ワルデンシュトレーム病における反復変異の検出 (DigiWAL)

MYD88 の L265P 変異は、ワルデンシュトレーム病の発生における初期の発癌性イベントとして現れ、IgM ステージへの未確定意義のモノクローナルガンマパシー (MGUS) にすでに存在している可能性があり、この病気の 2 つのステージ間の連続性を示唆しています。 疾患のマーカーとしての IgM の測定には限界があります。これは、クローン集団の直接的な定量化を可能にせず、分泌が不十分な形態の場合にこれに失敗して行われるためです。 したがって、微小残存病変のマーカーとして MYD88 の L265P 変異をモニタリングすることは、これらの疾患における主要な関心のバイオマーカーのようです。 特に治療中のこのマーカーの速度論は、初期段階で患者の治療管理を変更し、治療に対する耐性のリスクを評価することを可能にする可能性があります。

いくつかの公開された研究は、特に対立遺伝子特異的 PCR による突然変異の定量化によって、MW の MYD88 の L265P 突然変異を監視することに関心があることを示しています。 調査した検出限界は 0.1% でした。 新しい技術、特にデジタル PCR の最近の開発により、最小限の残存疾患モニタリングの概念とより互換性のある、より低い検出しきい値を取得できるようになりました。

この研究の独創性は、影響を受けたすべての生物学的コンパートメント (血液、血漿、骨髄、または CD19+ 細胞) における MYD88 L265P 変異の定量化の比較に基づいていますが、特に微小残存病変の 2 点での変異のモニタリングに基づいています (治療中および治療終了）。

プロジェクトの一部の 1 つは、循環腫瘍 DNA (ctDNA) における MYD88 遺伝子の L265P 突然変異の対立遺伝子頻度の研究です。 多くの病状、特にホジキンリンパ腫やびまん性大細胞型 B リンパ腫などの他の B リンパ球性血液学で、循環腫瘍 DNA に腫瘍レベルで存在する変異が見られることが示されています。 したがって、患者の血漿中を循環する遊離腫瘍 DNA の分析を使用して、ミエログラムまたは骨髄生検よりも侵襲性の低いサンプルで分子レベルで疾患を特徴付けることができます。 他の関連する突然変異の検索も、プロジェクトの独創性を強化します。 これらの結合されたデータは、患者の臨床管理に変化をもたらすことができなければなりません。

この研究では、MYD88 の L265P 変異の対立遺伝子頻度を比較します。 3 つの異なる技術による: 特定の対立遺伝子 PCR、デジタル PCR、新世代シーケンス。 このようにして、研究者は、残存疾患のマーカーとして使用される最高の感度と特異性を持つ技術を評価します。 これらのデータは、参照技術であるタンパク質電気泳動と比較されます。 この評価は、全単核細胞、DNAct、骨髄、および CD19+ 選別細胞で実施されます。 次に、治験責任医師は、治療中と治療終了の 2 つの時点で、この変異の動態を追跡します。

これらの腫瘍の変異プロファイルの特徴付けにより、予後因子を定義することができ、潜在的な新しい治療標的を特定できる可能性があります。 この研究は、新世代シーケンシングによって実現されます。 CXCR4など、治療抵抗性に関与する変異を持つ遺伝子のいくつかが研究されます。 CXCR4 の変異は、イブルチニブに対する耐性に関与しています。 ARID1A 変異は、TP53、KMT2D、CD79B、MYBBP1A 変異と同様に、症例の 20% にも見られます。