Prolidasenzymaktivitet hos strokepatienter

Ischemisk stroke utgör cirka 80-85 % av alla strokefall och orsakas av avbrott i cerebralt blodflöde på grund av en blodpropp. På grund av produktionen av reaktiva syrearter (ROS) och dess oxidativa metabolitaktivitet är hjärnan mycket känslig för oxidativ stress. Denna egenskap spelar en viktig roll i patogenesen av ischemiska och hemorragiska hjärnskador. Prolidas, som är ett cytosoliskt exopeptidas och en medlem av familjen matrismetalloproteinas (MMP), klyver iminodipeptider från karboxiterminala ändar av prolin eller hydroxiprolin och är aktivt involverad i kollagenmetabolismen. Det har visats att hjärnans MMP-aktivitet är korrelerad med närings/oxidativ stress och ökar under reperfusion. Hos strokepatienter har dessutom förhöjda MMP-nivåer i serum rapporterats. Biomarkörer som förutsäger utfallet och förekomsten av ischemisk stroke är kritiskt viktiga för förebyggande och behandling. Serumprolidasaktivitet (SPA) har dock inte tidigare utvärderats hos patienter med akut ischemisk stroke (AIS) såvitt vi vet. I den här studien syftar det därför till att undersöka om SPA-nivåer hos AIS-patienter kan användas som en potentiell diagnostisk och prognostisk markör. utvärderades prospektivt. Kontrollgruppen bestod av 37 friska frivilliga i liknande ålder utan någon sjukdom. En omfattande fysisk undersökning gjordes bestående av en neurologisk undersökning, blodbiokemi och blodtalsundersökningar, elektrokardiografi och en bakre-främre lungröntgen för alla patienter. AIS-patienter genomgick transthorax ekokardiografi, multi-slice datortomografi (CT) och bilateral carotis-vertebral artär Doppler-ultraljud. National Institutes of Health Stroke Scale (NIHSS) poäng, uppmätt vid 24 timmar, 48 timmar och 28 dagar efter stroke, användes för att bestämma graden av stroke. Klassificeringen av ischemiska strokesubtyper gjordes enligt Trial of Org 10172 i Acute Stroke Treatment ( TOAST) kriterier, som kardioemboli, storartär ateroskleros, ocklusion av små artärer, stroke av annan fastställd orsak eller obestämd orsak. Mätmetoden för SPA definierades av Myara et al. Den optimerade metoden av Özcan et al. var använd. Prolidasaktivitet utvärderades med en spektrofotometrisk metod genom att mäta prolinnivåerna. Kortfattat, 500 μL förinkubationslösning (50 mmol/L Tris-hydrokloridbuffert med effekt av väte (pH) 7,8, med 1 mmol/L endogen antioxidant glutation (GSH), 5 mmol/L mangan(II)klorid (MnCl2), och 0,1 % Triton X-100) och 100 μL serum blandades; denna blandning förinkuberades sedan i 3 timmar vid 37°C. En 100-μL volym av förinkubationsserum sattes till 100 μL 144 mmol/L Gly-Pro-lösning, och denna blandning inkuberades i 30 minuter vid 37°C. Efter inkubationen sattes 1 ml 0,45 mol/L triklorättiksyralösning snabbt till inkubationsröret och inkubationsreaktionen stoppades. Denna blandning centrifugerades vid 1500 rpm i 5 minuter och 500 μL supernatant avlägsnades.