Mors fedme, morsmelksammensetning og spedbarnsvekst ((MILK))

Generell studiedesign En prospektiv observasjons-svangerskapskohort av 360 ikke-diabetiske mødre, som utelukkende ammer spedbarnene sine til minst 1 måned etter fødselen, vil bli rekruttert i andre trimester av svangerskapet, på tvers av et bredt spekter av mors BMI før graviditet, med like mange normalvektige, overvektige og overvektige kvinner. Kvinnene vil bli rekruttert ved to studiesentre (University of Oklahoma Health Sciences Center i Oklahoma City, OK og Health Partners Research Foundation i Saint Paul/Minneapolis, MN), med maternal og spedbarns diett, kroppssammensetning og metabolsk helse fulgt prospektivt ved 1. , 3 og 6 måneder post-partum i spesifikke mål 1 og 2. I spesifikke mål 3 vil en undergruppe av 60 av disse mor/barn-dyadene "Mødre i fokus" (30 OB og 30 NW-mødre) rekrutteres for ytterligere bioprøver innsamling, inkludert melkeprøver etter 2 og 6 måneder, endringer i mors kroppssammensetning ved bruk av DXA, spedbarns DXA, metabolomisk sammenligning av serielle melkeprøver og oppfølging til 12 i stedet for 6 måneder.

Datainnsamlingselementer:

Mors fett. Mors BMI-status før graviditet (NW, OW, OB) er den primære eksponeringen som brukes til å drive studien. Før-graviditets BMI vil bli bestemt ved å bruke første (grunnlinje) klinikkvekter fra elektroniske journaler (EMR) (ikke mer enn 90 d. etter siste menstruasjon), og statur målt av forskningspersonell ved mors første besøk til våre forskningssentre . BMI vil bli kategorisert som undervektig (BMI <18,5), normalvekt (BMI 18,5 - <25), overvektig (BMI 25 - <30) og fedme (BMI ≥30 kg/m2).

Gestasjonell vektøkning (GWG) og vekttap/retensjon etter fødsel: Total GWG vil bli beregnet som forskjellen mellom fødselsvekt og baselinevekt (som dokumentert ovenfor). Hvis vekt ved fødsel ikke er tilgjengelig, vil siste prenatale vekt i EMR, ≤14 dager fra fødsel, brukes. Trimesterspesifikk GWG vil bli beregnet fra EMR. GWG vil bli brukt som en kontinuerlig og som en kategorisk eksponering (overdreven, passende og utilstrekkelig, i henhold til IOM 2009-retningslinjene. Tidlig PP vekttap (fra fødsel til 1 måned postpartum), og senere PP vekttap fra 1 måned til 3 måneder PP vil bli beregnet. Samtidige endringer i mors vekt og melkeadipocytokinnivåer fra 0 - 1 måned og 1 - 3 måneder vil bli undersøkt, med en hypotese om at større PP vekttap (lavere vektretensjon) er assosiert med lavere nivåer av melkeadipocytokiner.

Melkeinnsamling: Endringer i melkesammensetning vil bli vurdert fra 1 til 3 måneder. Definisjon av eksklusiv amming: Studiepersonell vil bekrefte at alle spedbarn har blitt utelukkende matet med morsmelk (dvs. ingen formel, ingen væske annet enn vann og ingen faste stoffer) minst 14 dager før 1-månedsbesøket og planlegger å fortsette utelukkende å amme til 3 måneder. Eksklusiv morsmelkfôring vil inkludere enhver kombinasjon av utpresset morsmelk og morsmelk som mates via brystet.

Protokoll for innsamling av morsmelk: Mor og barn vil rapportere til studiestedet 1 og 3 måneder (± 5 dager) etter fødselen, mellom 8:00-10:00, minst 1½ time siden siste mating og mens moren har fastet minst 1 time. En spedbarnsvekt før mating vil bli oppnådd ved å bruke en høysensitivitetsskala, moren vil bli oppmuntret til å mate barnet ad libitum fra begge brystene til det er frivillig tilfredsstilt, og en spedbarnsvekt etter mating vil oppnås (forskjell = melkeproduksjon). Spørreskjemainformasjon, morsantropometri og spedbarns kroppssammensetningsdata vil bli samlet inn, og 2 timer senere vil moren gi en enkelt brystekspresjonsprøve ved hjelp av en elektrisk brystpumpe (Medela, Inc., levert av studieteamet). Morsmelk vil blandes, alikvoteres og oppbevares ved -80°C.

Melkeadipocytokinanalyser: Melkeprøver vil bli tint i kjøleskapet og vortexet. Melkefett vil bli separert fra den vandige fasen ved sentrifugering ved 3000 g i 10 minutter ved 4°C. Den resulterende skummetmelken vil bli analysert ved å bruke kommersielt tilgjengelige immunanalysesett for insulin, IGF-1/BP, adiponectin med høy molekylvekt, visfatin, leptin, IL-1β, IL-6, IL-10 og TNF-α. Glukose vil bli målt ved glukoseoksidasemetoden. For å undersøke ytterligere cytokin- og vekstfaktorkonsentrasjoner (f.eks. interleukiner, interferoner, TGF-β) på en måte som bevarer prøven, vil en multipleksanalyse (EMD Millipore, Billerica, MA) og Luminex 200 Multiplex-analysatoren bli brukt.

Dataanalyse for spesifikt mål 1: For hver av melkeadipocytokinene (kontinuerlige avhengige variabler), vil separate regresjonsmodeller med blandede effekter (for å ta hensyn til seriemelkedata) konstrueres, som først tester rå assosiasjoner av melk IL-6 ved både 1 og 3 -måneder med hver mors fettvariabel (overdreven GWG, BMI-status før graviditet, total GWG, trimesterspesifikk GWG, tidlig og senere PP vekttap), og deretter minimalt justerte modeller (også justert for spedbarns kjønn og svangerskapsalder, studiesenter (OK eller MN), mors alder, paritet, etnisitet og mors sosioøkonomiske status) og til slutt fullstendig justerte regresjonsmodeller inkludert de variablene som er fastslått å være potensielle konfoundere. I sekundære analyser vil mulig effektmodifisering av mors fettsammenheng vurderes ved å legge til interaksjonsbegreper. Hvis interaksjonsleddet er signifikant, vil det bli gjennomført en stratifisert analyse.

Datainnsamling for spesifikt mål 2 spedbarns kroppssammensetning. Total kroppssammensetning vil bli målt ved hjelp av luftforskyvningspletysmografi (ADP) dvs. Pea Pod (v 3.1.1), en rask, gyldig, svært pålitelig (% fett CV% < 2,5% i våre hender) metode for total kroppsvolum estimering som totalt kroppsfett (FM) og fettfri masse (FFM) bestemmes ved hjelp av prediksjonsligninger. Både University of Minnesota og University of Oklahoma har samme ADP (samme produsent, modell og programvareversjoner).

Spedbarns insulinsekresjon og resistens ved 6 måneder: C-peptid, eller forbindende peptid, som markør for insulinsekresjon vil bli samlet. Serum C-peptid skilles ut i ekvimolare mengder av bukspyttkjertelen som insulin, men er et mer stabilt mål fordi det ikke er utsatt for nedbrytning etter hemolyse. C-peptid ble brukt som en markør for føtal betacellefunksjon i HAPO-studien (Hyperglycemia and Adverse Pregnancy Out-come) for å vurdere effekten av mors fedme og svangerskapsdiabetes på ugunstige graviditets- og spedbarnsutfall. Insulinresistens vil bli estimert ved bruk av homeostase modellvurdering (HOMA-IR). Blod vil bli innhentet via hælstokk hos spedbarnet på tidspunktet for det 6-måneders besøket til studiesenteret, som rutine i våre laboratorier, som gir ~ 1,0 cc blod. Fullblod vil bli holdt på is frem til sentrifugering i laboratoriene våre, og 0,5 ml serum alikvotert ved lagret ved -80 C til det sendes til Dr. Fields' laboratorium for analyse ved bruk av ELISA (Millipore, Billerica, MA; Intra-assay CV = 5 %; Inter-assay CV = 6 %). Tolkning av C-peptid krever blodsukkernivå som vil bli målt i samme blodprøve ved bruk av glukoseoksidasemetoden.

Makronæringsinnhold i melk: Totalt fettinnhold vil bli målt ved Mojonnier-metoden. Fettsyresammensetningen vil bli vurdert ved gasskromatografi ved bruk av International Dairy Federation (IDF) metoder. Andre standardmetoder vil kvantifisere total nitrogen, aske, fuktighet og karbohydrater.

Spedbarns appetitt, metthet og kosthold: Forkortede versjoner av spedbarnsdiettspørreskjemaene brukt i spedbarnsmatingspraksisstudie II etter 1 måned, 3 måneder og 6 måneder vil vurdere mors rapport om spedbarns diettinntak. Mors oppfatning av spedbarns appetitt vil bli målt ved å bruke spørreskjemaet Baby Eating Behavior Questionnaire. Spedbarnssøvn: Sadeh Brief Infant Sleep Questionnaire har blitt validert mot aktigrafi og vil bli brukt til å vurdere soveatferd ved hvert besøk. Ytterligere potensielle konfoundere: Se spesifikke mål 1.

Dataanalyse (spesifikt mål 2) Statistisk analyse: Den overordnede primære hypotesen er at melkeadipocytokinkonsentrasjoner vil være assosiert med endret kroppssammensetning fra alderen 1 til 6 måneder, og med forhøyet C-peptid eller HOMA-IR ved 6 måneder, uavhengig av potensielle konfoundere. Eksempelhypotese 2.a1: Høyere nivåer av det appetittdempende hormonet leptin etter 1 og/eller 3 måneder vil være assosiert med lavere vektøkning hos spedbarn, noe som spesifikt gjenspeiler lavere FFM-økning fra 1 - 6 måneder. Vi vil bruke blandede effekter lineær og logistisk regresjon som den primære analysetilnærmingen for å adressere denne og relaterte hypoteser. Vekst- og kroppssammensetningsdata vil være serielle (0 [for vekt], 1, 3 og 6 måneder), som vil bli undersøkt ved bruk av blandede effekter-modeller som modellerer kovariansstrukturen til de gjentatte målene innen faget og gir mulighet for fagspesifikke avskjæring og bakker som skal modelleres. Melkeadipocytokiner er de uavhengige variablene av interesse. Fordi deres individuelle forhold til spedbarnsvekst og andre utfall kanskje ikke er lineære, vil kvintiler eller kvartiler av melkeadipocytokiner samt kontinuerlig distribuerte variabler bli undersøkt. Flere melkeadipocytokiner vil bli inkludert samtidig i endelige modeller, for å teste deres uavhengige effekter på spedbarnsutfall og for å vurdere deres aggregerte effekter (varians forklart).