Äidin liikalihavuus, rintamaidon koostumus ja vauvan kasvu ((MILK))

Yleinen tutkimussuunnitelma Potentiaalinen havainnollinen raskauskohortti, johon kuuluu 360 ei-diabeettista äitiä, jotka yksinomaan imettävät vauvojaan vähintään 1 kuukauden ajan synnytyksen jälkeen, rekrytoidaan raskauden toisella kolmanneksella erilaisten äitien raskautta edeltävien painoindeksien perusteella. yhtä paljon normaalipainoisia, ylipainoisia ja lihavia naisia. Naiset rekrytoidaan kahteen tutkimuskeskukseen (Oklahoman yliopiston terveystieteiden keskus Oklahoma Cityssä, OK ja Health Partners Research Foundation, Saint Paul/Minneapolis, MN), ja äitien ja vauvojen ruokavaliota, kehon koostumusta ja aineenvaihdunnan terveyttä seurataan tulevaisuuteen 1. , 3 ja 6 kuukautta synnytyksen jälkeen erityisissä tavoitteissa 1 ja 2. Erityistavoitteessa 3 60 äiti/vauva-dyadista "Mothers in Focus" (30 OB ja 30 NW äitiä) rekrytoidaan lisäbionäytteitä varten. keräys, mukaan lukien maitonäytteet 2 ja 6 kuukauden iässä, äidin kehon koostumuksen muutokset DXA:ta käyttämällä, vauvan DXA, sarjamaitonäytteiden metabolominen vertailu ja seuranta 12 kuukauden sijaan 6 kuukauden iässä.

Tiedonkeruuelementit:

Äidin rasvaisuus. Äidin ennen raskautta BMI-tila (NW, OW, OB) on ensisijainen altistuminen, jota käytetään tutkimuksessa. Raskautta edeltävä BMI määritetään käyttämällä ensimmäisiä (perustason) klinikan painoja sähköisistä potilaskertomuksista (EMR) (enintään 90 päivää viimeisten kuukautisten jälkeen) ja tutkimushenkilöstön mittaaman pituuden äidin ensimmäisellä vierailulla tutkimuskeskuksissamme. . BMI luokitellaan alipainoiseksi (BMI <18,5), normaalipainoiseksi (BMI 18,5 - <25), ylipainoiseksi (BMI 25 - <30) ja lihavaksi (BMI ≥30 kg/m2).

Raskausajan painonnousu (GWG) ja synnytyksen jälkeinen painonpudotus/retentio: Kokonais-GWG lasketaan synnytyksen painon ja lähtöpainon erotuksena (kuten yllä on dokumentoitu). Jos synnytyksen painoa ei ole saatavilla, käytetään viimeistä synnytystä edeltävää painoa EMR:ssä, ≤14 päivää syntymästä. Kolmanneskohtainen GWG lasketaan EMR:stä. GWG:tä käytetään jatkuvana ja kategorisena altistuksena (liiallinen, sopiva ja riittämätön IOM 2009 -ohjeiden mukaan. Varhainen PP-painonpudotus (synnytyksestä 1 kuukauteen synnytyksen jälkeen) ja myöhempi PP-painonpudotus 1 kuukauden ja 3 kuukauden PP lasketaan. Samanaikaisia ​​muutoksia äidin painossa ja maidon adiposytokiinitasoissa 0 - 1 kuukauden ja 1 - 3 kuukauden välillä tutkitaan hypoteesin, että suurempi PP-painon lasku (pienempi painonpidätys) liittyy alhaisempiin maidon adiposytokiinitasoihin.

Maidonkeruu: Maidon koostumuksen muutokset arvioidaan 1-3 kuukauden välein. Yksinomaan imetyksen määritelmä: Tutkimushenkilöstö vahvistaa, että kaikki pikkulapset on ruokittu yksinomaan rintamaidolla (ts. ei korviketta, ei muuta nestettä kuin vettä eikä kiinteitä aineita) vähintään 14 päivää ennen 1 kuukauden käyntiä ja aiot jatkaa yksinomaan imetystä 3 kuukauteen. Yksinomainen rintamaidon ruokinta sisältää minkä tahansa lyhennetyn rintamaidon ja rinnan kautta ruokitun rintamaidon yhdistelmän.

Äidinmaidon keräysprotokolla: Äiti ja lapsi ilmoittavat tutkimuspaikalle 1 ja 3 kuukautta (± 5 päivää) synnytyksen jälkeen, klo 8.00-10.00, vähintään 1½ tuntia viimeisestä ruokinnasta ja niin kauan kuin äiti on paastonnut vähintään 1 tunti. Vauvan ruokintaa edeltävä paino saadaan korkean herkkyysvaa'an avulla, äitiä rohkaistaan ​​ruokkimaan lasta ad libitum molemmista rinnoista, kunnes se on omasta tahdostaan ​​tyytyväinen, ja ruokinnan jälkeinen vauvapaino saadaan (ero = maidontuotanto). Kyselytiedot, äidin antropometria ja vauvan ruumiinkoostumustiedot kerätään, ja 2 tuntia myöhemmin äiti antaa yksittäisen rintaekspressionäytteen sähköisellä rintapumpulla (Medela, Inc., tutkimusryhmän toimittama). Äidinmaito sekoitetaan, jaetaan eriin ja säilytetään -80°C:ssa.

Maidon adiposytokiinimääritykset: Maitonäytteet sulatetaan jääkaapissa ja vorteksoidaan. Maitorasva erotetaan vesifaasista sentrifugoimalla 3 000 g:ssä 10 minuuttia 4 °C:ssa. Tuloksena oleva rasvaton maito määritetään käyttämällä kaupallisesti saatavia immuunimäärityspakkauksia insuliinille, IGF-1/BP:lle, korkean molekyylipainon adiponektiinille, visfatiinille, leptiinille, IL-1p:lle, IL-6:lle, IL-10:lle ja TNF-a:lle. Glukoosi mitataan glukoosioksidaasimenetelmällä. Lisäsytokiini- ja kasvutekijäpitoisuuksien (esim. interleukiinit, interferonit, TGF-β) tutkimiseksi näytettä säästävällä tavalla käytetään multipleksimääritystä (EMD Millipore, Billerica, MA) ja Luminex 200 Multiplex-analysaattoria.

Data-analyysi erityistä tavoitetta 1 varten: Kullekin maidon adiposytokiinille (jatkuvasti riippuvainen muuttuja) muodostetaan erilliset sekavaikutteiset regressiomallit (jotka ottavat huomioon maidon sarjatiedot). -kuukausia jokaisella äidin rasvaisuusmuuttujalla (liiallinen GWG, raskautta edeltävä BMI-tila, kokonais-GWG, raskauskolmanneksenkohtainen GWG, varhainen ja myöhempi PP-painonpudotus) ja sitten minimaalisesti säädetyt mallit (myös mukauttamalla vauvan sukupuoleen ja raskausikään, tutkimuskeskus (OK tai MN), äidin ikä, pariteetti, etnisyys ja äidin sosioekonominen asema) ja lopuksi täysin mukautetut regressiomallit, mukaan lukien ne muuttujat, jotka on määritetty mahdollisiksi hämmennystekijöiksi. Toissijaisissa analyyseissä emon rasvaisuusassosiaatioiden mahdollinen vaikutusmuutos arvioidaan lisäämällä vuorovaikutustermejä. Jos vuorovaikutustermi on merkittävä, tehdään ositettu analyysi.

Tiedonkeruu erityistavoitteen 2 vauvan kehon koostumukselle. Koko kehon koostumus mitataan käyttämällä ilmasyrjäytyspletysmografiaa (ADP), ts. Pea Pod (v 3.1.1), nopea, validi, erittäin luotettava (% rasvaa CV% < 2,5% käsissämme) menetelmä koko kehon tilavuuden estimoimiseksi, josta rasvaton kokonaismassa (FM) ja rasvaton massa (FFM) määritetään ennusteyhtälöiden avulla. Sekä Minnesotan yliopistolla että Oklahoman yliopistolla on sama ADP (sama valmistaja, malli ja ohjelmistoversiot).

Vauvan insuliinin eritys ja resistenssi 6 kuukauden iässä: C-peptidi tai yhdistävä peptidi insuliinierityksen merkkiaineeksi kerätään. Haima erittää ekvimolaarisia määriä seerumin C-peptidiä insuliinina, mutta se on vakaampi mitta, koska se ei ole altis hajoamiselle hemolyysin jälkeen. C-peptidiä käytettiin sikiön beetasolujen toiminnan markkerina HAPO-tutkimuksessa (Hyperglycemia and Adverse Pregnancy Out-come) arvioitaessa äidin liikalihavuuden ja raskausdiabeteksen vaikutuksia haitallisiin raskauden ja imeväisten tuloksiin. Insuliiniresistenssi arvioidaan käyttämällä homeostaasimallin arviointia (HOMA-IR). Lapselta otetaan verta kantapään avulla 6 kuukauden käynnin aikana tutkimuskeskuksessa, kuten laboratorioissamme on rutiinia, jolloin saadaan ~ 1,0 cc verta. Kokoverta säilytetään jäissä sentrifugointiin asti laboratorioissamme ja 0,5 ml seerumia jaetaan eriin -80 C:ssa, kunnes se lähetetään Dr. Fieldsin laboratorioon ELISA-analyysiä varten (Millipore, Billerica, MA; Intra-assay CV = 5). %; määritysten välinen CV = 6 %). C-peptidin tulkinta vaatii veren glukoositason, joka mitataan samasta verinäytteestä glukoosioksidaasimenetelmällä.

Maidon makroravintoainepitoisuus: Kokonaisrasvapitoisuus mitataan Mojonnierin menetelmällä Rasvahappokoostumus arvioidaan kaasukromatografialla käyttäen International Dairy Federationin (IDF) menetelmiä. Muut standardimenetelmät määrittävät kokonaistypen, tuhkan, kosteuden ja hiilihydraatit.

Vauvan ruokahalu, kylläisyyden tunne ja ruokavalio: Imeväisten ruokintakäytäntöjen tutkimuksessa II käytetyt lyhennetyt versiot 1 kuukauden, 3 kuukauden ja 6 kuukauden iässä arvioivat äidin raporttia vauvan ravinnonsaannista. Äidin käsitys vauvan ruokahalusta mitataan Baby Eating Behavior Questionnaire -kyselylomakkeella. Infant Sleep: Sadeh Brief Infant Sleep Questionnaire on validoitu aktigrafiaa vastaan, ja sitä käytetään arvioimaan nukkumiskäyttäytymistä jokaisella käynnillä. Muita mahdollisia sekaannuksia: Katso erityinen tavoite 1.

Tietojen analyysi (erityistavoite 2) Tilastollinen analyysi: Kaiken kattava ensisijainen hypoteesi on, että maidon adiposytokiinipitoisuudet liittyvät muuttuneeseen kehon koostumukseen 1–6 kuukauden iässä ja kohonneeseen C-peptidi- tai HOMA-IR-arvoon 6 kuukauden iässä, riippumaton mahdollisista hämmennystekijöistä. Esimerkkihypoteesi 2.a1: Ruokahalua hillitsevän leptiinihormonin korkeammat tasot 1 ja/tai 3 kuukauden iässä liittyvät pienempään lapsen painonnousuun, mikä heijastaa erityisesti alhaisempaa FFM-lisäystä 1-6 kuukauden iässä. Käytämme sekavaikutteista lineaarista ja logistista regressiota ensisijaisena analyysimenetelmänä tämän ja siihen liittyvien hypoteesien käsittelemiseksi. Kasvu- ja kehonkoostumustiedot ovat sarjamuotoisia (0 [paino], 1, 3 ja 6 kuukautta), joita tarkastellaan sekavaikutusmalleilla, jotka mallintavat toistuvien mittausten kovarianssirakennetta kohteen sisällä ja mahdollistavat aihekohtaiset. leikkauspiste ja mallinnettavat rinteet. Maidon adiposytokiinit ovat kiinnostavia riippumattomia muuttujia. Koska niiden yksilölliset suhteet vauvan kasvuun ja muihin tuloksiin eivät ehkä ole lineaarisia, maidon adiposytokiinien kvintiilejä tai kvartiileja sekä jatkuvasti jakautuneita muuttujia tutkitaan. Useita maidon adiposytokiineja sisällytetään samanaikaisesti lopullisiin malleihin, jotta voidaan testata niiden riippumattomia vaikutuksia imeväisten tuloksiin ja arvioida niiden kokonaisvaikutuksia (varianssi selitetty).