnyálmirigy ekvimoláris mennyiségben választja ki inzulinként, de stabilabb mérték, mivel nem hajlamos a hemolízist követő lebomlásra. A C-peptidet a magzati béta-sejtek funkciójának markereként használták a HAPO (Hyperglycemia and Adverse Pregnancy Out-come) vizsgálatban, hogy felmérjék az anyai elhízás és a terhességi cukorbetegség káros terhességre és csecsemőre gyakorolt ​​hatását. Az inzulinrezisztenciát a homeosztázis modell értékelésével (HOMA-IR) becsüljük meg. A csecsemőnél a 6 hónapos vizsgálati központ látogatása során a sarokbottal vért vesznek, ahogyan az laboratóriumainkban szokásos, ami ~ 1,0 cc vért eredményez. A teljes vért jégen tartjuk a laboratóriumainkban végzett centrifugálásig, és 0,5 ml szérumot aliquot részekre osztunk ki -80 C-on, amíg el nem szállítjuk Dr. Fields laboratóriumába ELISA-val történő elemzés céljából (Millipore, Billerica, MA; Intra-assay CV = 5). %; Inter-assay CV = 6%). A C-peptid értelmezéséhez vércukorszintre van szükség, amelyet ugyanabban a vérmintában glükóz-oxidáz módszerrel mérnek.

A tej makrotápanyag-tartalma: A teljes zsírtartalom mérése a Mojonnier-módszerrel történik. A zsírsav-összetétel meghatározása gázkromatográfiával történik a Nemzetközi Tejipari Szövetség (IDF) módszereivel. Más szabványos módszerek az összes nitrogén, hamu, nedvesség és szénhidrátok mennyiségi meghatározására szolgálnak.

Csecsemők étvágya, jóllakottsága és étrendje: A csecsemőtáplálási gyakorlatok II. vizsgálatában használt csecsemők étrendjének kérdőíveinek rövidített változatai 1 hónapos, 3 hónapos és 6 hónapos korban értékelik az anyák jelentését a csecsemők táplálékfelvételéről. A csecsemők étvágyának anyai észlelését a baba étkezési viselkedési kérdőív segítségével mérjük. Csecsemőalvás: A Sadeh rövid csecsemőalvási kérdőívet validálták az aktigráfia ellen, és minden látogatás alkalmával az alvási viselkedés értékelésére használják. További lehetséges zavaró tényezők: Lásd az 1. konkrét célt.

Adatelemzés (2. specifikus cél) Statisztikai elemzés: Az átfogó elsődleges hipotézis az, hogy a tej adipocitokin-koncentrációja 1-től 6 hónapos korig megváltozott testösszetétellel, 6 hónapos korban pedig emelkedett C-peptid- vagy HOMA-IR-szinttel lesz összefüggésben. független a lehetséges zavaró tényezőktől. 2.a1. példa Hipotézis: A leptin étvágycsökkentő hormon magasabb szintje 1 és/vagy 3 hónapos korban alacsonyabb csecsemő súlygyarapodással jár, ami kifejezetten alacsonyabb FFM-gyarapodást tükröz 1-6 hónapos korban. Ennek és a kapcsolódó hipotéziseknek a megoldására a vegyes hatású lineáris és logisztikus regressziót fogjuk használni elsődleges elemzési megközelítésként. A növekedési és testösszetételi adatok sorozatosak lesznek (0 [súly], 1, 3 és 6 hónap), amelyeket vegyes hatású modellekkel vizsgálunk, amelyek modellezik az alanyon belüli ismételt mérések kovariancia-struktúráját, és lehetővé teszik az alany-specifikus. metszéspont és a modellezendő lejtők. A tej adipocitokinjei az érdeklődésre számot tartó független változók. Mivel egyéni kapcsolataik a csecsemő növekedésével és más kimenetelekkel nem feltétlenül lineárisak, a tej adipocitokineinek kvintiliseit vagy kvartiliseit, valamint a folyamatosan eloszló változókat megvizsgáljuk. A végső modellekbe egyidejűleg több tej adipocitokin is bekerül, hogy teszteljék a csecsemők kimenetelére gyakorolt ​​független hatásukat, és értékeljék aggregált hatásukat (magyarázat a variancia).