Actividad de la enzima prolidasa en pacientes con accidente cerebrovascular

El accidente cerebrovascular isquémico constituye alrededor del 80-85% de todos los casos de accidente cerebrovascular y es causado por la interrupción del flujo sanguíneo cerebral debido a un coágulo de sangre. Debido a la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) y su actividad de metabolitos oxidativos, el cerebro es muy sensible al estrés oxidativo. Esta característica juega un papel importante en la patogenia de las lesiones cerebrales isquémicas y hemorrágicas. La prolidasa, que es una exopeptidasa citosólica y miembro de la familia de las metaloproteinasas de matriz (MMP), escinde los iminodipéptidos de los extremos carboxi-terminales de la prolina o la hidroxiprolina y participa activamente en el metabolismo del colágeno. Se ha demostrado que la actividad cerebral de MMP se correlaciona con el estrés nutritivo/oxidativo y aumenta durante la reperfusión. Además, en pacientes con accidente cerebrovascular, se han informado niveles séricos elevados de MMP. Los biomarcadores que predicen el resultado y la aparición de un accidente cerebrovascular isquémico son de vital importancia para la prevención y el tratamiento. Sin embargo, hasta donde sabemos, la actividad de la prolidasa sérica (SPA) no se ha evaluado previamente en pacientes con accidente cerebrovascular isquémico agudo (AIS). Por lo tanto, en este estudio, el objetivo es investigar si los niveles de SPA en pacientes con AIS pueden usarse como un posible marcador de diagnóstico y pronóstico. fueron evaluados prospectivamente. El grupo control estuvo formado por 37 voluntarios sanos de edad similar sin ninguna enfermedad. A todos los pacientes se les realizó un examen físico completo consistente en examen neurológico, bioquímica sanguínea y hemograma, electrocardiograma y radiografía de tórax posteroanterior. Los pacientes con AIS se sometieron a ecocardiografía transtorácica, tomografía computarizada (TC) de múltiples cortes y ecografía Doppler de la arteria carótido-vertebral bilateral. Se utilizaron las puntuaciones de la escala de accidentes cerebrovasculares de los Institutos Nacionales de Salud (NIHSS), medidas a las 24 horas, 48 ​​horas y 28 días después del accidente cerebrovascular, para determinar la gravedad del accidente cerebrovascular. TOAST), como cardioembolismo, aterosclerosis de arterias grandes, oclusión de arterias pequeñas, accidente cerebrovascular de otra causa determinada o causa indeterminada. El método de medición para SPA fue definido por Myara et al. El método optimizado de Özcan et al. se utilizó. La actividad de prolidasa se evaluó con un método espectrofotométrico, midiendo los niveles de prolina. Brevemente, 500 μL de solución de preincubación (50 mmol/L de tampón de clorhidrato de Tris a potencia de hidrógeno (pH) 7,8, con 1 mmol/L de glutatión antioxidante endógeno (GSH), 5 mmol/L de cloruro de manganeso (II) (MnCl2), y Triton X-100 al 0,1 %) y 100 μL de suero; esta mezcla luego se preincubó durante 3 horas a 37°C. Se añadió un volumen de 100 μL de suero de preincubación a 100 μL de solución de Gly-Pro de 144 mmol/L y esta mezcla se incubó durante 30 min a 37 °C. Después de la incubación, se añadió rápidamente 1 ml de solución de ácido tricloroacético 0,45 mol/L al tubo de incubación y se detuvo la reacción de incubación. Esta mezcla se centrifugó a 1500 rpm durante 5 min y se extrajeron 500 μL de sobrenadante.