Maternale obesitas, samenstelling van moedermelk en groei van baby's ((MILK))

Algemene onderzoeksopzet Een prospectieve observationele zwangerschapscohort van 360 niet-diabetische moeders, die hun baby's uitsluitend borstvoeding geven tot ten minste 1 maand na de bevalling, zal worden gerekruteerd in het tweede trimester van de zwangerschap, over een breed scala van BMI van de moeder vóór de zwangerschap, met een gelijk aantal vrouwen met een normaal gewicht, overgewicht en obesitas. De vrouwen zullen worden aangeworven in twee studiecentra (University of Oklahoma Health Sciences Center in Oklahoma City, OK en Health Partners Research Foundation in Saint Paul/Minneapolis, MN), waarbij het dieet van moeder en kind, lichaamssamenstelling en metabolische gezondheid prospectief worden gevolgd op 1 , 3 en 6 maanden na de bevalling in Specifieke Doelstellingen 1 en 2. In Specifieke Doelstelling 3 zal een subset van 60 van deze moeder/kind-duo's "Mothers in Focus" (30 OB- en 30 NW-moeders) worden aangeworven voor aanvullend biospecimen verzameling, inclusief melkmonsters na 2 en 6 maanden, veranderingen in de lichaamssamenstelling van de moeder met behulp van DXA, DXA voor baby's, metabolomische vergelijking van seriële melkmonsters en follow-up tot 12 in plaats van 6 maanden.

Elementen voor gegevensverzameling:

Maternale obesitas. De BMI-status van de moeder vóór de zwangerschap (NW, OW, OB) is de primaire blootstelling die wordt gebruikt om het onderzoek aan te sturen. De BMI vóór de zwangerschap wordt bepaald aan de hand van gewichten in de eerste kliniek (basislijn) uit de elektronische medische dossiers (EMR) (niet meer dan 90 d. na de laatste menstruatie), en postuur gemeten door onderzoekspersoneel bij het eerste bezoek van de moeder aan onze onderzoekscentra . BMI wordt gecategoriseerd als ondergewicht (BMI <18,5), normaal gewicht (BMI 18,5 - <25), overgewicht (BMI 25 - <30) en obesitas (BMI ≥30 kg/m2).

Zwangerschapsgewichtstoename (GWG) en postpartum gewichtsverlies/behoud: de totale GWG wordt berekend als het verschil tussen het bevallingsgewicht en het basisgewicht (zoals hierboven gedocumenteerd). Als het geboortegewicht niet beschikbaar is, wordt het laatste prenatale gewicht in het EMR, ≤14 dagen na de geboorte, gebruikt. Trimesterspecifieke GWG wordt berekend op basis van de EMR. GWG zal worden gebruikt als een continue en als een categorische blootstelling (overmatig, passend en onvoldoende, volgens de IOM 2009-richtlijnen. Vroeg PP-gewichtsverlies (vanaf de bevalling tot 1 maand na de bevalling) en later PP-gewichtsverlies van 1 maand tot 3 maanden PP wordt berekend. Gelijktijdige veranderingen in het gewicht van de moeder en de adipocytokinespiegels in de melk van 0 - 1 maand en 1 - 3 maanden zullen worden onderzocht, in de hypothese dat een groter PP-gewichtsverlies (lagere gewichtsbehoud) geassocieerd is met lagere niveaus van melkadipocytokines.

Melkverzameling: Veranderingen in de melksamenstelling worden beoordeeld van 1 tot 3 maanden. Definitie van exclusieve borstvoeding: Onderzoeksmedewerkers zullen bevestigen dat alle baby's uitsluitend borstvoeding hebben gekregen (d.w.z. geen formule, geen andere vloeistof dan water en geen vaste stoffen) ten minste 14 dagen voorafgaand aan het bezoek van 1 maand en ben van plan om tot 3 maanden uitsluitend borstvoeding te blijven geven. Exclusieve borstvoeding met moedermelk omvat elke combinatie van afgekolfde moedermelk en moedermelk die via de borst wordt gevoed.

Protocol voor het verzamelen van moedermelk: Moeder en kind zullen zich 1 en 3 maanden (± 5 dagen) na de bevalling tussen 8:00 en 10:00 uur melden op de onderzoekslocatie, ten minste 1½ uur na de laatste voeding en terwijl de moeder heeft minimaal 1 uur gevast. Het gewicht van de baby vóór de voeding wordt verkregen met behulp van een zeer gevoelige schaal, de moeder wordt aangemoedigd om het kind ad libitum uit beide borsten te voeden totdat het vrijwillig tevreden is, en het gewicht van de baby na de voeding wordt verkregen (verschil = melkproductie). Vragenlijstinformatie, maternale antropometrie en gegevens over de lichaamssamenstelling van de baby worden verzameld, en 2 uur later zal de moeder een enkel borstafdrukkingsmonster geven met behulp van een elektrische borstkolf (Medela, Inc., geleverd door het onderzoeksteam). Moedermelk wordt gemengd, in porties verdeeld en bewaard bij -80°C.

Melk Adipocytokine Assays: Melkmonsters worden ontdooid in de koelkast en gevortext. Melkvet wordt van de waterige fase gescheiden door centrifugatie bij 3.000 g gedurende 10 minuten bij 4°C. De resulterende magere melk zal worden getest met behulp van in de handel verkrijgbare immunoassaykits voor insuline, IGF-1/BP, adiponectine met hoog molecuulgewicht, visfatin, leptine, IL-1β, IL-6, IL-10 en TNF-α. Glucose wordt gemeten met de glucose-oxidasemethode. Om aanvullende cytokine- en groeifactorconcentraties (bijv. interleukinen, interferonen, TGF-β) te onderzoeken op een manier die het monster bewaart, zullen een multiplexassay (EMD Millipore, Billerica, MA) en de Luminex 200 Multiplex-analysator worden gebruikt.

Gegevensanalyse voor specifiek doel 1: voor elk van de melkadipocytokines (continue afhankelijke variabelen) zullen afzonderlijke regressiemodellen met gemengde effecten (om rekening te houden met seriële melkgegevens) worden geconstrueerd, waarbij eerst de ruwe associaties van melk IL-6 op zowel 1 als 3 worden getest -maanden met elke maternale adipositasvariabele (overmatige GWG, BMI-status vóór de zwangerschap, totale GWG, trimesterspecifieke GWG, vroeg en later PP-gewichtsverlies), en vervolgens minimaal aangepaste modellen (ook correctie voor babygeslacht en zwangerschapsduur, studiecentrum (OK of MN), leeftijd van de moeder, pariteit, etniciteit en sociaal-economische status van de moeder) en tot slot volledig aangepaste regressiemodellen inclusief die variabelen waarvan is vastgesteld dat ze potentiële confounders zijn. In secundaire analyses zal mogelijke effectmodificatie van de maternale adipositas-associaties worden beoordeeld door interactietermen toe te voegen. Als de interactieterm significant is, wordt een gestratificeerde analyse uitgevoerd.

Gegevensverzameling voor specifiek doel 2 Lichaamssamenstelling van baby's. De totale lichaamssamenstelling wordt gemeten met behulp van luchtverplaatsingsplethysmografie (ADP), d.w.z. Peul (v 3.1.1), een snelle, geldige, zeer betrouwbare (% vet CV%< 2,5% in onze handen) methode voor het schatten van het totale lichaamsvolume waaruit het totale lichaamsvet (FM) en de vetvrije massa (FFM) worden bepaald met behulp van voorspellingsvergelijkingen. Zowel de Universiteit van Minnesota als de Universiteit van Oklahoma hebben dezelfde ADP (zelfde fabrikant, model en softwareversies).

Insulinesecretie en -resistentie bij baby's na 6 maanden: C-peptide, of verbindend peptide, als marker voor insulinesecretie zal worden verzameld. Serum C-peptide wordt in equimolaire hoeveelheden uitgescheiden door de alvleesklier als insuline, maar is een stabielere maatregel omdat het niet vatbaar is voor afbraak na hemolyse. C-peptide werd gebruikt als een marker van de foetale bètacelfunctie in de HAPO-studie (Hyperglycemia and Adverse Pregnancy Out-come) om de effecten van maternale obesitas en zwangerschapsdiabetes op ongunstige zwangerschaps- en babyuitkomsten te beoordelen. Insulineresistentie zal worden geschat met behulp van homeostasemodelbeoordeling (HOMA-IR). Tijdens het bezoek van 6 maanden aan het onderzoekscentrum zal bloed worden verkregen via een hielstok bij de baby, zoals gebruikelijk is in onze laboratoria, wat ~ 1,0 cc bloed oplevert. Volbloed wordt op ijs bewaard tot het wordt gecentrifugeerd in onze laboratoria, en 0,5 ml serum wordt verdeeld bij -80 C tot het wordt verzonden naar het laboratorium van Dr. Fields voor analyse met behulp van ELISA (Millipore, Billerica, MA; Intra-assay CV = 5 % CV tussen analyses = 6%). Interpretatie van C-peptide vereist een bloedglucosespiegel die in hetzelfde bloedmonster zal worden gemeten met behulp van de glucose-oxidasemethode.

Melk Macronutriëntengehalte: Het totale vetgehalte zal worden gemeten volgens de Mojonnier-methode. De vetzuursamenstelling zal worden beoordeeld door middel van gaschromatografie met behulp van de methoden van de International Dairy Federation (IDF). Andere standaardmethoden kwantificeren totaal stikstof, as, vocht en koolhydraten.

Eetlust, verzadiging en dieet bij zuigelingen: Verkorte versies van de vragenlijsten over de voeding van zuigelingen die worden gebruikt in de Infant Feeding Practices Study II na 1 maand, 3 maanden en 6 maanden zullen het rapport van de moeder over de inname van zuigelingen via de voeding beoordelen. De perceptie van de moeder van de eetlust van de baby zal worden gemeten met behulp van de vragenlijst over het eetgedrag van baby's. Babyslaap: de Sadeh Brief Infant Sleep Questionnaire is gevalideerd aan de hand van actigrafie en zal worden gebruikt om het slaapgedrag bij elk bezoek te beoordelen. Aanvullende potentiële confounders: zie specifiek doel 1.

Gegevensanalyse (specifiek doel 2) Statistische analyse: de overkoepelende primaire hypothese is dat adipocytokineconcentraties in melk in verband worden gebracht met een veranderde lichaamssamenstelling in de leeftijd van 1 tot 6 maanden, en met verhoogd C-peptide of HOMA-IR na 6 maanden. onafhankelijk van potentiële confounders. Voorbeeldhypothese 2.a1: Hogere niveaus van het eetlustonderdrukkende hormoon leptine na 1 en/of 3 maanden zullen in verband worden gebracht met een lagere gewichtstoename van de baby, wat specifiek een weerspiegeling is van een lagere FFM-toename van 1 - 6 maanden. We zullen gemengde effecten lineaire en logistische regressie gebruiken als de primaire analysebenadering om deze en gerelateerde hypothesen aan te pakken. Gegevens over groei en lichaamssamenstelling zullen serieel zijn (0 [voor gewicht], 1, 3 en 6 maanden), die zullen worden onderzocht met behulp van modellen met gemengde effecten die de covariantiestructuur van de herhaalde metingen binnen de proefpersoon modelleren en vakspecifieke snijpunt en te modelleren hellingen. Melkadipocytokines zijn de onafhankelijke variabelen van belang. Omdat hun individuele relaties met de groei van het kind en andere uitkomsten mogelijk niet lineair zijn, zullen zowel kwintielen of kwartielen van melkadipocytokines als continu verdeelde variabelen worden onderzocht. Meerdere melkadipocytokines zullen gelijktijdig worden opgenomen in definitieve modellen, om hun onafhankelijke effecten op de uitkomsten van zuigelingen te testen en om hun geaggregeerde effecten te beoordelen (variantie verklaard).