Ismétlődő mutációk kimutatása Waldenström-kórban (DigiWAL)

A MYD88 L265P mutációja a Waldenström-kór előfordulásának korai onkogén eseményeként jelenik meg, és már jelen lehet a meghatározatlan szignifikáció monoklonális gammapátiájában (MGUS) az IgM stádiumig, ami a betegség két szakasza közötti kontinuumra utal. Az IgM mint a betegség markere meghatározásának korlátai vannak, mivel nem teszi lehetővé a klonális populáció közvetlen számszerűsítését, és ennek hiányában a rosszul szekretáló formák esetében kerül sor. Ezért úgy tűnik, hogy a MYD88 L265P mutációjának, mint a minimális reziduális betegség markerejének monitorozása a legfontosabb biomarker ezekben a betegségekben. Ennek a markernek a kinetikája, különösen a kezelés során, lehetővé teheti a betegek terápiás kezelésének korai stádiumban történő módosítását és a kezeléssel szembeni rezisztencia kockázatának felmérését.

Számos publikált tanulmány mutatja a MYD88 L265P mutációjának nyomon követését MW-ban, különösen a mutáció allél-specifikus PCR-rel történő kvantifikálásával. A vizsgált kimutatási határ 0,1% volt. Az új technikák és különösen a digitális PCR közelmúltbeli fejlesztése lehetővé teszi alacsonyabb kimutatási küszöbök elérését, amelyek jobban összeegyeztethetők a minimális maradékbetegség-monitoring koncepciójával.

A tanulmány eredetisége a MYD88 L265P mutáció számszerűsítésének összehasonlításán alapul az összes érintett biológiai kompartmentben (vér, plazma, csontvelő vagy CD19+ sejtek), de különösen a mutáció monitorozásán a minimális reziduális betegség két pontján ( a kezelés közepén és végén).

A projekt egyik része a MYD88 gén L265P mutációjának allélgyakoriságának vizsgálata keringő tumor DNS-ben (ctDNS). Számos patológiában és különösen más B-limfocita hematológiákban, mint például a Hodgkin-limfómában vagy a diffúz nagysejtes B-limfómában kimutatták, hogy a keringő tumor-DNS-ben tumorszinten jelen lévő mutációk találhatók. A betegek plazmájában keringő szabad tumor DNS elemzése tehát felhasználható a betegség molekuláris szintű jellemzésére, kevésbé invazív mintával, mint a mielogram vagy a csontvelő biopszia. Az egyéb kapcsolódó mutációk keresése is megerősíti a projekt eredetiségét. Ezeknek az összevont adatoknak képesnek kell lenniük a betegek klinikai kezelésében bekövetkező változásokhoz.

Ebben a vizsgálatban a MYD88 L265P mutációjának allélgyakoriságát hasonlítjuk össze. 3 különböző technikával: specifikus allél PCR, digitális PCR és új generációs szekvenálás. Ily módon a vizsgálók azt a technikát fogják értékelni, amelyik a legjobb érzékenységgel és specifitással rendelkezik, és a maradék betegség markereként használható. Ezeket az adatokat összehasonlítjuk a referenciatechnikával, a fehérjeelektroforézissel. Ezt az értékelést az összes mononukleáris sejten, a DNSct-ben, a csontvelőben és a CD19+ osztályozott sejtekben végezzük. Ezután a vizsgálók két ponton követik ennek a mutációnak a kinetikáját a kezelés során: a kezelés közepén és végén.

E daganatok mutációs profiljának jellemzése lehetővé teszi prognosztikai faktorok meghatározását és potenciális új terápiás célpontok azonosítását. Ez a tanulmány új generációs szekvenálás segítségével valósul meg. A kezelésrezisztenciában szerepet játszó mutációkkal rendelkező géneket, például a CXCR4-et tanulmányozni fogják. A CXCR4 mutációi szerepet játszanak az ibrutinibbel szembeni rezisztenciában. Az esetek 20%-ában ARID1A mutációk, valamint TP53, KMT2D, CD79B, MYBBP1A mutációk is megtalálhatók.