Obesidade materna, composição do leite materno e crescimento infantil ((MILK))

Projeto de estudo geral Uma coorte observacional prospectiva de 360 ​​mães não diabéticas, que amamentam exclusivamente seus filhos até pelo menos 1 mês após o parto, será recrutada no segundo trimestre da gravidez, em uma ampla faixa de IMC materno pré-gravidez, com igual número de mulheres com peso normal, sobrepeso e obesas. As mulheres serão recrutadas em dois centros de estudo (University of Oklahoma Health Sciences Center em Oklahoma City, OK e Health Partners Research Foundation em Saint Paul/Minneapolis, MN), com dieta materna e infantil, composição corporal e saúde metabólica acompanhadas prospectivamente em 1 , 3 e 6 meses após o parto nos Objetivos Específicos 1 e 2. No Objetivo Específico 3, um subconjunto de 60 dessas díades mãe/bebê "Mães em Foco" (30 OB e 30 mães NW) será recrutado para bioespécimes adicionais coleta, incluindo amostras de leite aos 2 e 6 meses, mudanças na composição corporal materna usando DXA, DXA infantil, comparação metabolômica de amostras seriadas de leite e acompanhamento até 12 em vez de 6 meses.

Elementos de coleta de dados:

Adiposidade Materna. O status de IMC pré-gravidez materno (NW, OW, OB) é a exposição primária usada para alimentar o estudo. O IMC pré-gravidez será determinado usando os primeiros pesos clínicos (linha de base) dos registros médicos eletrônicos (EMR) (não mais de 90 dias após o último período menstrual) e a estatura medida pela equipe de pesquisa na primeira visita da mãe aos nossos centros de pesquisa . O IMC será classificado como baixo peso (IMC <18,5), peso normal (IMC 18,5 - <25), sobrepeso (IMC 25 - <30) e obesidade (IMC ≥30 kg/m2).

Ganho de peso gestacional (GWG) e perda/retenção de peso pós-parto: O GWG total será calculado como a diferença entre o peso do parto e o peso inicial (conforme documentado acima). Se o peso no parto não estiver disponível, será usado o último peso pré-natal no EMR, ≤14 dias após o nascimento. O GWG específico do trimestre será calculado a partir do EMR. O GWG será usado como uma exposição contínua e categórica (excessiva, adequada e insuficiente, de acordo com as diretrizes do IOM 2009. A perda de peso PP precoce (desde o parto até 1 mês pós-parto) e a perda de peso PP posterior de 1 mês a 3 meses PP serão calculadas. Alterações simultâneas no peso materno e nos níveis de adipocitocinas no leite de 0 a 1 mês e 1 a 3 meses serão examinadas, levantando a hipótese de que uma maior perda de peso PP (menor retenção de peso) está associada a níveis mais baixos de adipocitocinas no leite.

Coleta de Leite: As mudanças na composição do leite serão avaliadas de 1 a 3 meses. Definição de aleitamento materno exclusivo: A equipe do estudo confirmará que todos os bebês foram alimentados exclusivamente com leite materno (ou seja, sem fórmula, sem líquido além de água e sem sólidos) pelo menos 14 dias antes da consulta de 1 mês e planeje continuar amamentando exclusivamente até os 3 meses. A amamentação exclusiva com leite materno incluirá qualquer combinação de leite materno ordenhado e leite materno alimentado pelo peito.

Protocolo de Coleta de Leite Materno: Mãe e filho comparecerão ao local do estudo 1 e 3 meses (± 5 dias) após o parto, entre 8h00 e 10h00, pelo menos 1 hora e meia desde a última mamada e enquanto a mãe jejum de pelo menos 1 hora. Um peso infantil pré-alimentação será obtido usando uma escala de alta sensibilidade, a mãe será encorajada a alimentar a criança ad libitum de ambos os seios até que esteja voluntariamente satisfeita, e um peso infantil pós-alimentação será obtido (diferença = produção de leite). Informações do questionário, antropometria materna e dados da composição corporal do bebê serão coletados e, 2 horas depois, a mãe fornecerá uma amostra de expressão da mama única usando uma bomba elétrica de leite (Medela, Inc., fornecida pela equipe do estudo). O leite materno será misturado, aliquotado e armazenado a -80°C.

Ensaios de adipocitocinas do leite: As amostras de leite serão descongeladas na geladeira e submetidas a vórtex. A gordura do leite será separada da fase aquosa por centrifugação a 3.000g por 10 minutos a 4°C. O leite desnatado resultante será testado usando kits de imunoensaio comercialmente disponíveis para insulina, IGF-1/BP, adiponectina de alto peso molecular, visfatina, leptina, IL-1β, IL-6, IL-10 e TNF-α. A glicose será dosada pelo método da glicose oxidase. Para examinar as concentrações adicionais de citocinas e fatores de crescimento (por exemplo, interleucinas, interferons, TGF-β) de uma maneira que conserve a amostra, um ensaio multiplex (EMD Millipore, Billerica, MA) e o analisador Luminex 200 Multiplex serão empregados.

Análise de dados para o objetivo específico 1: Para cada uma das adipocitocinas do leite (variáveis ​​dependentes contínuas), serão construídos modelos de regressão de efeitos mistos separados (para contabilizar os dados seriados do leite), primeiro testando associações brutas de IL-6 do leite em 1 e 3 -meses com cada variável de adiposidade materna (GWG excessivo, status de IMC pré-gravidez, GWG total, GWG específico do trimestre, perda de peso PP precoce e posterior) e, em seguida, modelos minimamente ajustados (também ajustados para sexo infantil e idade gestacional, centro de estudos (OK ou MN), idade materna, paridade, etnia e status socioeconômico materno) e, finalmente, modelos de regressão totalmente ajustados, incluindo as variáveis ​​determinadas como potenciais fatores de confusão. Em análises secundárias, a possível modificação do efeito das associações de adiposidade materna será avaliada pela adição de termos de interação. Se o termo de interação for significativo, será realizada uma análise estratificada.

Coleta de Dados para Objetivo Específico 2 Composição Corporal Infantil. A composição corporal total será medida usando pletismografia de deslocamento de ar (ADP), ou seja, Vagem de Ervilha (v 3.1.1), um método rápido, válido e altamente confiável (% de gordura CV% < 2,5% em nossas mãos) de estimativa do volume corporal total a partir do qual a gordura corporal total (FM) e a massa livre de gordura (FFM) são determinadas usando equações de previsão. Tanto a Universidade de Minnesota quanto a Universidade de Oklahoma têm o mesmo ADP (mesmo fabricante, modelo e versões de software).

Secreção e resistência à insulina infantil aos 6 meses: Peptídeo C, ou peptídeo de conexão, como marcador de secreção de insulina será coletado. O peptídeo C sérico é secretado em quantidades equimolares pelo pâncreas como insulina, mas é uma medida mais estável porque não é propenso à degradação após a hemólise. O peptídeo C foi usado como um marcador da função das células beta fetais no estudo HAPO (hiperglicemia e resultado adverso da gravidez) para avaliar os efeitos da obesidade materna e do diabetes gestacional na gravidez adversa e nos resultados infantis. A resistência à insulina será estimada usando o modelo de avaliação da homeostase (HOMA-IR). O sangue será obtido por picada no calcanhar do lactente no momento da visita de 6 meses ao centro de estudo, como é rotina em nossos laboratórios, que rende ~ 1,0 cc de sangue. O sangue total será mantido em gelo até a centrifugação em nossos laboratórios, e 0,5 mL de soro dividido em alíquotas e armazenado a -80 C até enviado ao laboratório do Dr. Fields para análise usando ELISA (Millipore, Billerica, MA; Intra-ensaio CV = 5 %; CV inter-ensaio = 6%). A interpretação do peptídeo C requer o nível de glicose no sangue, que será medido na mesma amostra de sangue usando o método da glicose oxidase.

Teor de Macronutrientes do Leite: O teor total de gordura será medido pelo método Mojonnier. A composição de ácidos graxos será avaliada por cromatografia gasosa usando os métodos da Federação Internacional de Laticínios (IDF). Outros métodos padrão quantificam nitrogênio total, cinzas, umidade e carboidratos.

Apetite, Saciedade e Dieta Infantil: Versões abreviadas dos questionários de dieta infantil usados ​​no Estudo de Práticas de Alimentação Infantil II em 1 mês, 3 meses e 6 meses avaliarão o relato materno da ingestão alimentar infantil. A percepção materna do apetite infantil será medida por meio do Questionário de Comportamento Alimentar do Bebê. Sono Infantil: O Questionário Breve de Sono Infantil Sadeh foi validado contra a actigrafia e será usado para avaliar o comportamento do sono em cada visita. Potenciais Confundidores Adicionais: Ver Objetivo Específico 1.

Análise de Dados (Objetivo Específico 2) Análise Estatística: A hipótese primária abrangente é que as concentrações de adipocitocinas no leite estarão associadas à composição corporal alterada de 1 a 6 meses de idade e com peptídeo C elevado ou HOMA-IR aos 6 meses, independente de potenciais confundidores. Exemplo Hipótese 2.a1: Níveis mais altos do hormônio supressor do apetite leptina em 1 e/ou 3 meses estarão associados a menor ganho de peso infantil, refletindo especificamente menor ganho de MLG de 1 a 6 meses. Usaremos regressão linear e logística de efeitos mistos como a abordagem de análise primária para abordar esta e outras hipóteses relacionadas. Os dados de crescimento e composição corporal serão seriais (0 [para peso], 1, 3 e 6 meses), que serão examinados usando modelos de efeitos mistos que modelam a estrutura de covariância das medidas repetidas dentro do sujeito e permitem análises específicas do sujeito interceptação e declives a serem modelados. As adipocitocinas do leite são as variáveis ​​independentes de interesse. Como suas relações individuais com o crescimento infantil e outros resultados podem não ser lineares, serão examinados quintis ou quartis de adipocitocinas do leite, bem como variáveis ​​continuamente distribuídas. Múltiplas adipocitocinas do leite serão incluídas simultaneamente nos modelos finais, para testar seus efeitos independentes nos resultados infantis e para avaliar seus efeitos agregados (variância explicada).