脳卒中患者におけるプロリダーゼ酵素活性

虚血性脳卒中は、すべての脳卒中症例の約 80 ～ 85% を占め、血栓による脳血流の中断によって引き起こされます。 活性酸素種 (ROS) の生成とその酸化代謝活性のために、脳は酸化ストレスに対して非常に敏感です。 この特徴は、虚血性および出血性脳損傷の病因において重要な役割を果たします.細胞質エキソペプチダーゼであり、マトリックスメタロプロテイナーゼ（MMP）ファミリーのメンバーであるプロリダーゼは、プロリンまたはヒドロキシプロリンのカルボキシ末端からイミノジペプチドを切断し、積極的に関与しています.コラーゲンの代謝に。 脳の MMP 活性は栄養/酸化ストレスと相関し、再灌流中に増加することが示されています。 さらに、脳卒中患者では、血清MMPレベルの上昇が報告されています。 虚血性脳卒中の転帰と発生を予測するバイオマーカーは、予防と治療にとって非常に重要です.しかし、血清プロリダーゼ活性（SPA）は、私たちの知る限り、急性虚血性脳卒中（AIS）患者で以前に評価されていません. したがって、この研究では、AIS患者のSPAレベルが潜在的な診断および予後マーカーとして使用できるかどうかを調査することを目的としています.この研究では、AISの発症から24時間以内に入院した20〜85歳の37人の患者.前向きに評価されました。 対照群は、病気のない同年齢の 37 人の健康なボランティアで構成されていました。 すべての患者に対して、神経学的検査、血液生化学検査、血球計算検査、心電図検査、および胸部前後 X 線検査からなる包括的な身体検査が行われました。 AIS 患者は、経胸壁心エコー検査、マルチ スライス コンピューター断層撮影 (CT)、および両側頸動脈 - 椎骨動脈ドップラー超音波検査を受けました。 脳卒中の重症度を決定するために、脳卒中後 24 時間、48 時間、および 28 日に測定された国立衛生研究所脳卒中尺度 (NIHSS) スコアが使用されました。 TOAST) 基準、心臓塞栓症、大動脈アテローム性動脈硬化症、小動脈閉塞、その他の原因が特定された脳卒中、または原因不明の脳卒中など。 SPA の測定方法は、Myara らによって定義されました。 オズカンらの最適化された方法。使われた。 プロリンレベルを測定することにより、プロリダーゼ活性を分光測光法で評価した。 簡単に説明すると、500 μL プレインキュベーション溶液 (50 mmol/L Tris 塩酸塩緩衝液、水素の力 (pH) 7.8、1 mmol/L 内因性抗酸化物質グルタチオン (GSH)、5 mmol/L 塩化マンガン (II) (MnCl2)、 ０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００）と１００μＬの血清を混合した。次いで、この混合物を３７℃で３時間プレインキュベートした。 100 μL のプレインキュベーション血清を 100 μL の 144 mmol/L Gly-Pro 溶液に加え、この混合物を 37°C で 30 分間インキュベートしました。 インキュベーション後、0.45mol/Lトリクロロ酢酸溶液1mlをインキュベーションチューブに素早く加え、インキュベーション反応を停止した。 この混合物を１５００ｒｐｍで５分間遠心分離し、５００μＬの上清を除去した。