Adipositas der Mutter, Zusammensetzung der Muttermilch und Wachstum des Kindes ((MILK))

Allgemeines Studiendesign Eine prospektive beobachtende Schwangerschaftskohorte von 360 nicht-diabetischen Müttern, die ihre Säuglinge bis mindestens 1 Monat nach der Geburt ausschließlich stillen, wird im zweiten Schwangerschaftstrimester über ein breites Spektrum von mütterlichem BMI vor der Schwangerschaft hinweg rekrutiert. mit gleich vielen normalgewichtigen, übergewichtigen und fettleibigen Frauen. Die Frauen werden an zwei Studienzentren (University of Oklahoma Health Sciences Center in Oklahoma City, OK und Health Partners Research Foundation in Saint Paul/Minneapolis, MN) rekrutiert, wobei Ernährung von Mutter und Kind, Körperzusammensetzung und Stoffwechselgesundheit prospektiv am 1 , 3 und 6 Monate nach der Geburt in den spezifischen Zielen 1 und 2. In den spezifischen Zielen 3 wird eine Untergruppe von 60 dieser Mutter-Kind-Dyaden „Mütter im Fokus“ (30 OB- und 30 NW-Mütter) für zusätzliche Bioproben rekrutiert Sammlung, einschließlich Milchproben nach 2 und 6 Monaten, Veränderungen der Körperzusammensetzung der Mutter mit DXA, Säuglings-DXA, metabolomischer Vergleich serieller Milchproben und Follow-up bis 12 statt 6 Monate.

Datenerfassungselemente:

Mütterliche Adipositas. Der BMI-Status der Mutter vor der Schwangerschaft (NW, OW, OB) ist die primäre Exposition, die zur Unterstützung der Studie verwendet wird. Der BMI vor der Schwangerschaft wird anhand der ersten (Ausgangs-)Klinikgewichte aus den elektronischen Patientenakten (EMR) (nicht mehr als 90 Tage nach der letzten Menstruation) und der Statur bestimmt, die vom Forschungspersonal beim ersten Besuch der Mutter in unseren Forschungszentren gemessen wird . Der BMI wird in Untergewicht (BMI < 18,5), Normalgewicht (BMI 18,5 - < 25), Übergewicht (BMI 25 - < 30) und Fettleibigkeit (BMI ≥ 30 kg/m2) eingeteilt.

Gestationsgewichtszunahme (GWG) und Gewichtsverlust/-retention nach der Geburt: Das Gesamt-GWG wird als Differenz zwischen Geburtsgewicht und Ausgangsgewicht (wie oben dokumentiert) berechnet. Wenn das Geburtsgewicht nicht verfügbar ist, wird das letzte vorgeburtliche Gewicht in der EMR, ≤ 14 Tage nach der Geburt, verwendet. Trimesterspezifisches GWG wird aus der EMR berechnet. GWG wird als kontinuierliche und als kategoriale Exposition (übermäßig, angemessen und unzureichend gemäß den IOM-Richtlinien von 2009) verwendet. Berechnet wird der frühe PP-Gewichtsverlust (von der Entbindung bis 1 Monat nach der Geburt) und der spätere PP-Gewichtsverlust von 1 Monat bis 3 Monate PP. Gleichzeitige Veränderungen des Gewichts der Mutter und der Adipozytokinspiegel in der Milch von 0 bis 1 Monat und 1 bis 3 Monaten werden untersucht, wobei die Hypothese aufgestellt wird, dass ein größerer PP-Gewichtsverlust (geringere Gewichtsretention) mit niedrigeren Adipozytokinspiegeln in der Milch verbunden ist.

Milchsammlung: Änderungen in der Milchzusammensetzung werden nach 1 bis 3 Monaten bewertet. Definition des ausschließlichen Stillens: Das Studienpersonal bestätigt, dass alle Säuglinge ausschließlich mit Muttermilch gefüttert wurden (d. h. keine Formel, keine Flüssigkeit außer Wasser und keine Feststoffe) mindestens 14 Tage vor dem 1-Monats-Besuch und planen, bis zu 3 Monate ausschließlich zu stillen. Die ausschließliche Fütterung mit Muttermilch umfasst jede Kombination aus abgepumpter Muttermilch und über die Brust aufgenommener Muttermilch.

Muttermilchentnahmeprotokoll: Mutter und Kind melden sich 1 und 3 Monate (± 5 Tage) nach der Geburt zwischen 8:00 und 10:00 Uhr am Studienort, mindestens 1½ Stunden seit der letzten Fütterung und solange die Mutter hat mindestens 1 Stunde gefastet. Das Gewicht des Säuglings vor dem Füttern wird unter Verwendung einer hochempfindlichen Skala ermittelt, die Mutter wird ermutigt, das Kind nach Belieben von beiden Brüsten zu füttern, bis es willentlich befriedigt ist, und das Gewicht des Säuglings nach dem Füttern wird ermittelt (Differenz = Milchleistung). Fragebogeninformationen, mütterliche Anthropometrie und Daten zur Körperzusammensetzung des Säuglings werden gesammelt, und 2 Stunden später wird die Mutter mit einer elektrischen Brustpumpe (Medela, Inc., vom Studienteam bereitgestellt) eine einzelne Brustausdrucksprobe abgeben. Muttermilch wird gemischt, aliquotiert und bei -80°C gelagert.

Milch-Adipozytokin-Assays: Milchproben werden im Kühlschrank aufgetaut und gevortext. Milchfett wird von der wässrigen Phase durch Zentrifugation bei 3.000 g für 10 Minuten bei 4°C getrennt. Die resultierende entrahmte Milch wird unter Verwendung von im Handel erhältlichen Immunoassay-Kits auf Insulin, IGF-1/BP, Adiponectin mit hohem Molekulargewicht, Visfatin, Leptin, IL-1β, IL-6, IL-10 und TNF-α getestet. Glukose wird mit der Glukoseoxidasemethode gemessen. Um zusätzliche Zytokin- und Wachstumsfaktorkonzentrationen (z. B. Interleukine, Interferone, TGF-β) probenschonend zu untersuchen, werden ein Multiplex-Assay (EMD Millipore, Billerica, MA) und der Luminex 200 Multiplex-Analysator eingesetzt.

Datenanalyse für spezifisches Ziel 1: Für jedes der Milch-Adipozytokine (kontinuierliche abhängige Variablen) werden separate Regressionsmodelle mit gemischten Effekten (zur Berücksichtigung serieller Milchdaten) erstellt, wobei zunächst die groben Assoziationen von Milch-IL-6 sowohl bei 1 als auch bei 3 getestet werden -Monate mit jeder mütterlichen Adipositas-Variablen (übermäßiges GWG, BMI-Status vor der Schwangerschaft, Gesamt-GWG, Trimester-spezifisches GWG, früher und später PP-Gewichtsverlust) und dann minimal angepasste Modelle (auch Anpassung für das Geschlecht des Säuglings und das Gestationsalter, Studienzentrum (OK oder MN), Alter der Mutter, Parität, ethnische Zugehörigkeit und sozioökonomischer Status der Mutter) und schließlich vollständig angepasste Regressionsmodelle einschließlich der Variablen, die als potenzielle Confounder bestimmt wurden. In Sekundäranalysen wird eine mögliche Effektmodifikation der mütterlichen Adipositas-Assoziationen durch Hinzufügen von Interaktionstermen bewertet. Wenn der Interaktionsterm signifikant ist, wird eine stratifizierte Analyse durchgeführt.

Datenerhebung für spezifisches Ziel 2 der Körperzusammensetzung von Säuglingen. Die Gesamtkörperzusammensetzung wird mittels Luftverdrängungsplethysmographie (ADP) gemessen, d.h. Erbsenschote (v 3.1.1), eine schnelle, gültige, hochzuverlässige (% Fett CV% < 2,5 % in unseren Händen) Methode zur Schätzung des Gesamtkörpervolumens, aus der das Gesamtkörperfett (FM) und die fettfreie Masse (FFM) unter Verwendung von Vorhersagegleichungen bestimmt werden. Sowohl die University of Minnesota als auch die University of Oklahoma haben das gleiche ADP (gleicher Hersteller, gleiches Modell und gleiche Softwareversionen).

Säuglingsinsulinsekretion und -resistenz nach 6 Monaten: C-Peptid oder Verbindungspeptid als Marker der Insulinsekretion wird gesammelt. Serum-C-Peptid wird von der Bauchspeicheldrüse in äquimolaren Mengen wie Insulin sezerniert, ist jedoch ein stabileres Maß, da es nach Hämolyse nicht zum Abbau neigt. C-Peptid wurde als Marker für die Funktion der fötalen Betazellen in der HAPO-Studie (Hyperglycemia and Adverse Pregnancy Outcome) verwendet, um die Auswirkungen von mütterlicher Fettleibigkeit und Schwangerschaftsdiabetes auf unerwünschte Schwangerschafts- und Säuglingsergebnisse zu bewerten. Die Insulinresistenz wird anhand der Homöostase-Modellbewertung (HOMA-IR) geschätzt. Blut wird dem Säugling zum Zeitpunkt des 6-monatigen Besuchs im Studienzentrum per Fersenstich entnommen, wie es in unseren Labors routinemäßig ist, was ~ 1,0 cc Blut ergibt. Vollblut wird bis zur Zentrifugation in unseren Labors auf Eis gehalten, und 0,5 ml des Serums werden aliquotiert bei -80 °C gelagert, bis es zur Analyse mit ELISA (Millipore, Billerica, MA; Intra-Assay-CV = 5) an das Labor von Dr. Fields versandt wird %, Inter-Assay-VK = 6 %). Die Interpretation des C-Peptids erfordert den Blutzuckerspiegel, der in derselben Blutprobe mit der Glukoseoxidase-Methode gemessen wird.

Makronährstoffgehalt der Milch: Der Gesamtfettgehalt wird nach der Mojonnier-Methode gemessen. Die Fettsäurezusammensetzung wird durch Gaschromatographie unter Verwendung der Methoden der International Dairy Federation (IDF) bestimmt. Andere Standardverfahren werden Gesamtstickstoff, Asche, Feuchtigkeit und Kohlenhydrate quantifizieren.

Appetit, Sättigung und Ernährung von Säuglingen: Gekürzte Versionen der Fragebögen zur Ernährung von Säuglingen, die in der Studie II zu den Ernährungspraktiken von Säuglingen im Alter von 1 Monat, 3 Monaten und 6 Monaten verwendet wurden, bewerten den Bericht der Mutter über die Nahrungsaufnahme des Säuglings. Die mütterliche Wahrnehmung des Appetits des Säuglings wird mit dem Fragebogen zum Essverhalten von Babys gemessen. Säuglingsschlaf: Der Sadeh Brief Infant Sleep Questionnaire wurde anhand von Aktigraphie validiert und wird zur Beurteilung des Schlafverhaltens bei jedem Besuch verwendet. Zusätzliche potenzielle Confounder: Siehe spezifisches Ziel 1.

Datenanalyse (spezifisches Ziel 2) Statistische Analyse: Die übergeordnete Haupthypothese ist, dass Milch-Adipozytokin-Konzentrationen mit einer veränderten Körperzusammensetzung im Alter von 1 bis 6 Monaten und mit erhöhten C-Peptid- oder HOMA-IR-Werten im Alter von 6 Monaten verbunden sind. unabhängig von möglichen Confoundern. Beispielhypothese 2.a1: Höhere Konzentrationen des appetitzügelnden Hormons Leptin im 1. und/oder 3. Monat werden mit einer geringeren Gewichtszunahme des Säuglings in Verbindung gebracht, was insbesondere eine geringere FFM-Zunahme im 1. bis 6. Monat widerspiegelt. Wir werden lineare und logistische Regression mit gemischten Effekten als primären Analyseansatz verwenden, um diese und verwandte Hypothesen anzugehen. Wachstums- und Körperzusammensetzungsdaten werden seriell sein (0 [für Gewicht], 1, 3 und 6 Monate), die unter Verwendung von Modellen mit gemischten Effekten untersucht werden, die die Kovarianzstruktur der wiederholten Messungen innerhalb des Subjekts modellieren und fachspezifisch ermöglichen Schnittpunkt und zu modellierende Steigungen. Milch-Adipozytokine sind die interessierenden unabhängigen Variablen. Da ihre individuellen Beziehungen zum Säuglingswachstum und anderen Ergebnissen möglicherweise nicht linear sind, werden Quintile oder Quartile von Milch-Adipozytokinen sowie kontinuierlich verteilte Variablen untersucht. Mehrere Milch-Adipozytokine werden gleichzeitig in endgültige Modelle aufgenommen, um ihre unabhängigen Wirkungen auf die Säuglingsergebnisse zu testen und ihre Gesamtwirkungen zu bewerten (Erklärung der Varianz).