Obesidad materna, composición de la leche materna y crecimiento infantil ((MILK))

Diseño general del estudio Se reclutará una cohorte observacional prospectiva de embarazo de 360 ​​madres no diabéticas, que amamantan exclusivamente a sus bebés hasta al menos 1 mes después del parto, en el segundo trimestre del embarazo, a través de una amplia gama de IMC materno antes del embarazo, con igual número de mujeres normopeso, con sobrepeso y obesas. Las mujeres serán reclutadas en dos centros de estudio (Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Oklahoma en Oklahoma City, OK y Health Partners Research Foundation en Saint Paul/Minneapolis, MN), con seguimiento prospectivo de la dieta materna e infantil, la composición corporal y la salud metabólica en 1 , 3 y 6 meses después del parto en los Objetivos específicos 1 y 2. En el Objetivo específico 3, se reclutará un subconjunto de 60 de estas díadas de madre/bebé "Madres en foco" (30 madres OB y ​​30 NW) para muestras biológicas adicionales recolección, incluidas muestras de leche a los 2 y 6 meses, cambios en la composición corporal materna mediante DXA, DXA infantil, comparación metabolómica de muestras de leche en serie y seguimiento hasta los 12 meses en lugar de los 6 meses.

Elementos de recopilación de datos:

Adiposidad Materna. El estado del IMC materno antes del embarazo (NW, OW, OB) es la exposición principal utilizada para impulsar el estudio. El IMC antes del embarazo se determinará utilizando los primeros pesos clínicos (línea de base) de los registros médicos electrónicos (EMR) (no más de 90 días después del último período menstrual) y la estatura medida por el personal de investigación en la primera visita de la madre a nuestros centros de investigación. . El IMC se clasificará como bajo peso (IMC <18,5), peso normal (IMC 18,5 - <25), sobrepeso (IMC 25 - <30) y obesidad (IMC ≥30 kg/m2).

Aumento de peso gestacional (GWG) y pérdida/retención de peso posparto: el GWG total se calculará como la diferencia entre el peso del parto y el peso inicial (como se documentó anteriormente). Si el peso al momento del parto no está disponible, se utilizará el último peso prenatal en el EMR, ≤14 días desde el nacimiento. El GWG específico del trimestre se calculará a partir del EMR. GWG se utilizará como una exposición continua y categórica (excesiva, adecuada e insuficiente, según las directrices de IOM 2009). Se calculará la pérdida de peso PP temprana (desde el parto hasta 1 mes posparto) y la pérdida de peso PP posterior de 1 mes a 3 meses. Se examinarán los cambios simultáneos en el peso materno y los niveles de adipocitocinas en la leche de 0 a 1 mes y de 1 a 3 meses, con la hipótesis de que una mayor pérdida de peso PP (menor retención de peso) se asocia con niveles más bajos de adipocitocinas en la leche.

Recolección de Leche: Se evaluarán los cambios en la composición de la leche de 1 a 3 meses. Definición de lactancia materna exclusiva: El personal del estudio confirmará que todos los bebés hayan sido alimentados exclusivamente con leche materna (es decir, sin fórmula, sin líquido que no sea agua y sin sólidos) al menos 14 días antes de la visita de 1 mes y planee continuar amamantando exclusivamente hasta los 3 meses. La alimentación exclusiva con leche materna incluirá cualquier combinación de leche materna extraída y leche materna alimentada a través del pecho.

Protocolo de recolección de leche materna: la madre y el niño se presentarán en el sitio de estudio entre 1 y 3 meses (± 5 días) después del parto, entre las 8:00 y las 10:00 a. m., al menos 1 hora y media desde la última alimentación y mientras la madre en ayunas al menos 1 hora. Se obtendrá el peso del lactante antes de la alimentación utilizando una escala de alta sensibilidad, se alentará a la madre a alimentar al niño ad libitum de ambos senos hasta que esté voluntariamente satisfecho y se obtendrá el peso del lactante después de la alimentación (diferencia = producción de leche). Se recopilará la información del cuestionario, la antropometría materna y los datos de composición corporal del bebé y, 2 horas más tarde, la madre proporcionará una muestra única de expresión mamaria utilizando un extractor de leche eléctrico (Medela, Inc., proporcionado por el equipo de estudio). La leche materna se mezclará, dividirá en alícuotas y se almacenará a -80 °C.

Ensayos de adipocitocina en leche: Las muestras de leche se descongelarán en el refrigerador y se agitarán en un vórtex. La grasa de la leche se separará de la fase acuosa mediante centrifugación a 3.000 g durante 10 minutos a 4 °C. La leche desnatada resultante se analizará utilizando kits de inmunoensayo comercialmente disponibles para insulina, IGF-1/BP, adiponectina de alto peso molecular, visfatina, leptina, IL-1β, IL-6, IL-10 y TNF-α. La glucosa se medirá por el método de la glucosa oxidasa. Para examinar concentraciones adicionales de citoquinas y factores de crecimiento (p. ej., interleucinas, interferones, TGF-β) de una manera que conserve la muestra, se empleará un ensayo multiplex (EMD Millipore, Billerica, MA) y el analizador Luminex 200 Multiplex.

Análisis de datos para el objetivo específico 1: Para cada una de las adipocitocinas de la leche (variables dependientes continuas), se construirán modelos de regresión de efectos mixtos separados (para tener en cuenta los datos de la leche en serie), primero probando asociaciones crudas de IL-6 de la leche tanto en 1 como en 3 -meses con cada variable de adiposidad materna (GWG excesivo, estado del IMC antes del embarazo, GWG total, GWG específico del trimestre, pérdida de peso PP temprana y tardía), y luego modelos mínimamente ajustados (también ajustando por sexo del bebé y edad gestacional, centro de estudio (OK o MN), edad materna, paridad, etnia y nivel socioeconómico materno) y, finalmente, modelos de regresión totalmente ajustados que incluyen aquellas variables que se determinaron como posibles factores de confusión. En análisis secundarios, la posible modificación del efecto de las asociaciones de adiposidad materna se evaluará agregando términos de interacción. Si el término de interacción es significativo, se realizará un análisis estratificado.

Recopilación de datos para el objetivo específico 2 Composición corporal infantil. La composición corporal total se medirá mediante pletismografía por desplazamiento de aire (ADP), es decir, Vaina de guisantes (v 3.1.1), un método rápido, válido y altamente confiable (% de grasa CV% < 2.5% en nuestras manos) de estimación del volumen corporal total a partir del cual se determina la grasa corporal total (FM) y la masa libre de grasa (FFM) utilizando ecuaciones de predicción. Tanto la Universidad de Minnesota como la Universidad de Oklahoma tienen el mismo ADP (mismo fabricante, modelo y versiones de software).

Secreción de insulina infantil y resistencia a los 6 meses: se recogerá el péptido C, o péptido conector, como marcador de la secreción de insulina. El péptido C sérico es secretado en cantidades equimolares por el páncreas como insulina, pero es una medida más estable porque no es propenso a la degradación después de la hemólisis. El péptido C se utilizó como marcador de la función de las células beta fetales en el estudio HAPO (hiperglucemia y resultado adverso del embarazo) para evaluar los efectos de la obesidad materna y la diabetes gestacional en los resultados adversos del embarazo y del bebé. La resistencia a la insulina se estimará mediante la evaluación del modelo de homeostasis (HOMA-IR). La sangre se obtendrá mediante punción en el talón del bebé en el momento de la visita de los 6 meses al centro de estudio, como es habitual en nuestros laboratorios, lo que produce ~ 1,0 cc de sangre. La sangre completa se mantendrá en hielo hasta la centrifugación en nuestros laboratorios, y 0,5 ml de suero se dividirán en alícuotas almacenadas a -80 C hasta que se envíen al laboratorio del Dr. Fields para su análisis mediante ELISA (Millipore, Billerica, MA; CV intraensayo = 5 %; CV interensayo = 6%). La interpretación del péptido C requiere el nivel de glucosa en sangre que se medirá en la misma muestra de sangre utilizando el método de glucosa oxidasa.

Contenido de macronutrientes de la leche: el contenido de grasa total se medirá mediante el método de Mojonnier. La composición de ácidos grasos se evaluará mediante cromatografía de gases utilizando los métodos de la Federación Internacional de Lechería (IDF). Otros métodos estándar cuantificarán el nitrógeno total, las cenizas, la humedad y los carbohidratos.

Apetito, saciedad y dieta infantil: Las versiones abreviadas de los cuestionarios de dieta infantil utilizados en el Estudio de prácticas de alimentación infantil II a 1 mes, 3 meses y 6 meses evaluarán el informe materno sobre la ingesta dietética infantil. La percepción materna del apetito infantil se medirá mediante el Cuestionario de Comportamiento Alimenticio del Bebé. Sueño infantil: el Cuestionario breve de sueño infantil de Sadeh ha sido validado con actigrafía y se utilizará para evaluar el comportamiento del sueño en cada visita. Posibles factores de confusión adicionales: consulte el objetivo específico 1.

Análisis de datos (Objetivo específico 2) Análisis estadístico: La hipótesis principal general es que las concentraciones de adipocitocinas en la leche se asociarán con una composición corporal alterada entre las edades de 1 y 6 meses, y con péptido C elevado o HOMA-IR a los 6 meses. independiente de posibles factores de confusión. Hipótesis de ejemplo 2.a1: Los niveles más altos de leptina, la hormona supresora del apetito, al mes y/oa los 3 meses se asociarán con un menor aumento de peso del lactante, lo que refleja específicamente un menor aumento de la FFM entre el 1 y los 6 meses. Utilizaremos la regresión lineal y logística de efectos mixtos como el enfoque de análisis principal para abordar esta y otras hipótesis relacionadas. Los datos de crecimiento y composición corporal serán en serie (0 [para el peso], 1, 3 y 6 meses), que se examinarán utilizando modelos de efectos mixtos que modelan la estructura de covarianza de las medidas repetidas dentro del sujeto y permiten la evaluación específica del sujeto. intercepción y pendientes a modelar. Las adipocitocinas de la leche son las variables independientes de interés. Debido a que sus relaciones individuales con el crecimiento infantil y otros resultados pueden no ser lineales, se examinarán los quintiles o cuartiles de las adipocitocinas de la leche, así como las variables distribuidas continuamente. Se incluirán múltiples adipocitocinas de la leche simultáneamente en los modelos finales, para probar sus efectos independientes en los resultados de los lactantes y para evaluar sus efectos agregados (explicación de la varianza).