Toistuvien mutaatioiden havaitseminen Waldenströmin taudissa (DigiWAL)

MYD88:n L265P-mutaatio esiintyy varhaisena onkogeenisenä tapahtumana Waldenströmin taudin ilmaantumisen yhteydessä, ja se voi olla jo läsnä määrittämättömän merkitsevyyden monoklonaalisesta gammapatiasta (MGUS) IgM-vaiheeseen, mikä viittaa jatkumoon taudin kahden vaiheen välillä. IgM:n määrittämisellä taudin merkkiaineena on rajansa, koska se ei salli kloonipopulaation suoraa kvantifiointia, ja se tehdään huonosti erittyvien muotojen tapauksessa, jos tämä ei onnistu. MYD88:n L265P-mutaation seuraaminen minimaalisen jäännössairauden merkkinä näyttää siksi olevan näissä sairauksissa erittäin kiinnostava biomarkkeri. Tämän markkerin kinetiikka erityisesti hoidon aikana voisi mahdollistaa potilaiden terapeuttisen hoidon muuttamisen varhaisessa vaiheessa ja hoitoresistenssin riskin arvioimisen.

Useat julkaistut tutkimukset osoittavat mielenkiintoa seurata MYD88:n L265P-mutaatiota MW:ssä, erityisesti kvantifioimalla mutaatio alleelispesifisellä PCR:llä. Tutkittu havaitsemisraja oli 0,1 %. Uusien tekniikoiden ja erityisesti digitaalisen PCR:n viimeaikainen kehitys mahdollistaa alhaisempien havaitsemiskynnysten saavuttamisen, jotka voisivat olla paremmin yhteensopivat minimaalisen jäännöstaudin seurannan kanssa.

Tämän tutkimuksen omaperäisyys perustuu MYD88 L265P -mutaation kvantifioinnin vertailuun kaikissa sairastuneissa biologisissa osastoissa (veri, plasma, luuydin tai CD19+-solut), mutta erityisesti mutaation seurantaan kahdessa minimaalisen jäännössairauden pisteessä ( hoidon puolivälissä ja hoidon lopussa).

Hankkeen yhtenä osana tutkitaan MYD88-geenin L265P-mutaation alleelitaajuutta kiertävässä kasvain-DNA:ssa (ctDNA). Monissa patologioissa ja erityisesti muissa B-lymfosyyttisissä hematologioissa, kuten Hodgkinin lymfoomassa tai diffuusissa suursoluisessa B-lymfoomassa, on osoitettu, että kasvaintasolla esiintyviä mutaatioita voidaan löytää kiertävästä kasvain-DNA:sta. Potilaiden plasmassa kiertävän vapaan kasvain-DNA:n analyysiä voidaan siksi käyttää taudin karakterisoimiseen molekyylitasolla vähemmän invasiivisella näytteellä kuin myelogrammi- tai luuydinbiopsia. Myös muiden liittyvien mutaatioiden etsiminen vahvistaa projektin omaperäisyyttä. Näiden yhdistettyjen tietojen on voitava johtaa muutoksiin potilaiden kliinisessä hoidossa.

Tässä tutkimuksessa verrataan MYD88:n L265P-mutaation alleelitaajuutta. kolmella eri tekniikalla: spesifinen alleeli-PCR, digitaalinen PCR ja uuden sukupolven sekvensointi. Tällä tavalla tutkijat arvioivat tekniikkaa, jolla on paras herkkyys ja spesifisyys käytettäväksi jäännössairauden merkkiaineena. Näitä tietoja verrataan vertailutekniikkaan, proteiinielektroforeesiin. Tämä arviointi suoritetaan kokonaismononukleaarisissa soluissa, DNAct-soluissa, luuytimen ja CD19+-lajiteltujen solujen osalta. Sitten tutkijat seuraavat tämän mutaation kinetiikkaa hoidon aikana kahdessa kohdassa: hoidon puolivälissä ja hoidon lopussa.

Näiden kasvainten mutaatioprofiilin karakterisointi mahdollistaa prognostisten tekijöiden määrittämisen ja voi tunnistaa mahdollisia uusia terapeuttisia kohteita. Tämä tutkimus toteutetaan uuden sukupolven sekvensoinnilla. Joitakin geenejä, joissa on hoitoresistenssiin liittyviä mutaatioita, tutkitaan, kuten CXCR4. CXCR4:n mutaatiot liittyvät ibrutinibiresistenssiin. ARID1A-mutaatioita löytyy myös 20 %:ssa tapauksista sekä TP53-, KMT2D-, CD79B-, MYBBP1A-mutaatioita.